CS清咽膏的药学研究(可编辑)

CS清咽膏的药学研究(可编辑) CS清咽膏的药学研究 南京中医药大学 硕士学位论文 CS清咽膏的药学研究 姓名:唐? 申请学位级别:硕士 专业:生药学 指导教师:秦明珠 20080601清咽膏的药学研究 摘 要 清咽膏由膏及传统中药桔梗、苦杏仁、川贝母等组成,具有清肺化痰、 止咳平喘之功效,主要用于肺热痰多、咳嗽气喘,哮喘、慢性支气管炎等症.本 课题通过对清咽膏的药学研究,为哮喘患者提供一种安全、有效、便捷的新 型中药膏滋。 本研究首先对处方中的各味中药进行了全面鉴定,以年版《中国药典》 为标准,保证了各味中药的质量,为制剂研究提供了有力保障。 药材的提取研究分为两部分:川贝母采用乙醇渗漉提取,以总生物碱含量为 检测指标,通过均匀设计试验确定了最佳提取工艺条件,结果是倍量%乙 醇,浸渍小时后渗漉提取,渗漉速度/;桔梗、苦杏仁等味药采用水 煎提取,以总皂苷含量和苦杏仁苷含量为检测指标,通过均匀设计试验确定了最 佳提取工艺条件,结果是加倍量水,煎煮次,每次分钟。 制剂工艺研究主要考察辅料的选择和用量,收膏工艺以及膏滋的成型,结果 是采用相当于稠膏量/的炼蜜,加入.%薄荷脑和.%山梨酸钾,混匀收 膏,按此条件制备的膏滋色泽均匀、流动性较好,口感也较好。 制剂的质量标准建立了桔梗、枇杷叶和川贝母的薄层色谱鉴别方法;采用高 效液相色谱法建立了苦杏仁苷的含量测定方法;采用紫外一可见分光光度法建立 了总皂苷、总生物碱和总氨基酸的含量测定方法。结果薄层色谱鉴别方法简便可 行;苦杏仁苷在.?.咖浓度范围呈现良好的线性关系., 平均回收率为.%,为.%,含量限度为每瓶膏滋含苦杏仁苷不少于 .;总皂苷测定以人参皂苷沁为对照品,平均回收率为.%,为 .%,含量限度为每瓶膏滋合总皂苷不少于;总生物碱测定以贝母素乙 为对照品,平均回收率为.%,为.%,含量限度为每瓶膏滋含总生 物碱不少于.;.氨基酸测定以甘氨酸为对照品,平均回收率为.%, 为.%,含量限度为每瓶膏滋含总氨基酸不少于.。该质量控制方法 简单、专属性强、重现性好,可有效控制产品质量. 三批样品的初步稳定性实验 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,该制剂在自然储存条件下连续放置个 月,各项考察项目均符合规定,结果表明本品基本稳定. 本研究以中医药理论为指导,采用现代技术为实验手段,为清咽膏这一 新型中药制剂提供了质量评价方法,为企业的工业化生产提供了科学依据。 关键词:清咽膏;药材鉴定;制备工艺;质量标准;初步稳定性 .., ,., ., , , “’. .私 , . .., /. %, . .也 , ., / .% . ..% .. , ; ; , . :;.. / ., .%,.%; ., %,.%; .%, ,.%; , .%,.%., .,,. .... , , . 廿 . .,,. : ;;’; ..原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者需亲笔签名:序峻?厂年/月厂日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借 阅。本人授权南京中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密叫在旦年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。 请在以上方框内打“? 靴敝储濡糕燧锄脓一扩年钼厂日 砌年多月岁 导师需亲笔签名:奈明趺综述部分 一、综述部分 清咽膏处方组成和分析 .处方组成 清咽膏为现代中药复方制剂,源自民间验方,具有清肺化痰、止咳平喘 之功效。用于肺热痰多、咳嗽气喘等。 处方:膏 桔梗 苦杏仁焯 川贝母 罗汉果 枇杷叶 薄荷脑 .处方分析 方中膏是由肉经生物技术酶解的产物。肉“主少气吸吸,足不立 地’’《名医别录》,止咳平喘,为君药。桔梗“系开肺气之药,可为诸药舟楫, 载之上浮《本草求真》,祛痰利气,宣降有权,助君药止咳平喘之效;苦杏仁 主入肺经,味苦能降,且兼疏利开通之性,降肺气之中兼有宣肺之功,与桔梗合 为臣药,共奏宣肺达邪,利气止咳之功。肺为娇脏,喜清肃而不耐寒热,肺燥阴 虚水精不布,液郁成痰,故佐以川贝、罗汉果、枇杷叶。川贝母“开郁,下气, 化痰之药也,润肺消痰,止咳定喘《本草汇言》;罗汉果性?、味甘,清肺热、 止咳;枇杷叶味苦能降,性寒能清,降肺气而止咳,三者合为佐药。薄荷脑清? 利咽,引药上行,是为使药。诸药配伍,共奏清肺化痰、止咳平喘之功效。综观 全方,配伍严谨,主治咳嗽气喘,肺燥阴伤,咽喉不利,令肺气得顺而咳自止, 肺燥得润而痰自化。 现代药理研究证明:肉能提高血液携氧量,使咳嗽、哮喘患者肺氧交换 量增加,呼吸轻松顺畅;川贝母中所含生物碱具有显著的镇咳作用,总皂苷有祛 痰作用【】;苦杏仁所含苦杏仁苷分解后产生少量氢氰酸,能抑制咳嗽中枢而起镇 咳平喘作用;桔梗能反射性增加气管分泌,稀释痰液而有较强的祛痰作用;罗汉 果水提取物对咳嗽有明显抑制作用,可增加气管分泌,有显著祛痰作用;枇杷 叶所含的枇杷苷、乌苏酸和总三萜酸是抗炎、止咳作用的主要成分【。上述诸药 合用,具有良好的镇咳、祛痰、平喘作用。 处方中每味药物的现代研究 . 的现代药用研究略 .桔梗的现代研究 桔梗为桔梗科桔梗属植物桔梗 ...的干燥根。 ..