常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量(参考下
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)。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。常用的培养器皿培养器皿底面积(cm2)加培养液量(mL)可获细胞量96孔培养板0.320.110524孔培养板21.05×10512孔培养板4.52.01066孔培养板9.62.52.5×1064孔培养板285.07×1063.5cm培养皿83.02.0×1066cm培养皿215.05.2×1069cm培养皿4910.012.2×10610cm培养皿5510.013.7×10625cm塑料培养瓶255.05×10675cm塑料培养瓶7515~302×10725cm玻璃培养瓶194.03×106100cm玻璃培养瓶37.510.06×106250cm玻璃培养瓶7815.02×1072500cm旋转培养瓶700100~2502.5×108注:各种单层生长的细胞在培养皿中长满的细胞数,主要取决于器皿底表面积和细胞体积的大小。上表以Hela细胞为例给出的可获细胞量仅作参考。各种孔板细胞接种量细胞培养瓶(板)生长面积容量与细胞数(大约)96孔板 4~5X104 35mm培养皿 1X106 48孔板 1.3X105 60mm培养皿 2.6X10624孔板 2.5X105 100mm培养皿 7X10612孔板 5X105 150mm培养皿 1.8X107 6孔板 1.2X106 细胞瓶面积 容量 工作体积 细胞数目12.5cm2 25ml 2ml 5X10525cm2 50ml 5ml 1X10635cm2 75ml 10ml 2X10 675cm2 250ml 15ml 4X10 6150cm2 700ml 40ml 1.1X107