环境微生物监测标准操作规程一、监测指征1.感染暴发或感染流行时,环境因素在感染传播中有流行病学意义。2.监测潜在的危险环境状况,
证明
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有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被成功清除。3.当某项感染控制
措施
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改变时,评估其效果;或者根据规范要求,仪器设备或系统启用时监测。4.目标性监测的需要。5.循证医学证据支持。二、空气监测(沉降法)(一)采样时间:消毒处理后与进行医疗活动之前。(二)采样高度:距地面垂直高度80~150cm。(三)采样点设置1.非洁净房间:室内面积≤30㎡,在对角线上设里、中、外3点。里、外两点位置各距墙1m;室内面积>30㎡,设东、西、南、北、中5点。其中东、西、南、北4点均距墙1m。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。2.洁净房间:清洁房间在空态或静态条件下,根据房间的不同清洁级别进行布点,操作按照GB50333—2002。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30min后送检培养。(四)采样注意事项1.采样人员做好手部卫生,佩戴口罩、帽子等个人防护装备。进入清洁房间采样须穿洁服。2.皿盖打开顺序应先内后外;手臂及头不可越过培养皿上方;行走及放置动作要轻,尽量减少对空气流动状态的影响;皿盖应扣放,以防污染。3.采样结束后,由外向内合上皿盖。4.采样完毕的培养皿应在6h内培养。(五)实验室检验1.培养皿在37℃培养48h后,进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB/T4789.28—2003;菌落计数方法按照GB\T7918.2—1987;致病菌检验:溶血性链球菌检验按照GB/T4789.11—2003,沙门菌检验按照CB\T4789.4—2003,铜绿假单胞菌检验按照GB/T7918.4—1987,金黄色葡萄球菌检验按照CB\T7918.5—1987,,2.计算结果:非洁净房间以100c㎡的平皿在空气中暴露5min即相当于10L空气中的细菌数,计算公式为:细菌数(cfu/m3)=1000÷(A/100×t×10/5)×N=50000N/At式中:t——平皿暴露于空气中的时间(min);N—一培养后平皿上的菌落数(cfu/平皿);A——所用平皿的面积(c㎡)。洁净房间直接以“个/(30min·Φ90)”平皿为单位计算结果。(六)结果判断:参照GB15982—1995《医院消毒卫生标准》。三、物体表面监测(一)采样时间:消毒处理后4h内。(二)采样方法被采样本面积<100c㎡取全部表面;如采样面积≥100c㎡,连续采样4个位置(不可有重叠),每个位置采5cm×5cm的大小,用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入10ml无菌生理盐水试管内。不
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的物体表面,用棉拭子直接涂擦,采样面积≥30c㎡(三)采样注意事项1.送检时间不得超过6h,若样品保存于4℃,则不得超过24h。2.消毒后采样一定要采用中和剂,不同消毒剂所用中和剂不同,可参考2002版《消毒技术规范》。(四)实验室检验1.取1m1倾注培养,平行双份。37℃培养48h,进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB/T4789.28—2003;菌落计数方法按照(3B/T7918.2—1987;致病菌检验与空气监测相同。2.计算公式:细菌总数(cfu/c㎡)=(平板菌落数×稀释倍数)/采样面积(c㎡。)(五)结果判断:参照GB15982—1995《医院消毒卫生标准》。(注:文档可能无法思考全面,请浏览后下载,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注!)