桔梗的化学成分研究 桔梗的化学成分研究始于世纪初,研究部位涉及原植物的芦头、根、茎、 叶、果实及种子【】。桔梗主要含皂苷类、醇苷、黄酮类、甾醇类、多聚糖、挥发清咽膏的药学研究 油、脂肪油及脂肪酸类等。桔梗的皂苷类成分均属于齐墩果烷型五环三萜衍生物, 何美莲等【】依据其苷元母核的结构将其分为类,即桔梗酸 类、 类。桔梗根中含菠菜甾醇、 桔梗二酸 类、远志酸 .菠菜甾醇及其葡萄糖苷、?豆甾烯醇、白桦脂醇以及。谷甾醇等【】。桔梗根 中还含有大量由果糖组成的桔梗聚糖,含糖量达.%;另含有大 量的菊糖。桔梗根中含脂肪油.%,不饱和化合物及脂肪酸中亚油酸、 软脂酸的含量较高,还有亚麻酸、硬脂酸、油酸、棕榈酸等。另外,桔梗根中含 有丰富的维生素和种以上氨基酸,总氨基酸含量高达%,其中包括丫.氨基 丁酸,它是一种神经传导物质,在入脑能量代谢中起重要作用。 ..桔梗的药理作用研究 桔梗的药理作用研究较多的主要是祛痰、增强免疫、保肝、抗炎、调节血脂 等。 支气管所分泌的粘蛋白是衡量药物祛痰效果的指标之一。桔梗皂 苷和桔梗 皂苷在体内、外均能增加大鼠和仓鼠呼吸道粘蛋白的释放【】。 桔梗水提物可显著刺激小鼠腹腔巨噬细胞增生,抑制细胞增殖,剂量依赖性 地促进一氧化氮、肿瘤坏死因子.的产生,同时对白介素.和 .也有升高作用。桔梗多糖有增强免疫作用,能显著提高多克隆抗体的 产生和细胞的增殖,用胸腺依赖性抗原绵羊红细胞免疫后,小鼠腹腔 给予桔梗多糖能提高细胞中抗体的产生【们。桔梗对多种药物性肝损伤模 型都有治疗作用。桔梗水提物能抑制四氯化碳诱导的肝毒性,其机制可能与阻断 肝药酶对四氯化碳的生物激活以及清除氧自由基有关?】;而其减轻四氯化碳诱导 的肝纤维化进程主要作用机制为抑制肝部炎症和激活肝星状细胞【】;同时,其皂 苷提取物对过氧化叔丁醇造成的肝毒性有保护作用,这与其清除氧自由基和保护 细胞免受氧化应激反应有判】。 桔梗对各种炎症模型均有较强的抗炎作用,其机理主要与抑制前列腺素 通路、分泌有关。浓度为/和/时,能抑制大 鼠促癌物..十四烷酰佛波醇一.乙酯诱导的腹腔巨噬细胞中产生 桔梗可用于防治高胆固醇血症和高脂血症。高脂血症大鼠食用含%和% 桔梗粉的饲料周,能显著降低血清和肝脏脂肪浓度,尤其是%的配比,与模 型组比较,可显著降低血清和肝脏中总胆固醇和甘油三酯的浓度,每天给予桔梗 可降低低密度脂蛋兰和升高高密度脂蛋刍的浓度。另外,桔梗组的 动脉硬化指标也较模型组低【引。 .苦杏仁的现代研究 综述部分 .. .、 苦杏仁为蔷薇科植物山杏 西伯利亚杏 .、东北芩 .或杏 ?姗淞 .的干燥成熟种子。 ..苦杏仁的化学成分研究 苦杏仁含苦杏仁苷及脂肪油、蛋白质、各种游离氨基酸。苦杏仁苷是其主要 有效成分,早在年施拉德在研究苦杏仁成分时就发现了此类物 质, 年罗比凯等分离出苦杏仁昔,迄今已成为常用的祛痰止咳剂和辅 】。 助性抗癌药物【 苦杏仁苷在苦杏仁酶及樱叶酶等葡萄糖苷酶水解下生 成野樱皮苷和杏仁氰,后者不稳定,遇热易分解生成苯 甲醛和氢氰酸 。氢氰酸能抑制咳嗽中枢而起镇咳平喘作用;过量可导致 严重中毒。 苦杏仁含较多的脂肪油,出油率较高,脂肪含量.%,但较山桃仁和胡桃 仁低。苦杏仁中粗蛋白含量为%。苦杏仁油脂脂肪酸由棕榈油、棕榈油酸、 硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等组成。膳食中多摄入不饱和脂肪酸能降低血液 中的总胆固醇水平【们。苦杏仁中不饱和脂肪酸的含量占所含脂肪酸总量的 .%,因此对人类健康而言,苦杏仁油是一种理想的食用油。 苦杏仁中氨基酸种类齐全,其中谷氨酸和精氨酸含量较高。有关人体和动物 实验证实,谷氨酸具有健脑作用,能促进脑细胞呼吸,有利于脑组织中氨的排除 ;精氨酸具有促进胰岛素生成及分泌的作用,可以促进生长发育、创伤愈合及 氮储存,还能刺激胸腺,增加细胞免疫功能【】。 ..苦杏仁的药理作用及毒性研究 苦杏仁的药理作用研究较多的有止咳平喘、润肠通便、抗炎镇痛、抗肿瘤等。 苦杏仁含有苦杏仁苷及苦杏仁酶,苦杏仁苷含量约./。药理实验证明, 苦杏仁苷具有镇咳作用,其作用机理为苦杏仁苷能被苦杏仁酶水解,所产生的氰 氢酸和苯甲醛对呼吸中枢有抑制作用,能使呼吸加深,咳嗽减轻,痰易咳出【。 苦杏仁苷对于油酸型呼吸窘迫症动物可促进肺表面活性物质的合成,并使病变得 到改善。 苦杏仁质润多脂,含有%%的脂肪油。研究表明,脂肪油能提高肠内 容物对粘膜的润滑作用,而易于排便引。 实验小鼠热板法和醋酸扭体法证明,苦杏仁苷有镇痛作用且无耐受性; 身体依赖性实验表明,苦杏仁苷是不同于吗啡的镇痛剂。苦杏仁脱脂水提取物能 明显抑制醋酸所致小鼠扭体反应和大鼠棉球肉芽肿的形成;苦杏 仁苷口服有抗炎 作用,静注则无活性引。 清咽膏的药学研究 研究资料表明,苦杏仁所含的苦杏仁苷及其水解生成的氢氰酸和苯甲醛对癌 细胞呈现协同性杀伤作用;另外,苦杏仁苷能帮助体内胰蛋白酶消化癌细胞的透 明样粘蛋白被膜,使体内白细胞更易靠近癌细胞,并吞噬癌细胞【。苦杏仁热水 提取物粗制剂对人子宫颈癌.株的抑制率为%%,给小鼠自由摄食苦 杏仁,可抑制艾氏腹水癌的生长,并使生存期延长【。苦杏仁苷用于晚期癌症患 者可缓解疼痛并能抑制癌性胸水。 杨俊何等以苦杏仁苷 /只,/只给小鼠肌注,发现可明显促进有 丝分裂原对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖;将大鼠鼠脑右额颞叶快速冰冻切片进行 细胞色素氧化酶孵育染色,染色系统通过显微电视图像测量系统观察,数据经微 机处理,结果表明苦杏仁苷有明显提高脑缺血状态下细胞色素氧化酶活性的作 用。