实验二紫外-可见分光光度计法测定高锰酸钾溶液浓度一、实验目的熟悉掌握UV-9600型分光光度计的使用方法。学习标准曲线定量方法。并利用吸收曲线测定样品中组分的含量。二、原理:紫外-可见光谱是用紫外-可见光测量获得的物质电子光谱,它研究由于物质价电子在电子能级间的跃迁,产生的紫外-可见光区的分子吸收光谱。当不同波长的单色光通过被分析的物质时,测得不同波长下的吸光度或透光率,以ABS为纵坐标,波长久为横坐标作图,可获得物质的吸收光谱曲线。一般紫外光区为波长范围为190-400nm,可见光区的波长范围为400-800nm。根据朗伯一比尔定律:A=lgI/I=abc0A:吸光度;I:透过光的强度;0I:入射光的强度;a:物质对光的吸光系数(通常只和物质性质有关);b:吸收池的长度;c:待测物的浓度。如果固定吸收池的长度,已知物质的吸光度和其浓度成线性关系,这是紫外可见光谱法进行定量分析的依据。采用外标法定量时,首先配制一系列已知准确浓度的高锰酸钾溶液,分别测量它们的吸光度,以高锰酸钾溶液的浓度为横坐标,以各浓度对应的吸光度值为纵坐标,作图,即得到高锰酸钾在该实验条件下的工作曲线。取未知浓度高锰酸钾样品在同样的实验条件测量吸光度,就可以在工作曲线中找到它对应的浓度。三、仪器和试剂1ml和10ml移液管各一支10ml比色皿UV-9600型分光光度计,比色皿1cm的4个;容量瓶100ml的4个;移液管1ml、5ml和10ml各一个;容量瓶1000ml的1个;5.烧杯500ml的1个;四、实验
步骤
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KMnO4溶液的配制称取1.58g高锰酸钾固体,置于烧杯中溶解,定容至1000mL,混匀,该溶液浓度为0.01mol•L-1。KMnO4溶液吸收曲线的制作用吸量管移取上述高锰酸钾溶液1.0、2.0、4.0、8.0mL,分别放入四个100mL容量瓶中,加水稀释至刻度,充分摇匀,各溶液KMnO4浓度分别为0.0001mol•L-1、0.0002mol•L-1、0.0004mol•L-1、0.0008mol•L-1。在525nm波长测定a525值,以高锰酸钾溶液浓度为横坐标,a545值为纵坐标,绘制标准曲线。项目12345KMnO4浓度/mol•L-100.00010.00020.00040.0008A5253.样品测试配制待测高锰酸钾溶液1ml,加入蒸馏水3ml,摇匀,测定A525,从标准曲线中查出高锰酸钾溶液浓度。五、注意事项:1、比色皿透光面不要沾污,不能有指印,禁止用粗糙的纸张擦拭,溶液不要倒得太满(约3/4)以免溅出。2、比色皿座位置应统一为靠近单色光孔的一面。3、仪器在使用时,应经常关闭光路闸门来核对检流计的“0”点的位置是否改变。4、测定时应尽量使吸光度值在0.1〜0.8的范围内进行,以获得较高的准确度。5、比色皿使用完毕,应用蒸馏水洗净,用细软而易吸水的擦镜纸擦干,存放于比色皿盒中,使用时保护好比色皿的透光面。