便隐血联合免疫法在检测消化道出血中的应用王大光，杨晓枫，张进华（卫生部北京医院检验科北楼化验室，100730）【摘要】目的:评价血红蛋白免疫法与转铁蛋白免疫法在检测消化道出血中的应用价值。方法分别用血红蛋白免疫法与转铁蛋白免疫法对40例健康人及81例消化道出血病人的粪便进行检测，其中上消化道出血32例，胃癌6例，下消化道溃疡34例及直、结肿瘤9例。结果血红蛋白免疫法检测阳性率分别为46.9%、66.7%、32.3%、77.8%；转铁蛋白免疫法检测阳性率分别为71.9%、83.3%、47.1%、88.9%；两种方法联合检测，其中任何一项阳性即为阳性，阳性率分别为87.5%、100%、55.9%、100%。结论：血红蛋白与转铁蛋白联合检测法灵敏度高、特异性强，可同时检测粪便标本中的血红蛋白和转铁蛋白，进而提高消化道出血及肿瘤的阳性检出率。【关键词】转铁蛋白血红蛋白单克隆抗体便隐血试验是用来检查粪便中隐匿的红细胞或血红蛋白的一项实验，对检查消化道出血是一项非常有用的诊断指标。便隐血试验是美国最常使用的结直肠癌筛查试验，也是目前唯一通过随机临床试验证实可以降低结直肠癌所致死亡危险的检查，危险下降可达15%-33%。欧洲国家研究显示，实施每年粪便隐血检查可以降低30%的死亡率。近年来，便隐血检测越来越受到人们的重视。众所周知，化学法（匹拉米洞法）检测便潜血灵敏度低、特异性差且受饮食影响；血红蛋白单克隆免疫法灵敏度高、特异性强且不受饮食影响被广泛采用(1)。但血红蛋白由于受到肠内细菌作用及大肠黏液成分影响而容易变性，出现假阴性结果。转铁蛋白在肠道内抗菌能力强、性质稳定，且其活性持续时间较长。同时测定粪便标本中的血红蛋白和转铁蛋白，可显著提高消化道出血性疾病特别是肿瘤的检出率(2)。为探讨转铁蛋白在临床的应用价值，作者随机选择本院81例经内窥镜检查诊断有消化道出血疾病的患者及40例健康人进行粪便血红蛋白、转铁蛋白检测。结果如下：1．材料与方法1.1受检对象：我院81例经内窥镜检查有消化道出血的病人，其中上消化道出血32例，胃部肿瘤6例，下消化道溃疡及肿瘤43例，健康人40例。1.2试剂与方法①单克隆血红蛋白检测法：“消康保”便隐血检测试纸（胶体金法），批号20070805，万华普曼公司制造。②单克隆转铁蛋白检测法：“消康保”转铁蛋白诊断试纸（胶体金法），批号20070912，万华普曼公司制造。2．结果健康人与消化道出血病人粪便中血红蛋白和转铁蛋白检出结果的比较，见表1表1健康人与消化道出血病人粪便中血红蛋白和转铁蛋白同时检测结果比较 粪便来源 例数 血红蛋白 转铁蛋白 联合检测 健康人 40 1/40（2.5%） 1/40（2.5%） 1/40（2.5%） 上消化道出血 32 15/32(46.9%) 23/32(71.9%) 28/32(87.5%) 胃部肿瘤 6 4/6(66.7%) 5/6(83.3%) 6/6(100.0%) 下消化道溃疡 34 11/34(32.3%) 16/34(47.1%) 19/34(55.9%) 直、结肠肿瘤 9 7/9(77.8%) 8/9(88.9%) 9/9(100.0%)3.讨论3.1从表1中可以看出，40例健康人中有一人血红蛋白和转铁蛋白检测均阳性。据Herzog和Cameron等研究(6)，正常人24小时胃肠道生理性出血量为0.6ml，若每日大于2ml，则属于病理性出血。由于免疫学方法的高度敏感性，又由于有正常的生理性失血，如此高的灵敏度，在某些正常人特别是服用刺激胃肠道药物后可能造成假阳性(7)。3.2在上消化道出血的32例病人中，血红蛋白法阳性15例，阳性率46.9%，约有40-50%的上消化道出血不能检出。原因是：①血红蛋白或红细胞经过消化酶降解或消化殆尽，已不具有原来的免疫原性；②过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前滞现象；③病人血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配(4)。转铁蛋白法阳性23例，阳性率71.9%；联合检测（其中任何一项检测结果阳性即为阳性）阳性28例，阳性率87.5%。转铁蛋白是血浆中主要的含铁蛋白质，在健康人粪便中几乎不存在，而在消化道出血中大量存在。血液中的血红蛋白和转铁蛋白的比值为51.2/1,而粪便中血红蛋白与转铁蛋白的比值为5.4/1。转铁蛋白在肠道内抗菌能力强，稳定性高于血红蛋白。研究表明转铁蛋白与粪便混悬液在37℃孵育4小时后，其抗原活性无明显变化，而血红蛋白抗原活性已丧失65%。由于转铁蛋白在肠道内的自身稳定性及抗菌能力都强于血红蛋白，所以可以克服被检标本中的血红蛋白在胃肠道内滞留时间过长而被分解或破坏后出现的“假阴性”结果，提高阳性检出率(5)。3.3对于下消化道溃疡的病人，血红蛋白、转铁蛋白及联合检测阳性率较低。一方面可能受肠内细菌的作用，一些血红蛋白被分解。另一方面下消化道溃疡的病人，出血呈间断性，而且与标本的采集方法密切相关，溃疡部位的出血不均匀地分布在粪便内，病人在留取标本时没有多部位取便而漏掉了有血的部位。因此，欲提高阳性率，必须遵照操作规程连续3天采集标本，病人要多部位取便；实验室对标本要多点采样进行检测。数据显示，对下消化道出血的病人，用转铁蛋白及联合检测还是能提高阳性检出率。3.4对于胃部肿瘤及直、结肠肿瘤的病人，应用联合检测阳性率均达到了100%。如此高的阳性率是作者没有预测到的。一方面可能是因为选取的病人处于中晚期，肿瘤部位持续出血。另一方面，对于血红蛋白法检测阴性的标本应用转铁蛋白法和联合检测法有效的提高了检出率。试验过程发现，胃部肿瘤组及直、结肠肿瘤组各有一份的标本转铁蛋白阴性而血红蛋白阳性，这符合有资料表明约10%的病人呈现转铁蛋白值较低的现象(3)。已知遗传性无转铁蛋白血症、各种恶性疾病、炎症为主的多种疾病均可导致转铁蛋白低下，所以与血红蛋白同时检测可起到优势互补的作用。【参考文献】1．杨明.转铁蛋白于血红蛋白同时检测消化道出血.临床检验杂志2003.21(2).83-842．内田夫，他.关于免疫学便潜血反应的基础研究［J］临床检查仪器试剂，1988,11（2）.167-1723.寇丽摘临床基础检验学北京:人民卫生出版社,1997.141-1514.冼永明三种类便隐血试验的比较研究.中华内科杂志,1990,29(4):232.5.石品，赵连爽，祁虹，等便潜血单克隆抗体法与联苯胺法的对比试验［J］中国医科大学学报，1997.26(2):2256.FinlayA,MacracandD,JamesB,etal.RolationshipbotwoonpttersofBleedingandHemoccultsensitivityinpatientswithColorectalCancersorAdenom［J］,Gastroenterology，1991,82:8981PAGE1
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