苦杏仁苷在最佳浓度范围和作用时间内能提高人肾成纤维细胞分泌的 型胶原酶活性的作用,抑制人肾增值和型胶原的表达,促使人肾 凋亡【】。苦杏仁苷与冬虫夏草联合作用于体外原代培养所得大鼠纤维肝肝细胞, 用方法监测表明苦杏仁苷与冬虫夏草具有明显提高大鼠纤维肝肝细胞合 成分泌白蛋白的作用】。以.植酸钠注入小鼠或肝组织切片.法观 察苦杏仁苷对小鼠肝细胞吞噬功能或活化作用的影响,结果表明苦杏仁苷 对其吞噬功能及的活化均有非常明显的促进作用。 苦杏仁苷的毒性与给药途径密切相关,小鼠静脉注射为/,而灌 胃的为/。大鼠静脉注射的为/,腹腔注射为/,灌 胃给药为./。小鼠、兔、犬静脉注射或肌肉注射的均为/,而灌 胃均为./【】。小鼠静脉注射苦杏仁苷/,动物%存活,而以 相同剂量灌胃,内中毒死亡率达%。口服给药的毒性之所以大于静脉给 药,经研究证明主要是由于苦杏仁苷被肠道微生物水解产生较多的氢氰酸所致。 如果处理小鼠使其肠道内微生物被抑制,则胃肠给药/亦未出现死亡现 象;如未经处理,则相同剂量死亡率为%。人口服苦杏仁苷每日, 持续半个月或静脉注射一个月可见毒性反应,以消化系统较为多见,此外还表现 为心电图波改变、房性早搏,停药后以上毒性反应均可消失。如果剂量减为每 日口服以下,则可避免毒性。 .川贝母的现代研究 . 川贝母为百合科母属植物川贝母. 、暗紫贝母 ..、甘肃贝母 或梭砂贝母 .的干燥鳞茎。 ..川贝母的化学成分研究 我国从年即开始研究川贝母,其主要成分为异甾体类生物碱和生物碱 综述部分 】。川贝生物碱成分有川贝碱、西贝素。朱子清等【】从青贝 中分得青贝碱,从白炉贝中分得白炉贝素,从黄炉贝中分得炉贝碱 ,从白松贝中分得松贝碱,从甘肃贝母中分得岷贝碱 、代拉文 。金子光等从梭砂贝母中分得新贝甲素 、西贝素、贝母辛、琼贝酮、代拉文酮 、代拉夫林。余世春等从暗紫贝母中分得松贝辛 . 。王化远等副从瓦布母 .. 中分得西贝素、贝母辛、鄂贝乙素、异浙贝甲素 、西贝素.氮氧化物..,王锋鹏等【】从华西贝 母 ..中分得华贝辛和华贝亭 。严忠红等 对百合科植物卷叶贝母乃打:缈妇 .的 干燥鳞茎进行了化学成分研究,结果鉴定出 ...醇、胸苷 和腺苷个化合物,其中化合物为首次从贝母属植物中分得,腺苷具有抑 制由诱导的血小板聚集活性。曾令杰等【】从伊贝母中分离得到一种新的生 物碱,其结构被鉴定为.’,’.二羟基.’’,’,’.四氢化萘基.丙基埘.二苯基甲 基..,一二甲基丁胺,为首次从植物中分离得到,它与已知的贝母生物碱在骨架 结构上截然不同。 另外,川贝母含有钙、镁、钾、铁、钻、镍、锰、钡、钛、铝、锌、锶等微 量元素【】。 ..川贝母的药理作用研究 目前对川贝母的研究主要涉及的药理作用包括镇咳、祛痰、平喘、抗茵、镇 静、镇痛、心血管活性、抗溃疡、抗血小板聚集、抗肿瘤等。 李萍等邮对种商品川贝母的乙醇提取物部分、总生物碱部分和总皂苷部 分镇咳和祛痰药理作用筛选的结果表明,贝母总碱部分具有显著的镇咳作用,总 皂苷部分具有明显的祛痰作用。莫正纪等【】对种植物来源的川贝母醇提物药理 作用研究的结果表明,注射后能明显增加小鼠耐缺氧能力,并具有扩张小鼠离体 肺、支气管作用。栽培瓦布贝母可明显升高小鼠肺脏水平,并有明显的平 喘作用。周颖等【】研究了贝母的有效成分贝母甲素、贝母乙素、西贝素、西贝素 苷和蒲贝酮碱种甾体生物碱的平喘机制对气管受体的拮抗作用,结果表 明此种贝母生物碱均可使卡巴胆碱引起气管条收缩的量效曲线右移。一定浓度 的川贝母醇提物可抑制大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的生长繁殖【】。川贝母碱水浸 剂:在试管内对星形奴卡氏菌有抑制作用?】。西贝素对麻醉狗有降压作用, 主要是由于外周血管扩张,对心电图无明显影响;对离体豚鼠回肠、兔十二指肠、 大鼠子宫及整体狗小肠有明显松弛作用,且随浓度增加而增加,并能对抗乙酰胆 清咽膏的药学研究 碱、组胺和氯化钡的平滑肌痉挛作用,其解痉作用类似于罂粟碱【】。静脉注射川 贝母碱产生持久性血压下降,伴以短时间的呼吸抑制,增强豚鼠离体子宫的收缩, 抑制离体兔肠,并可扩大瞳孑。贝母碱及贝母辛极少量时可使血压上升,大量 时可使血压下降不。 .罗汉果的现代研究 罗汉果为葫芦科苦瓜属植物罗汉果 .的干燥果实。 ..罗汉果的化学成分研究 罗汉果的主要有效成分为葫芦烷三萜类化合物,在罗汉果干果中 的总含量为./..%,它们含有共同的苷元四环三萜。罗汉果 为主要甜味 中的这类物质除少数外均为甜味物质,其中罗汉果甜苷 成分,是一种高甜度的四环三萜类皂苷,具有甜度高、热量低、色泽浅、水溶性 好的特点。罗汉果甜苷含量大于%时,与%蔗糖溶液相比,.%溶液甜度 大于倍,而达到相同甜度时,热量仅为蔗糖的五十分之一【】。迄今为止已经 从罗汉果果实中分离并鉴定了赛门苷 、罗汉果昔 、罗汉果苷 、罗汉果苷 、罗汉果苷 、氧化罗汉果苷 、罗汉果苷 、罗汉果二醇苯甲酸、罗汉果新苷、 光果木鳖皂苷, ,、罗汉果苷 、罗汉果苷 共种葫芦烷三萜苷类化合物】【】。 陈全斌等【】利用反相高效液相色谱法,通过分析样品保留时间定性证实了罗 汉果中含有黄酮苷元山柰酚,并首次发现含有黄酮苷元槲皮素。陈全斌等【】首次 从罗汉果中分离得到两个多糖,并建立了法测定其相对分子质量的便捷方 法。研究发现罗汉果种仁油中含有丰富的不饱和脂肪酸。