金花茶的组培快繁技术

金花茶的组培快繁技术 杨文龙 ( 广西职业技术学院农业技术工程系2002级应生班) 摘要：利用植物细胞的全能性，经组织培养技术，获取大批量的无菌幼 苗。材料是用金花茶幼果，取其幼坯进行培养，获取较大的愈伤组织块，进 一步诱导丛生芽，从而得到无菌的脱毒瓶苗，并继代，扩大繁殖,获取大量金花茶幼苗。 关键词：细胞全能性 组织培养 脱毒 无菌苗 前言：金花茶是山茶属金花茶组植物，是世界珍贵、稀有的观赏植物和种质 资源，并具有独特的药用价值。并被称为花卉中的“超级明星”、“茶族皇后”、 及植物界的“大熊猫”。金花茶主要产于我国和越南。于20世纪60年代初在我国广西南部首次发现。目前世界上已报道的23个分类群中，我国产21个，特有19个，有4个分类群被列为我国一级和二级保护植物，越南产4个，特有2个。金花茶为常绿灌木或小乔木，高约为2-5米，其枝条疏松，树皮淡灰色，叶深绿色，如皮革般厚实，狭长圆形，先端尾状渐尖或急尖。叶边缘 微微向背面翻卷，有细细的硬质锯齿。金花茶组植物的垂直分布的高度，一 般出现于海拔700米以下，以海拔200-500米之间的范围较常见，垂直分布 的下限为海拔20米左右。金花茶组植物在分布区内除分布于碳酸盐岩发育成 的各种岩溶地貌外，砂页岩、砾岩和花岗岩发育成的流水浸蚀的地貌也有分 布。 金花茶的花为金黄色，耀眼夺目，仿佛涂着一层蜡，晶营而油润，似有半 透明之感。金花茶的花单生于叶腋，花开时，有杯状、壶状或碗状，娇艳多 姿，秀丽雅致；其果实为蒴果，内藏6至8粒种子，种皮黑褐色。金花茶4-5月叶芽开始萌发，11月份开始开花，花期可延续至翌年3月。金花茶还有较高的经济价值。其花除可做观赏外，尚可入药，可治便血和妇女月经过多， 也可作食用染料；叶除泡茶作饮料外，也可药用，可治痢疾和用于外洗烂疮； 其木材质地坚硬，结构致密，可雕刻精美的工艺品及其他器具。此外，其种 子尚可榨油、食用或工业上用作润滑。同样还具有抗癌、降低胆固醇与β脂蛋白的作用。 基于以上金花茶的各种经济价值及其市场前景，利用现代的组织培养技 术代替过去的扦插、嫁接和芽插栽培，可不受季节的约束而大量快速地繁殖。 从而促进金花茶经济价值的更快开发，并服务于人类。 .生产工艺流程： 培养基配制 ? 培养基?接种培养?外植体预处理?采取外植体 ? 单芽、丛生芽?继代培养?无根苗?生根苗?移栽定植 ? ? 市场出售 提取药用成份 ．快繁技术要点 诱导培养基 +NAA+IBA+PVP+V+LH ? MS+BA1。51.01.01.0C1500 ? MS+BA+NAA+IBA+PVP+V+LH 2.01。51。51C1500 继代培养基：MS+BA+NAA+IBA 1。5～31～1。50。1～0。5 生根培养基：1/2MS+BA+NAA+0.3%活性炭 0。10。5 以上培养基糖的用量为4%,琼脂0.4～0.9%,PH 6.0～6.4 选材 在天气晴朗的上午或午后采摘当年未成熟的幼果，幼果应无病虫、无畸 形，果皮色泽正常。 外植体的预处理 将采回的幼果，先用自来水冲洗，之后用洗衣粉洗，并用刷子轻刷外皮， 将果皮柔毛刷掉，冲洗干净，置于超净台的瓶子内，用40倍的新洁尔灭溶液消毒4－6分钟，中间轻轻摇晃瓶子；再用0.1%的升汞消毒5-8分钟,并轻轻摇晃瓶子,最后用无菌水冲洗4-5次即可。 接种 用解剖刀将消毒好的幼果外皮削掉(每切一下换一把解剖刀),然后剥开种皮,最后露出完整的坯,切下整个坯或坯根或坯芽接到培养基上,每瓶一株,轻插于培养基 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 面,不易太深。 成苗的诱导 开始3-4天给予暗培养，温度22?左右，之后，移到光照强度为 500-2000lax，温度为25?的光照培养箱内培养，每天光照时长为12-14h。7天后，?开始有明显的生长迹象，15天后开始长出较为肥厚的畸形叶，根部 有0.3?左右的愈伤组织；?