0502薄层色谱法

0502薄层色谱法薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在开放容器内用开放剂开放，使供试品所含成分分别，所得色谱图与适宜的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检査或含量测定。1.仪器与材料(11薄层板按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。固定相中可加入黏合剂、荧光剂。硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。F254为在紫外光254nm波长下显绿色背景的荧光剂。按固定相粒径大小分为一般薄层板（10〜4(^m)和髙g薄层板(5〜10pm)0^保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特殊处理和化学改性以适应分别的要求，可用试验室自制的薄层板。固定相颗粒大小一般要求粒径为10〜40pm。玻板应光滑、平整，洗净后不附水珠。(2)点样器一般接受微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。、(3>开放容器上行开放一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽开放缸，开放时须能密闭。水平开放用专用的水平开放槽。(釣显色装置喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸溃显色可用专用玻璃器械或用适宜的开放缸代用；蒸气熏蒸显色可用双槽开放缸或适宜大小的干燥器代替。(5)检视装置为装有可见光、254nm及365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，可附加摄像设备供拍摄图像用。暗箱内光源应有足够的光照度《(6)薄层色谱扫描仪系指用肯定波长的光对薄层板上有吸取的斑点，或经激发后能放射出荧光的斑点，进行扫描，将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。2.操作 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 (1)薄层板制备市售薄层提临用前一般应在110°C活化30分钟。聚■■■■_IM_I-—*酰胺薄膜不需活化。铝基片薄层板、塑料薄层板可依据需要剪裁，但须留意剪裁后的薄层板底边的固定相层不得有破损。如在存放期间被空气中杂质污染，使用前可用三氣甲烷、甲醇或二者的混合溶剂在开放缸中上行开放预洗，晾干，110X：活化，置干燥器中备用。自制薄层板除另有 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 外，将1份固定相和3份水(或加有黏合剂的水溶液，如0.2%〜0.5%羟甲基纤维素钠水溶液，或为规定浓度的改性剂溶液）在研钵中按同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2〜0.3mm)，取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后，在110C烘30分钟，随即置于有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度，在反射光及透视光下检视，表面应均匀、平整、光滑，并且无麻点、无气泡、无破损及污染。<2)点样除另有规定外，在洁净干燥的环境中，用专用毛细管或协作相应的半自动、自动点样器械点样于薄层板上。一般为圆点状或窄细的条带状，色样基线距„底,边10〜15mm,高效板一般基线离底边8〜lOmnu圆点状直径一般不大于4mm，高效板一般不大于2mm。接触点样时留意勿损伤薄层表面。条带状宽度一般为5〜10mm，高效板条带宽度一般为4〜8mm,可用专用半自动或自动点样器械喷雾法点样。点间距离可视斑点集中状况以相邻斑点互不干扰为宜，一般不少于8mm，高效板供试品间隔不少于5mm。{3>开放将点好供试品的薄层板放人开放缸中，浸人开放剂的深度为距原点5mm为宜，密闭。除另有规定外，一般上行开放8〜15cm，髙效薄层板上行开放5〜8cm。溶剂前沿达到规定的展距，取出薄层板，晾干，待检测。开放前如需要溶剂蒸气预平衡，可在开放缸中加人适量5的开放剂，密闭，一般保持15〜30分钟。溶剂蒸气预平衡后，应快速放人载有供试品的薄层板，马上密闭，开放。如需使开放缸达到溶剂蒸气饱和的状态，则须在开放缸的内壁贴与开放缸高、宽同样大小的滤纸，一端浸人开放剂中，密闭肯定时间，使溶剂蒸气达到饱和再如法开放。必要时，可进行二次开放或双向开放，进行其次次开放前，应使薄层板残留的开放剂完全挥干。(4)显色与检视有颜色的物质可在可见光下直接检视，无色物质可用喷雾法或浸溃法以适宜的显色剂显色，或加热显色，在可见光下检视。