罗汉果种仁油符合国家 食用油的指标,游离脂肪酸少、不饱和脂肪多,磷脂少,其成分以 角鲨烯三十 碳六烯为主,占种子仁油总量的.%,其次是,】.,.十八碳二烯酸,含 量为.%,再次是.羟基.,,,,,.二十四碳六烯,,含量为.%】。 罗汉果种子仁含有大量的角鲨烯,具有较高的开发价值。罗汉果中还含有维生素 、维生素、甘露耐、法尼醇及多种净化齐物质能有效清除人 体中的活性氧,以及常量元素钙、钾、镁,微量元素硅、硒等。 ..罗汉果的药理作用研究 罗汉果的药理作用主要有镇咳祛痰、提高免疫、保肝、降血糖、抗肿瘤等。 罗汉果水提取物对浓氨水或二氧化硫诱发小白鼠咳嗽均有明显抑制作用,可 增加小鼠气管酚红排泌量和大鼠气管排痰量,有显著祛痰作用【】。罗汉果水提取 综述部分 物对正常大鼠免疫功能有一定的影响,能提高外周血酸性.醋酸萘酯酶阳性淋巴 细胞的百分率和花环形成率。罗汉果甜苷对正常小鼠免疫功能无明显作用,但 能显著提高环磷酰胺免疫抑制小鼠的巨噬细胞吞噬功能和细胞的增殖作 用【引。罗汉果粉及其提取物对正常小鼠体重、血糖及糖耐量无影响,但对四氧嘧 啶糖尿病小鼠的高血糖有防治作用,且有剂量效应关系。罗汉果皂苷对四氧嘧 啶糖尿病鼠具有明显的降血糖作用,对糖尿病小鼠体内血清三酰甘油、血清胆固 醇的异常升高有防治作用;可提高血清高密度脂蛋白胆固醇的含量,使机体血脂 水平趋向正常,防止糖尿病导致的脂类代谢紊乱,对糖尿病并发症有防治作用; 可降低糖尿病小鼠肝脏脂质过氧化物的生成,提高其抗氧化酶系统的活力,有助 于糖尿病小鼠肝脏抗氧化能力的恢复【。罗汉果水提取物对四氯化碳或硫 代乙酰胺所致小鼠肝损伤有明显的保肝降酶作用【】。体外实验研究发现罗 汉果苷的延缓致癌作用与甜叶菊苷相同或较之更强,显示其有抗癌作用【。 .枇杷叶的现代研究 枇杷叶为蔷薇科枇杷属植物枇杷 ..的干燥叶。 ..枇杷叶的化学成分研究 枇杷叶中含皂苷类、糖类、熊果酸、齐墩果酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、 鞣质、维生素、维生素、苦杏仁苷及微量砷等【】畔】。陈剑等【从枇杷叶中 分离得到.谷甾醇.、胡萝卜苷、齐墩果酸 、 乌苏酸 、 ,一二羟基乌苏..烯..酸 ,一 , 、,一二羟基乌苏..烯 一酸,一.一 、,一二羟基乌苏..烯..酸 一? ,一 、山柰酚、金丝桃苷 、羟基’甲氧基.一一?一吡喃葡萄糖基.叶.仅..吡喃鼠李黄酮 苷一’? ??一暂命名为枇杷甲素 】。 新鲜枇杷叶中还含挥发油./..%。挥发油中主要含反式橙花菽醇 ..%.%,反.反式金合欢醇..%~.%, 尚含少量的?蒎烯、莰烯、对伞花烃、.香叶烯、反式氧化芳樟醇、樟脑、. 衣兰烯、.金合欢烯等【】。 ..枇杷叶的药理作用研究 药理研究表明,枇杷叶具有良好的止咳和抗炎作用;此外还有抗肿瘤的报道。 王立为掣的】研究发现,枇杷叶提取物能明显延长二氧化硫气体所引起小鼠 咳嗽的潜伏期,亦能明显延长枸橼酸喷雾所引起豚鼠咳嗽的潜伏期,减少咳嗽次 清咽膏的药学研究 数;枇杷叶提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显抑制作用。经进一步实验表明, 枇杷苷、熊果酸和总三萜酸是枇杷叶中主要的止咳和抗炎作用成分。钱萍萍等 眇研究了枇杷叶对小鼠的止咳、祛痰作用,对只小鼠分别给予灌胃与腹腔注 射枇杷叶水及生理盐水,观察和记录浓氨水致咳小鼠的咳嗽潜伏期和 内的 咳嗽次数,用分光光度计测定酚红排泌量,结果发现枇杷叶能推迟小鼠对浓氨水 刺激的咳嗽潜伏期及减少咳嗽次数,增加小鼠支气管酚红的排泌量。 曹摘孜【.锄究观察了枇杷叶中熊果酸成分的抗肿瘤活性,发现其对各种常见 的恶性肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用。黄镜等【】也通过实验证实熊果酸具有 显著的抗肿瘤作用。 葛金芳等】研究了枇杷叶三萜酸对免疫功能的影响,结果表明,枇杷叶三萜 酸混悬液唔,,/可提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠 血清中及脾细胞溶血素水平,提示可提高致免疫功能低下小鼠的体液免 疫功能。进一步研究发现,造成的免疫低下模型组小鼠脾细胞悬液淋巴细 胞亚群中、细胞数及/细胞比值较正常组均明显下降,应用 /后可增加两亚群细胞的数量,并使/细胞比值上升, 提示可能通过直接调节、细胞的成熟与分化而维持、 两亚群间的平衡,使机体低下的免疫功能得以恢复正常,但其对淋巴 细胞调控的信号途径尚需进一步研究。 煎膏剂的研究开发现状 .煎膏剂概述 煎膏剂系指药材用水煎煮,去渣浓缩后,加炼蜜或炼糖制成的半流体制剂, 俗称膏滋。由于煎膏剂经浓缩并含较多的糖或蜜等辅料,故具有药物浓度高、体 积小、稳定性好、便于服用等优点,但受热易变质及以挥发型成分为主的中药不 宜制成煎膏剂。煎膏剂的效用以滋补为主,兼有缓和的治疗作用, 药性滋润,故 又称膏滋,也有将加糖的称糖膏,加蜂蜜的称蜜膏。煎膏剂多用于慢性疾病的治 疗。 煎膏剂是中药古老剂型之一,近年来,该剂型从药物和辅料的组成、生产工 艺、质量控制等方面都有了新的发展,已成为一种以强身健体、预防衰老、治疗 慢性病见长的、深受欢迎的剂型。 .煎膏剂的质量控制及探讨 ..关于“返砂’’问题的研究 煎膏剂在贮藏一定时期后,常出现糖结晶颗粒,称为返翻砂现象。一般 认为这与糖的转化情况有关,但亦有实验观察认为与转化率的高低并无明显关系 【。