在15天且开始长愈伤组织,并长出墨绿色的小叶子。1个月之后?和?都长出较大的暗红色的愈伤组织；?长出的畸形叶更肥 厚，有黄豆粒般大小，呈灰绿色，但生长绶慢；?中嫩芽已长有0.5?高。两个月之后，将?较接到?中进行培养，将畸形叶也切下，接入到?中，1个月后，畸形叶表面有红色颗粒形成，并渐渐增多转绿，开始分化出丛生芽。4个月之后，?中的金花茶已长到5-6个茎节，此时可进行继代培养。 继代培养 将长出的芽从愈伤组织上切下,并切去叶片，接到继代到培养基上,每瓶一株。将愈伤组织的表面老化部分削去，重新接到新的?中继续诱导长芽。 开始一个星期进行暗培养，温度在25?，然后将温度调到28?，光照1500lax左右，约10天，在叶腋处长出腋芽来。40天瓶苗可长到5-6个茎节。 生根培养及炼苗、移栽 将继代瓶苗接到生根培养基上，两个茎节一株，每瓶5株，半个月后在金花茶的根部长出明显的突起，此时可以进行炼苗。把瓶苗拿到走道的架上，3天之后打开瓶盖，并适当地喷上低浓度的杀菌剂，保持湿度，1个星期或更长时间（不超过10天）之后移植到沙盘上。进行大棚式的管理，1个星期左右开始生长，并长出根须。 金花茶组培苗的栽培管理 3. 1 露地栽植 3.1.1土壤选择肥沃排水良好的微酸性土壤上，PH值在某种程度上。5.5—6.0之间 3. 1. 2种植时间2—3月春植以小苗为主；11月后秋植，效果较好。 3. 1. 3施肥茶花不喜肥，一般花前10—11月，花后4—5月，施肥2—4次。肥料主要采用复合肥、堆肥，并结合适量磷肥；（施肥原则薄施多施。壮苗多施， 弱苗少施或不施）。 3. 1. 4茶花生长缓慢，不宜强度修剪；树冠发育均匀，也不需特殊修剪，只需剪 除病虫枝，过密枝，弱枝和徒长枝。新植苗，为确保成活，也可适度修剪。摘蕾 是栽培管理的重要一环，一般每枝最多保留3个花蕾，并保持一定间距，这样可减少植株养分消耗过大，影响开花。茶花花期长达半年，及时搞去凋萎的花朵， 减少养分消耗，增强树势大有好处。 3. 1. 5病虫害防治与中耕除草。茶花的主要病害有褐斑病、黄化病及枝上苔藓寄 生，虫害为结蜘蛛。各种介壳虫、刺蛾。蔷薇叶蜂等。病虫害的发生，大大影响 树势及其观赏性。防治方法分别为：褐斑病在春季发前喷洒波尔多液，以后每半 个月继续喷洒预防，并注意排水与施肥，除去被害叶并烧毁。黄化病主要由土壤 缺微量元素引起，可经常洒施硫酸亚铁或硫酸镁溶液加以防治。红蜘蛛和各种介 壳虫防治喷施松脂合剂并加强通风。各类刺蛾，蔷薇叶蜂等用40%氧化乐果 400—155倍液或80%敌敌畏乳油1000~1200 倍液喷施防治。中耕除草，清洁园地也可有效防治病虫害，增强树势，使花朵肥大。全年进行中耕除草6~7次。 3. 2 盆栽 3. 2. 1 盆土选择 选用微酸性、疏松、肥沃的混合土作盆土。混合土的比例为园 土6份、松叶腐殖土3份，砂质1~2份。 3. 2. 2盆的选择 培育以泥瓦盆为好，盆的尺寸大小与苗的比例为：苗高 40~50cm，冠幅20~25cm的茶花，盆的口径在20cm左右。其它大小的以此类推。商品苗用紫砂盆较好，可提高观赏效果。 3. 2. 3盆苗的选择 选择生长健壮、主干、单干无分枝，树冠优美，叶片嫩绿， 无病虫害的植株。 3. 2. 4浇水管理 新植苗第一次浇足透水，2个月内勤浇水，保持盆土湿润。以后同其它花木盆苗一样进行浇水。次数观气候情况而定，以保持土壤湿润的原则。 春天多浇，满足发芽抽梢的需要；夏季宜在早晚，雨季防积水，秋旱要及时浇水， 冬季为防冻，浇水在中午进行。 3. 2. 5蔽萌与防寒 茶花春天与雨季要给予充足的阳光，夏秋时节进行蔽萌降温；冬季气温下降 到零度时，需搬入室内防寒。 3. 2. 6 花期控制 主要是通过品种选择、温度控制和激素处理等手段来达到提早开花或延迟开 花的目的。如为了延迟开花，可选择晚花品种，并对其进行低温控制（2~3度以 上的冷库，贮藏经包扎防寒处理的植株），可延迟一月开花。为使其提早开花须 选择早花品种如小桃红、雪塔、四面景等，再经过追施重肥和激素处理。