有荧光的物质或显色后可激发产生荧光的物质可在紫外光灯（365nm或254nm)下观看荧光斑点。对于在紫外光下有吸取的成分，可用带有荧光剂的薄层板（如硅胶GF254板），在紫外光灯（254nm)下观看荧光板面上的荧光物质淬灭形成的斑点。(5)记录薄层色谱图像一般可接受摄像设备拍摄，以光学照片或电子图像的形式保存。也可用薄层色谱扫描仪扫描或其他适宜的方式记录相应的色谱图。3.系统适用性试验按各品种项下要求对试验条件进行系统适用性试验，即用供试品和标准物质对试验条件进行试验和调整，应符合规定的要求。(1)比移值(礼）系指从基线至开放斑点中心的距离与从基线至开放剂前沿的距离的比值。p—基线至开放斑点中心的距离坨—~基线至开放剂前沿的距离除另有规定外，杂质检査时，各杂质斑点的比移值风以在0.2〜0.8之间为宜.(2)检出限系指限量检査或杂质检査时，供试品溶液中被测物质能被检出的最低浓度或量。一般接受已知浓度的供试品溶液或对比标准溶液，与稀释若干倍的自身对比标准溶液在规定的色谱条件下，在同一薄层板上点样、开放、检视，后者显清楚可辨斑点的浓度或量作为检出限。(3)分别度（或称分别效能）鉴别时，供试品与标准物质色谱中的斑点均应清楚分别。当薄层色谱扫描法用于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻峰之间有较好的分别度，分别度0?)的 计算公式 六西格玛计算公式下载结构力学静力计算公式下载重复性计算公式下载六西格玛计算公式下载年假计算公式 为：R^2(d2-d1)/(Wl-i-W2)式中A为相邻两峰中后一峰与原点的距离；A为相邻两峰中前一峰与原点的距离；^^及^^为相邻两峰各自的峰宽。除另有规定外，分别度应大于1.0。在化学药品杂质检查的方法选择时，可将杂质对比品用供试品自身稀释的对比溶液溶解制成混合对比溶液，也可将杂质对比品用待测组分的对比品溶液溶解制成混合对比标准溶液，还可接受供试品以适当的降解方法获得的溶液，上述溶液点样开放%后的色谱图中，应显示清楚分别的斑点。(4>相对标准偏差薄层扫描含量测定时，同一供试品•58•溶液在同一薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对标准偏差应不大于5.0%;需显色后测定的或者异板的相对标准偏差应不大于10.0%。4.测定法(1)鉴别按各品种项下规定的方法，制备供试品溶液和对比标准溶液，在同一薄层板上点样、开放与检视，供试品色谱图中所显斑点的位置和颜色（或荧光)应与标准物质色谱图的斑点全都。必要时化学药品可接受供试品溶液与标准溶液混合点样、开放，与标准物质相应斑点应为单一、紧密斑点。(2)限量检査与杂质检査按各品种项下规定的方法，制备供试品溶液和对比标准溶液，并按规定的色谱条件点样、开放和检视。供试品溶液色谱图中待检查的斑点与相应的标准物质斑点比较，颜色(或荧光)不得更深；或照薄层色谱扫描法操作，测定峰面积值，供试品色谱图中相应斑点的峰面积值不得大于标准物质的峰面积值。含量限度检查应按规定测定限量。化学药品杂质检查可接受杂质对比法、供试品溶液的自身稀释对比法、或两法并用。供试品溶液除主斑点外的其他斑点与相应的杂质对比标准溶液或系列浓度杂质对比标准溶液的相应主斑点比较，不得更深，或与供试品溶液自身稀释对比溶液或系列浓度自身稀释对比溶液的相应主斑点比较，不得更深。通常应规定杂质的斑点数和单一杂质量，当接受系列自身稀释对比溶液时，也可规定估量的杂质总量。(^|1测丨窦>照薄层色谱扫描法，按各品种项下规定的方制备供试品溶液和对比标准溶液，并按规定的色谱条件点样、开放、扫描测定。或将待测色谱斑点刮下经洗脱后，再用适宜的方法测定。5.薄声色谱扫褙法〜一案^用肯定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中可吸取紫外光或可见光的斑点，或经激发后能放射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于鉴别、检查或含量测定。可依据不同薄层色谱扫描仪的结构特点，依据规定方式扫描测定，一般选择反射方式，接受吸取法或荧光法。除另有规定外，含量测定应使用市售薄层板。扫描方法可接受单波长扫描或双波长扫描。如接受双波长扫描，应选用待测斑点无吸取或最小吸取的波长为参比波长，供试品色谱图中待测斑点的比移值(风值）、光谱扫描得到的吸取光谱图或测得的光谱最大吸取和最小吸取应与对比标准溶液相符，以保证测定结果的精确     性。薄层色谱扫描定量测定应保证供试品斑点的量在线性范围内，必要时可适当调整供试品溶液的点样量，供试品与标准物质同板点样、展开、扫描、测定和计算。薄层色谱扫描用于含量测定时，通常接受线性回归二点法计算，如线性范围很窄时，可用多点法校正多项式回归计算。供试品溶液和对比标准溶液应交叉点于同一薄层板上，供试品点样不得少于2个，标准物质每一浓度不得少于2歌渝公l郁蓄ouryao·com中国药典2015年版个。扫描时，应沿开放方向扫描，不行横向扫描。