尽管葡萄糖和果糖的结晶性要比蔗糖差,但难免不出现结晶现象;而且在酸 综述部分 性环境和高温下转化时,果糖稳定性差,损失较葡萄糖大。因此,需进一步研究 改进现有炼糖工艺,以控制转化糖中葡萄糖和蔗糖的含量,并尽可能提高果糖的 含量引。值的调节亦重要。蔗糖一般在?.时水解完全,.时则 转化不好,因此,在转化时加入酒石酸或枸橼酸,以调节..之间,并 适当控制温度和时间。一般药厂对转化率的控制多采用斐林氏法【。 ..收膏标准 收膏标准的掌握关系到膏剂的防腐力和收得率,一般生产上仍多以经验来判 断,但技术性强,不易掌握。采用比重法收膏效果较好。目前药典尚无煎膏剂比 重的统一规定,但有人建议以.?.?为剑。比重的测定,除药典所 规定的方法外,可参照稀释倍数法进行,此法快速,可指导生产,即用水稀释正 在浓缩的煎膏,用波美计粗测比重,收膏;按公式一×计算为 稠膏稀释倍数,为稠膏稀释至倍的相对密度,可知成品煎膏的相对密度。 另有研究发现,中药水煎膏剂的相对密度与干固体百分含量之间具有一定的 相关性,在相对密度.~.范围内适用。』相对密度与干固体百分含量这两 个参数在生产中具有重要意义,可用于计算药辅配比,控制成品收率。 清咽膏的药学研究 二、药材鉴定 处方中药材的真伪、优劣,直接影响该处方的疗效。因此.在进行制剂工艺 研究之前,必须根据药典标准,对清咽膏处方中的各味中药进彳于全面鉴定, 包括性状描述,粉末鉴别和薄层鉴别,水分、灰分、浸出物测定及某些指标的含 量测定等内容。 桔梗的鉴定 实验材料 本品为桔梗科植物桔梗 耐.. 的干燥根。 桔梗饮片购自南京药业股份有限公司中药饮片厂,批号。产地:安徽。 性状 本品为斜椭圆形或不规则薄片,外皮多已除去或偶有残留。切面皮部淡黄白 色,较窄;形成层环状明显.淡褐色;木部宽.有较多裂隙。质脆,易折断。 结论:本实验所用桔梗饮片的性状符合《中国药典》年版一部桔梗“炮 制”项下规定。如图。 图桔梗饮片 四 “ ‘鉴别桔梗药材根的横切面观察 取桔梗药材,以稀甘油软化后,横切成厚度 左右,制成石蜡切片。置 显微镜下观察。 本品横切面:木栓细胞残存。栓内层窄,常见裂隙。韧皮部乳管群散在,壁 略厚,内含微细粒状黄棕色物。形成层成环。木质部导管单个散在或数个相聚, 呈放射状排列。如图。药材鉴定 暖辖梗翦疆结量结论:本实验所用桔梗药材切片,在显微镜下可见扇形或类圆形菊糖,符合 药典桔梗“鉴别”项下有关规定。薄层色谱鉴别 取桔梗药材粉末,加%醢酸乙醇.水:混台液,加热回流小时, 放冷,用三氯甲烷振摇提取次,每次,台并三氯甲烷液,如水洗涤, 弃去挠液,三氯甲烷镀用无水硫酸钠脱水,滤过,滤液燕干,残渣加甲醇 使溶解,作为供试品溶液。另取桔梗对照品药材,同法制成对照品溶液。照 ‘中国药典版一部附录薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各山 清嘲膏的药学研究 分别点于同一硅胶薄层扳上,以三氯甲烷?乙醚:为展开剂,展开,取出 晾干,喷以/,减酸乙醇溶液,在?加热至斑点显色清晰。供试品色谱中 在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的褐色斑点。结果如圈?。 圈桔梗药材簿层色谱鉴别 对照药材 ..桔梗药材 舯 汜 结论:本实验所用桔梗药材的薄层色谱符合‘中国药典》年版一部桔梗 “鉴别”项下有关规定。 .总皂苷含量测定 取桔梗粗粉约,精密称定,置索氏提取嚣中,加甲酵,浸泡小时 后,再加甲酵,加热回流小时,放置过夜.滤过,滤液浓缩至~, 放冷,加乙醚,振摇,放置至澄明。弃去上清液,沉淀分次加甲醇, ,谢加热使溶解,放冷,滤过,合并甲醇液,浓缩至~,放冷, 加乙醚,振摇,同上法处理,合并甲醇液,置已恒重的蒸发皿中,于水浴 上蒸发至干,在?干燥至恒重,按下式计算: 蒸发皿和桔梗总皂瞢合重一蒸发皿重量 桔梗总皂苷含量??×%, 桔梗粗粉重量 平行做份试验。结果如下。 裹桔梗总皂苷舍量测定 ? 结论:按药典规定,桔梗总皂苷含量不得少于册“本实验所用桔梗 药材 的总皂苷含量为.%.符合中国药典》年版一部桔梗“含量测定” 项下 规定。药材鉴定 苦杏仁的鉴定 实验材料 .: 本品来源于蔷薇科植物山杏 的干燥成熟种子。 苦杏仁饮片掉购自南京药业殷份有限公司中药饮片厂,批号。产 地:山东。 性状 ~ 。表面乳 本品坤呈扁心形,长~.,宽.~.,厚 白色,一端尖,另端钝圆,肥厚,左右不对称,有的分离为单瓣,无种皮。具特 殊香气,味苦。如图。 图苦杏仁钦片埠 栅明抽町帅 旧 鉴别 .理化鉴别 ?取苦杏仁数粒,加水共研。结果产生苯甲醛的特殊香气。 取苦杏仁数粒,捣碎,每次分别取约 ,置于三支试管中,加水数滴使 湿润,试管中悬挂一条三硝基苯酚试纸,用软木塞塞紧。置温水浴中,分钟 后观察。结果三硝基苯酚试纸显砖红色。 结论:本实验所用苦杏仁药材的理化鉴别结果符合《中国药典》年敝一 部苦杏仁“理化鉴别”项下有关规定。 .薄层色谱鉴别 取苦杏仁粗粉,加乙醚.加热回流小时,弃去乙醚液.药渣用乙 醚洗涤后挥干,加甲酵,加热回流分钟,放冷,滤过,滤液作为 供试品溶液。另取苦杏仁苷对照品,加甲醇制成每舍的溶液,作为对 照品溶液。照‘中国药典》版一部附录薄层色谱法试验,吸取上 述两 种溶液各山.分别点于同~硅胶薄层板上.以三氯甲烷.乙酸乙酯一甲酵一水 :::放置小时的下层溶液为展开剂,展开,取出,立即清咽膏的药学研究 喷以磷钼酸硫酸溶液,在?加热至斑点显色清晰。供试晶色谱中,在与对照 药材色谱相应的位置上。显相同的蓝紫色斑点。