方法是 在茶花春季管理方式停止。花芽形成后，追施重肥，使花后嫩枝及早充实成熟， 及早停止生长；在7月中或8月初用手笔点涂500~1000PPm赤霉素到花蕾上三天一次，伴以合理水肥；9月份视花蕾肥大情况再点涂赤霉素，在达不到 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 时， 酌量强加点涂次数，继续伴以喷水追肥，则蓓蕾迅速增长，可提早在9月下旬至 11月开花。 4 病害及其防治 41炭疽病 【病因及症状】该病由赤叶枯刺盘孢菌（Colletotrichum gloeosporids）侵染茶花叶片而造成。这是茶花的主要病害，发病率达33%。病症多出现于叶缘、叶尖和叶脉两侧。初现暗绿色斑纹，后逐渐扩大成不规则大斑，颜色由褐色变为黑色， 严重时可扩散到整个叶片，引起大量落叶。 【发病规律】该项病的发生与温度和湿度有密切关系。一般发病适温为25~28?。 当温度适宜，湿度增加时，特别是连续降雨时，能促进病害的蔓延和发展。一般 4月份开始发病，5~7月份病害达到高峰，9月份以后病情趋向停止。 【防治方法】?彻底清除病叶。?冬季剪除病枯枝。?在每年发病期前，喷洒 1%的波尔多液，每半个月一次。?每周用600倍百菌清水溶液喷洒一次，连续 喷3~4次。?加强栽培管理，科学除草施肥。在春季可增施磷、钾肥，在叶片展 开前喷施0.15%的磷酸二氢钾水溶液。 4. 2 藻斑病 【病因及症状】该病由寄生性锈藻（Cephaleuros virescens）引起。在叶片的两面均可出现病斑，但以叶面为主。初期为针状呈灰绿色小圆点，后逐渐呈放射状向 外扩展，形成近似圆形或不规则的病斑。病斑隆起明显，表面有细条纹式的毛毡 状物。后期病斑颜色由灰绿色变为暗褐色。由于病原体的覆盖，影响叶面光合作 用的进行，因而使茶花植株生长衰弱。 【发病规律】寄生性锈藻以丝状营养体在寄生组织中越冬，在潮湿条件下产生游 动孢子，孢子侵入新植株而使它得病。该病原菌是一种很弱的寄生菌。在高温高 湿的条件下，因通风透光差而生长不良的茶花林，发生此病最为严重。 【防治方法】?加强培育管理，合理施肥，及时修剪，避免茶花林地过于荫蔽， 做到通风透光，以提高茶花抗性。?可用0.2%~0.5%硫酸铜溶液喷雾防治。 4. 3枯枝病 【病因及症状】由病原真菌（Glomerella cingulata）浸染茶花嫩枝或老枝后引起 的一种病害。受害枝条坏死，叶片绿变为淡黄，从顶部向下逐渐干枯脱落，最后 整个枝梢干枯死亡。 【发病规律】该病的发生情况是，随着春季气候气温的回升，在病枯树上越冬的 病原菌孢子堆逐渐成熟，随风飘散到附近的茶花枝条上，从新芽、嫩枝伤口、叶 痕、嫁接或修剪伤口等处，侵入茶树为害，并大量繁殖。 【防治方法】?冬季剪除病枯枝，集中予以烧毁。?摘除无用的不定芽和细弱枝， 减少病原菌的附生场所。?将带病植株隔离养护。?在茶花植株萌芽抽梢之前， 用甲基托布津、福美双、百菌清等杀菌剂喷施，特别要保证枝条伤口部位的喷药。 ?多施磷、钾肥，少施氮肥。 4. 4 根腐病 【病因及症状】该病由多种病原菌引起，其中最常见的有Phytophthora cinnamoni Cylindrocladium crotalariae和Armillaria三种，主要侵染茶花的根系。受害植株 根部腐烂变黑，叶片变黄，梢尖死亡，花芽掉落，植株逐渐凋萎死亡。 【发病规律】病原菌以菌核在土壤或病株上越冬。翌年春天，当温湿度适宜时， 菌核萌发菌线，在土壤中蔓延，侵害植株根部。气温越高，其发病率也越高。 【防治方法】?要及时挖除病株及其附近的带菌土，并用1%硫酸铜溶液对病株周围的土壤消毒，防止病菌扩散蔓延。?保持土壤排水良好，严防栽培地积水。 ?选择抗病能力强的茶花品种进行栽培。 4. 5 赤叶斑病（赤叶枯病） 【病因及症状】该病由半知菌类叶点菌属（Phyllosticta sp.）真菌引起。病斑多发生在较嫩的叶片上，初为淡褐色圆形渍状小点。