北方 园 艺2002(4):60~61 ·生物技术·
BA+0.2 mg/L(毫克/升)IAA (
表
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2),繁殖系数可达 14。增
殖时,每 2O d(天)继代一次。
2.3 完整植株的再生及试管苗的移栽
将 3 cm(厘米)高左右的幼苗分别转入生根培养基,除对
照外培养 7 d(天)~10 d(天)均能形成根的突起,15 d(天)后
生根率可达 5O%以上。其 中,MS附加 IAA0.2 mg/I (毫克/
升)~O.5 mg/L(毫克/升)的培养基 的生根率可达 8O%(以
上)(表 3),且随着培养时间延长,生根率会不 断提高。培养
3O d(天)时,生根率可超 9O%。
表 2 不同培养基对不定芽增殖和生长的影响 *
*“+”表示叶色(绿色)浅、脆性小、生长速度慢,“+++”相反,
“++”居中。
在生根培养基中培养 15 d(天)时,绝大多数芽苗的根长
可达 2 cm(厘米),将试管苗拿出培养室,先于室内散射光下
表 3 不同浓度的生长素对非洲菊发根的影响
*生根植株的平均生根数。
放置 1 d(天),然后移到 自然环境 中锻炼 5 d(天)~7 d(天),
夏季时要注意适当遮荫。此时,试管苗叶色浓绿,叶片增大变
厚,已具有 自养能力,根系长达 3 cm(厘米)以上,呈白色,有
些根系长出了侧根,表明可出瓶了。于移栽的前一晚去掉封
口膜,移栽时洗去根部培养基,植入基质(珍珠岩 :菜园土:煤
渣 =1:1:1)中,注意盖膜保湿。一个月 内每隔 3 d(天)~4 d
(天)喷MS大量元素 50倍稀释液,幼苗成活率可达 95%以
上,接着可进行一般管理。
3 结论与讨论
目前我国栽培的非洲菊优 良品种都是从国外引进,成本
较高,加之由于非洲菊易退化,除需定期更新,用苗量大外,许
多好的种质资源正逐渐流失,故有关非洲菊的组培研究一直
在进行。虽然非洲菊可用茎尖和花托繁殖【3l4l6j,但叶片作为
外植体除具有取材方便,易灭菌等优点外,还能缩短愈伤组织
的诱导期,且增殖系数接近于目前报道的最高水平,尤其在种
质资源的保存方 面更有意义。研究得到的最佳不定芽诱导培
养基为 MS+:1.0 mg/L(毫克/升)BA+0.2 mg/L(毫克/升)
IAA,不定芽的诱导率可达 100%;最佳增殖培养基也为 MS+
4.0 mg/L(毫克/升)BA+0.2 mg/L(毫克/升)IAA,繁殖系数
可达 14;最佳的生根培养基为 MS+0.2 mg/L(毫克/升)~
O.5 mg/L(毫克/升)IAA。
’
参考文献
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(2):25
蝴 蝶 兰 的 组 培 快 繁 技 术
袁 全 国 ,庞 冉 琦2
蝴蝶兰是附生兰类,是生长在热带或亚热带的兰科植物,
是洋兰品种中较为名贵的一种。其花形奇异清秀,花大艳丽,
似蝴蝶,观赏价值极高。随着改革开放,人们生活水平有了很
大提高,赏兰的中国人也越来越多,品味也越来越高,蝴蝶兰
在国内市场的需求量也越来越大,只靠分株法繁殖蝴蝶兰无
法满足市场的需求,但组织培养做为一种新的繁殖手段被重
视与利用起来,做为工厂化生产蝴蝶兰是一种极有效的
方法
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,
它能在不长的时间内生产出成千上万的无性系新植株。
1 材料的采取与消毒
组织培养一般是以芽的外植体做为培养材料。首先取蝴
蝶兰的外植体放在 自来水下冲洗干净;用家用洗衣粉清洗 2
~ 3遍;再用 75%的酒精浸泡 3 min(分钟),再用 0.1%的升
汞浸 泡1 0 min(分钟 )或在1 0%的漂 白粉澄清 液 中浸泡
10 min(分钟)~15 min(分钟)然后用无菌蒸馏水在无菌超净
工作台上冲洗 4~6次,这样就可以得到了蝴蝶兰的无菌操作
外植体。
2 无菌材料的试管培养
将无菌的蝴蝶兰茎尖接种在愈伤组织诱导培养基中,其
培养基为 MS+GA32.0 mg/[ (毫克/升)+NAA0.1 mg/L(毫
克/升),pH=4.5~6.0,培养室温度为 25℃,用散射光每天
光照时间为 lZ h(小时)左右,光照强度约为 2 000 Lux(勒克
斯)左右,4~6周后产生原球体,将它取出;切分;转管形成新
的原球体,然后再将原球体转入分化培养基中,其培养基为
MS+6一BA2.0 mg/L(毫克/升)+NAA1.0 rag/L(毫克/升),
又待到 3~4周后,原球上就会有小幼苗长出,形成丛生状,再
将丛生苗分割开来,转入生根培养基 中,其培养基为:1/2MS
+IBA1。5 mg/I (毫克/升)+NAA0.05 mg/L(毫克/升)。
3 试管苗的移栽
当试管苗长至4 cm(厘米)~6 cm(厘米),有 3片以上的
叶与 2~3条榱时,就可以移出试管。为了移栽容易,在配制
生根培养基时可把琼脂的用量降低,这样培养基的硬度也降
低了,小苗向外移栽时,根部就不可能带有大量的培养基,冲
洗就容易了。为了保证其成活率,常在试管苗出瓶以前,可以
把试管瓶盖全部打开或半打开,使试管苗有适应外界环境的
机会,增加其外界抗性,打开时间为培养基不发霉为止。当把
小苗移出试管后放在 1 000倍的多菌灵水溶液中冲洗,把其
根部的琼脂7申洗掉,这样就可以移栽上盆,其养植基质为经过
高温消毒的苔藓,其 pH=5.5~7.0,大棚温度为25℃,相对
湿度为 5O%~7O%,在夏季以散射光为主,有时要适当的遮
荫,在兰花生长期间,每天应在叶片上喷水数次,每 5 d(天)~
1O d(天)施用 1次稀薄的液肥。
(1.山东菏泽市林业科学研究所,274000;2.山东菏
泽市牡丹研究所;274000)
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