结果如图。, 囤蕾杏仁药材薄羼色谮鉴别 苦杏仁苷对照品. 苦杏仁药材 哪帅虻 结论:本实验所用苦杏仁药材的薄层色谱符合《中国药典》年版一部苦 杏仁“鉴别”项有关规定。 .酸败度检查 分次取苦杏仁药材,研碎,过粗筛,置索氏提取器中,加正己烷, 置水浴上加热回流小时,放冷,用号垂熔玻璃蒲斗滤过,滤液置术浴上减压 回收溶剂至干,得到油脂。分次取油脂~,精密称定,置的干燥碘 瓶中,加三氯甲烷冰醋酸:混合液,使其完全溶解。精密加入新制碘 化钾的饱和溶液,密塞,轻轻振摇半分钟,在暗处放置分钟,加水, 用硫代硫酸钠滴定液 漓定至溶液呈浅黄色时,加淀粉指示液继 续 滴定至蓝色消失;同时傲空白试验,以油脂消耗硫代硫酸钠漓定液的体积为, 空白试验消耗的体积为,油腊的重量为,按油脂的过氧化值× ./计算。结果如下。 襄吨苦杏仁醅艘度检童 ? 编号?】 . . . 结论:按药典规定,苦杏仁油脂的过氧化值应不得过 。本实验所用苦杏 仁药材曲过氧化值小于 ,符合药典苦杏仁“检查”项下规定。 .苦杏仁苷含量测定 称取苦杏仁粗粉约,精密称定,置凯氏烧瓶中,分别加入精密称定的苦药材鉴定 杏仁粗粉,加水,立即密塞,置?水浴中保温小时,连接冷凝管, 通水蒸气蒸馏,馏出液导入水与氨试液的吸收液中,接收瓶置冰浴中 冷却,至馏出液达时停止蒸馏,馏出液中加碘化钾试液,用硝酸银滴 定液./缓缓滴定,至溶液显出的黄白色浑浊不消失。另取苦杏仁粗粉 ,精密称定,加水,按上述测定方法进行操作、滴定,以作校正。每 硝酸银滴定液./相当于.的苦杏仁苷。平行做 份试验。结果如下。 表.苦杏仁苷含量测定 . 结论:按药典规定,本品含苦杏仁昔不得少于.%。本实验所 用苦杏仁药材的苦杏仁苷含量为.%,符合药典苦杏仁“含量测定’’项下规定。 川贝母的鉴定 .实验材料 .的干燥鳞茎。 本品为百合科植物川贝母 川贝母饮片购自南京药业股份有限公司中药饮片厂,批号。产地:四 川。 .性状 松贝:呈圆锥形或近圆形,高..,直径..。表面类白色。 外层鳞叶瓣,大小悬殊,大瓣紧抱小瓣,未抱部分呈新月形虬怀中抱月; 顶部闭合,内有类圆柱形、顶端稍尖的心芽和小鳞叶枚;先端钝圆或稍尖, 底部平,微凹入,中心有灰褐色的鳞茎盘,偶有残存须根。质硬而 脆,断面白 色,富粉性。气微,味微苦。 结论:本实验所用川贝母饮片的性状符合《中国药典》年版一部 川贝母 “性状’’项下有关规定。如图.,.。清昭膏豹药学研究 圈淀粉耘 图淀帮粒药材鉴定 一?。邕:弹害西黔『: 薹%.’??“。,寨薹攀。一:蠹 滔匹一蔫麓霞?瀑 遴鬏塞黼釜 鹾蠢 霾清咽膏的药学研究 .~?啊川贝母粉末显微照片说明: 各图放大倍数均为× 图各种形态的淀粉粒 图示淀粉粒的短缝状脐点 图示淀粉粒的马蹄形脐点 图示淀粉粒的人字形脐点 图示淀粉粒的星状脐点 图 个脐点的单粒淀粉 图 个脐点的复粒淀粉 图 个脐点的复粒淀粉 图螺纹导管 图梯纹导管药典未记载 图气孔不定式,表皮细胞垂周壁微波状弯曲 结论:本实验所用川贝母药材的显微鉴别结果符合《中国药典》 年版 一部川贝母“鉴别一项下有关规定。 .水分测定 水分测定 取川贝母粗颗粒~,按《中国药典》年版一部附录 法第一法烘干法进行测定,平行做份试验。结果如下。 表川贝母水分测定结果 . . 结论:按药典规定,川贝母水分含量不得超过%。本实验所用川贝 母药材 水分含量为.%,符合药典川贝母“检查项下有关规定。 .总灰分和酸不溶性灰分测定 灰分测定法进行 取川贝母~,按《中国药典》年版一部附录 测定,平行做份试验。结果如下。 表川贝母灰分测定结果 .结论:按药典规定,川贝母的总灰分不得超过.%,酸不溶性灰分 不得超 药材鉴定 过.%。本实验所用川贝母的总灰分和酸不溶性灰分测定结果分别为.%和 .%,均符合药典川贝母“检查”项下有关规定。 .浸出物测定 取川贝母颗粒~,精密称定,按《中国药典》年版一部附录浸 出物测定法中“醇溶性浸出物测定法’’进行测定,平行做份试验。结果如下。 表川贝母浸出物测定结果 .结论:按药典规定,川贝母浸出物不得少于.%。本实验所用川贝母浸出 物含量为.%,符合药典川贝母“浸出物项下规定。 罗汉果的鉴定 .实验材料 本品为葫芦科植物罗汉果 .的干 燥果实。 罗汉果饮片购自南京药业股份有限公司中药饮片厂,批号。产地: 广西。 .性状 本品呈球形,直径.。表面褐色、黄褐色至绿褐色,有深色斑块及黄 色柔毛,有的具条纵纹。顶端有花柱残痕,基部有果梗痕。体轻, 质脆, 果皮薄,易破。果瓤中、内果皮海绵状,浅棕色。种子扁圆形,多 数,长约 .,宽约.;浅红色至棕红色,两面中间微凹陷,四周有放射性沟纹, 边缘有槽。气微,味甜。 结论:本实验所用罗汉果饮片的性状符合《中国药典》年版一部 罗汉果 “鉴别’’项下有关规定。如图。 清咽量的药学研究 鬯 圈? 围纤维 固孔皱导量 一一药材鉴定 图?梯纹导管 图?螺纹导管 囤薄壁细胞 圈薄壁细胞 ‘~罗汉果粉末显微照片说明: 各图放大倍数均为 图果皮石细胞 图种皮石细胞 图纤维示顶端部分 圈孔纹导管药典未记载 图梯纹导管 圈螺纹导管 图薄壁细胞示纹孔 图薄壁细胞内含橘红色物质 结论:本实验所用罗汉果药材的显微鉴别结果符合《中国药典》年版 一部罗汉果“鉴别”项下有关规定。薄层色谱鉴别 取罗汉果粉末勘加稀乙醇,加热回流分钟,滤过,滤液蒸至约 ,用正丁醇振摇提取次,,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇 .使溶解.作为供试品溶液。