以后病斑蔓延，颜色由淡褐色 变为棕褐色，有时多个病斑连合成较大的斑块或蔓延于整个叶片，引起叶片的大 量枯焦和脱落。 【发病规律】该病菌存活在寄主的病残体上，孢子借助风雨、流水等传播。病害 一般从5月份开始发生，7~9月份为发病高峰，受害叶片在大量脱落。 【防治方法】?发病初期，可用70%甲基托布津1000~1500倍液，或者25%灭 菌丹400倍液喷洒防治。?在干旱时，可增加叶片喷水，以抑制病害的发生。 4. 6花腐病 【病因及症状】该病是由茶花花腐真菌（Giborinia camelliae Kohn）侵染花瓣所引发的一种病害。受害的花朵先是出现棕褐色小斑点，以后逐渐扩大，直至整个 花朵变成褐色而枯萎。 【发病规律】花腐真菌可在花柄处形成菌核，其孢子可随风传播。一般秋季发病 率较低。在12月份至翌年3月份，随着气温的升高，花朵受害率增高。 【防治方法】?发现有感染此病的茶花花朵时，应及时摘除，并予集中烧毁。特 别是在花期，更要及时清扫掉落在地面上的病花。?在开花前，可用杀菌剂，如 多菌灵，喷洒花蕾2~3次。?多选栽秋季开花的茶花品种，或者用赤霉素处理中 晚花品种，使这秋季开花，以躲开茶花花腐真菌的发生高峰期。?采用生物防治 方法。在土壤中接种Sporidesmium sclerotivorum 、Coniotnyrium minitans两种真菌，以杀死病菌孢子。?不要购买和栽培有花腐病的茶花植株。 4. 7 烟煤病 【病因及症状】该病是由蚜虫和蚧壳虫危害而诱发的。受害茶花叶片的表面上覆 盖一层病菌的菌丝，形成黑色的“烟煤”层，阻碍了茶花植株的正常光合作用及 气体交换，使其生长发育严重受阻。 【发病规律】该病病菌喜低温高湿的环境条件，其中10~20?的温度条件最适宜于病菌的生长。在这个温度范围内，温度越大，病菌繁殖蔓延越快。长期杂草丛 生、湿度大、光照差的茶花林，有利于病害的发生和蔓延。 【防治方法】诱发烟煤病的害虫，主要是蚜虫和蚧壳虫等，因此，要防治此病 害必须首先防治茶花的蚜虫和蚧壳虫，害虫灭，病即自然消除。具体方法，可 参见以下“主要虫害及其防治”一节中的蚜虫和蚧壳虫的防治 金花茶组织培养过程中要注意的几个问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ． 继代时苗的剪切 继代时苗的剪切要干净、整齐、一致，不留老叶及旧的愈伤组织，以免引 起褐化及污染。 培养条件的控制 在金花茶的培养过程中，应保持室温20-25?以上，不超过30?；光照强度为500-2000lax，有利于茎杆及叶的生长，形成侧生芽；湿易保持在85%左右。 防止污染 金花茶的组织培养过程中污染的主要有细菌和真菌及褐化。细菌污染主要 表现为在培养基表面形成乳白色环纹及浅黄色环纹；真菌的污染主要表现为 红色、黄色、褐色和白色菌落等，严重的将培养基全部分解，形成融溶的糊 状物，使培养基养分尽失，导致组培苗养分供给不足，生理不调，出现病状， 直至死亡。因此在各个生产过程中，应严格要求在无菌状态下操作。为减少 人为污染，在接种前，工作人员必须很好地洗手，并用75%的酒精擦拭双手，双手不留指甲，超净台内操作时动作幅度不易过大，所用垫片应严格消毒后 方可使用。 小结 利用组织培养技术、获得金花茶组培苗，具有分化率高，繁殖系数大且快， 根系较为发达，更利于露地栽培。不仅可快速地获取优质种苗，而且满足了市 场的需求，更有利于其潜在价值的开发利用。植物组织培养技术在实践中取得 了引人瞩目的成就，展示了其广阔的发展前景，促使采用该技术大规模生产优 质种苗将成为必然趋势！ 参考文献： [1] 李 云、《林果花菜组织培养快速育苗技术》 中国林业出版社.2001 [2] 刘 敏、《花卉组织培养与工厂化生产》 地质出版社.2002 [3] 曹孜义、《实用组织培养技术 教程 人力资源管理pdf成真迷上我教程下载西门子数控教程protel99se入门教程fi6130z安装使用教程 》 甘肃科学技术出版社.1996