另取罗汉果对照药材,同法制成对照药材溶清日青的药学研究 液。照‘中国药典》版一部附录 薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液 各,分别点于同~硅胶薄层板上,以三氯甲烷一甲醇一水::为 展开剂,展开,晾干,唼以%硫酸乙醇溶液,在?加热至斑点显色清晰。 供试品色谱中,在与对熙药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。结果如图 。 ‘‘ 圈罗汉果药材薄屡色谱鉴别 .对照药材 .罗祝果药材 / ‘ 结论:本实验所用罗汉果药材的薄层色谱符合《中国药典》年版一部 罗汉果“鉴别”项下有关规定。 .水分测定 取罗汉果,按照药典附录?水分甥定法第一法测定,平行做份试 验。结果如下。 寰罗汉幂水分测定结果 . ?结论:按药典规定,罗汉果水分含量不得超过 %。本实验所用罗汉果药 材的含水量为 /,符合《中国药典》年版一部罗汉果“检查”项下规 定。 提出物测定 将罗汉果粉碎成租颗粒,作为供试品备用。取供试品~,精密称定按 照药典附录 浸出物测定法中“水溶性浸出物测定法”项下的热浸法测定, 平行傲份试验。结果如下。药材鉴定 表罗汉果浸出物测定结果结论:按药典规定.罗汉果浸出物含量不得少于 %。本实验所用罗汉果 药材的浸出物含量为 %,符合药典罗汉果“浸出物”项下规定。 枇杷叶的鉴定 .实验材料 本品为蔷薇科?唧植物批杷.的干燥 叶。 枇杷叶饮片购自南京药业股份有限公司中药饮片厂,批号。产地; 广东。 性状 本品为长短不一的丝状,表面老黄,微显光泽。上表面黄棕色或红棕色,较 光滑;下表面可见绒毛,主脉于下表面显著突起。革质而脆,易折断。略带粘性, 味微甜。如图.。 田枇杷叶饮片 .鉴别 枇杷叶药材的横切面观察: 取经处理后的枇杷叶药材,以稀甘油软化后,横切成.大小,制成石蜡 切片,置显微镜下观察。 本品横切面的上表皮细胞扁方形,外被厚角质层:下表皮有多数单细胞非腺 毛.常弯曲,近主脉处多弯成人字形;气孔可见。栅栏组织为列细胞,海 绵组织疏松,均含草酸钙方晶及簇晶。主脉维管束外韧型,近环状:中柱鞘纤维清晒膏的药学研究 束排成不连续的环,壁术化,其周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维;薄壁 组织中散有黏液细胞.并有草酸钙方晶。如图。 上表皮 栅栏组缎 海编组织 术质部 韧皮部 中柱鞘纤维 黏液细胞 下表皮 囤批把叶横切面结构围。 帅 结论:奉实验所用枇杷叶药材的鉴别结果符合中国药典》年版一韶 枇杷叶“鉴别”项下规定。 .浸出物测定 将枇杷叶粉碎后过二号筛,作为供试品备用。取供试品~,精密称定, 按照药典附录浸出物测定法中“水溶性浸出物测定法”项下的热浸法测定, 平行做份试验。结果如下。 寰批杷叶浸出精测定结枭 曲 编号 实取重量? 浸出物含量呦 ,肿 . ,结论:按药典规定,枇杷叶浸出物含量不得少于%。率实验所用枇 杷叶 药材的浸出物含量为 %,符合药典枇把叶“浸出物”项下规定。 青性状 动物剥去外皮后,去骨取肉,在酶的作用下酶解成膏。本品为黄棕 色.稠膏状,昧腥。相对密度.。 薄荷脑的鉴别 性状 本品为无色棱柱状结晶,有薄荷的特殊香气,味初灼热后清?。 .熔点测定 取本品适量,按年版《中国药典》附录熔点测定法项下第一法进 药材鉴定 行测定。平行测定份样品的熔点,结果如下。 表 薄荷脑熔点测定结果 .? 编号 熔点? 结论:按药典要求,薄荷脑熔点应为。。本实验所用薄荷脑的熔点 为 .?,符合药典薄荷脑“性状’’项下有关规定。 .比旋度测定 取本品适量,精密称定,加乙醇制成每含.的溶液。按《中国药典》 年版一部附录 旋光度测定法进行测定。平行测定份样品的比旋 度, 结果如下。 表 薄荷脑比旋度测定结果 .? 比旋度根据公式仅/求得,为测得的旋光度,为测定管长度, 单位,本实验所用测定管长度为,为每溶液中含有被测物质的 重量。 结论:按药典规定,薄荷脑比旋度应为.。~.。本实验所用薄荷脑 的比 旋度为.。,符合药典要求。 .鉴别 取本品,加硫酸使溶解,结果显橙红色,小时后析出无薄荷 脑香气的无色油层。 取本品,加冰醋酸使溶解,加硫酸滴与硝酸滴的冷混合液, 结果显淡黄色。 结论:本实验所用薄荷脑的理化鉴别结果符合药典薄荷脑“鉴别项下规定。 .不挥发物检查 取本品,置已干燥恒重的蒸发皿中,在水浴上加热,使缓缓挥散后,在 。干燥至恒重,计算残渣重量,平行测定份样品。结果如下。清咽青的药学研究 表 薄荷脑不挥发物测定结果.?结论:按药典要求,薄荷脑不挥发物不得过。本实验所用薄荷脑的不挥 发物重量小于,符合药典薄荷脑“检查’’项下规定。 药材鉴定小结 经过对所购川贝母、桔梗、苦杏仁、罗汉果、枇杷叶等中药的全面鉴别、检 验,结果每味药的质量均符合《中国药典》年版一部有关规定,可以进行 下一步研究。制备工艺研究 三、制备工艺研究 技术路线 图 清咽膏的药学研究技术路线 .?/ 川贝母渗漉工艺研究 .优选 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 设计 均匀试验设计是在正交试验设计的基础上进一步发展而成的方法,相比正交 试验设计,有着试验次数少、布点均匀的优势,试验效率较高【引。本实验以浸渍 时间、渗漉量和渗漉速度为考察因素,其中浸渍时间可拟定较多个水平数,故采 用均匀设计法安排试验。方案如下。 表川贝母渗漉方案混合水平均匀设计表。× . . 注:渗漉量,,,分别相当于药材量的,,, 倍。清咽膏的药学研究 .渗漉及浓缩过程 称取川贝母,粉碎成粗粉,平均分成份,每份,称重。各份粗粉 以等量的%乙醇浸润,使其充分润湿、膨胀,放置小时。将已浸润的 粗粉装入渗漉筒,按上表进行试验。收集渗漉液,药渣留用。渗漉液在。以 下减压回收乙醇至无醇味,转移至?水浴浓缩成浸膏,再转移至真空干燥箱 中?干燥成干浸膏,称重。 .分光光度法测定总生物碱含量 有关贝母类药材总生物碱及各种单体生物碱含量的测定方法有 酸性染料比 色法、两相滴定法、非水滴定法、.法等,而比色法所用的紫外分光 光度计对颜色比较灵敏,准确度较蒯。本实验利用溴甲酚绿和川贝母中生物碱 在时形成离子对后,定量萃取于三氯甲烷这一原理,采用紫外.可见分光光 度计测定各份渗漉液样品中的总生物碱含量。 ..实验仪器、试剂和试药 紫外分光光度计岛津、型紫外可见分光光度计上海光谱 仪器有限公司、电子天平上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂;三氯甲烷、 冰醋酸、醋酸钠、溴甲酚绿,均为分析纯;贝母素乙对照品中国药品生物制品 检定所,批号.。 ..溶液的配制 ...缓冲液的配制 实验中所用缓冲液的配制方法:取./醋酸钠溶液,加入 ./醋酸溶液 ,即得的醋酸钠一醋酸缓冲液。 其中,./醋酸钠溶液的配制:取.醋酸钠,加蒸馏水,配 成./醋酸钠溶液。./醋酸溶液的配制:取冰醋酸,加蒸 馏水至。 ...对照品溶液的制备 精密称取贝母素乙对照品.于容量瓶中,用缓冲液稀释、定容至 刻度。精密量取,置分液漏斗中,加入缓冲液,再加入用上述缓冲液配 制的.%溴甲酚绿溶液,摇匀,用三氯甲烷振摇提取,将三氯 甲烷层滤入容量瓶中;剩余液再用三氯甲烷振摇提取次,每次,依 次滤入量瓶,并用三氯甲烷洗涤滤纸,滤入量瓶,加三氯甲烷至刻度,即得。 ...供试品溶液的制备 取渗漉液经浓缩干燥所得干浸膏.,精密称定,置具塞锥形瓶中, 精密加入缓冲液,振摇,放置过夜,滤过,滤液用上述缓冲液 定容至容量瓶中。精密量取,置分液漏斗中,加入缓冲液,再加制备工艺研究 入用上述缓冲液配制的.%溴甲酚绿溶液,摇匀,用三氯甲烷振摇 提取,将三氯甲烷层滤入容量瓶中;剩余液再用三氯甲烷振摇提取 次,每次,依次滤入量瓶,并用三氯甲烷洗涤滤纸,滤入量瓶,加三氯甲烷 至刻度,即得。在不称取干浸膏的条件下,按同法制备空白对照液。 表川贝母渗漉液干浸膏重量折算 .伽. ..实验条件的确定 ...波长的选择 取对照品溶液、供试品溶液和空白对照液,在~波长范围内扫描, 结果表明对照品溶液和样品溶液均在处有最大吸收且无干扰。因 此确定 总生物碱含量的最佳测定波长为。 ...标准曲线 精密量取对照品溶液.、.、.、.、.、.于容量瓶中,各用 三氯甲烷补充至刻度,在处测定吸收度,同法做空白试验。以吸收 度为 纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。回归方程为.一., .。清咽膏的药学研究 图总生物碱测定标准曲线 . 由标准曲线可知,贝母素乙在.~./浓度范围内呈良好的线 性关系。 ..精密度试验 精密吸取对照品溶液份,各,在处测定吸收度。结果如下。 表总生物碱分光光度法精密度试验结果 .? 结果为.%,表明仪器精密度良好。 ..稳定性试验 取同一份供试品溶液,在处每隔小时测定吸收度,连续次。结 果如下。 表总生物碱分光光度法稳定性试验结果 . 结果表明,吸收度随着时间推移呈缓慢减小的趋势,但为.%,表明 该测定方法在小时内稳定。 ..重复性试验 取同一份渗漉液干浸膏份,按...项下方法制备溶液,在处测 定吸收度。结果如下。制备工艺研究 表总生物碱分光光度法重复性试验结果 .?. 结果为.%,表明该测定方法重复性较好。 ..准确度试验 取上述已知含量的同一干浸膏份,各精密加入一定量的贝母素乙 对照品, 制成供试品溶液,在处测定吸收度。结果如下。 表总生物碱分光光度法准确度试验结果 . ?,测定结果,贝母素乙平均回收率为.%,为.%,表明该测定方 法准确度较高。 ..样品含量测定 按...的制备方法操作,精密量取供试品溶液各于容量瓶中, 加三氯甲烷至刻度,在处测定吸收度,结果如下。 表 份川贝母渗漉液总生物碱含量. ’清咽膏的药学研究 ××/ 样品中总生物碱含量 /。 相当于药材重量 由吸收度值代入回归方程算得,单位‖珊。 .统计分析 利用均匀设计软件对以上结果进行数理统计分析如下。 ..回归结果及分析 调出数据,确定以即总生物碱含量为因变量,浸渍时间、渗 漉量、渗漉速度为自变量。 采用二次回归,最优子集法建立回归方程,得到最优回归子集结 果及方差分 析结果如下。 表川贝母渗漉法优选分析结果 . 回归方程: 回归结果: 方差分析: 复相关系数.,残差标准差.,残差平方和.,回归 平方和. ,总平方和.。..?.,具有显著 性意义,说明回归方程有意义。 ..模型分析 求最优解最大解,得出最大解为:,,,在此条件下 一.。即采用浸渍小时、渗漉量、渗漉速度为/的条件。 制备工艺研究 根据以上处理结果,初步拟定川贝母渗漉工艺:浸渍小时,乙醇渗 漉量 相当于药材量的倍,渗漉速度/。 .最佳工艺验证 根据拟定的工艺,重复批试验。称取川贝母份,每份,粉碎成粗粉, 按浸渍小时、渗漉量、渗漉速度/的工艺进行渗漉提取,按 .项下方法制得干浸膏,称重。按.及以下各子项步骤,测定此份渗 漉液 中总生物碱含量。结果如下。 表川贝母最佳渗漉工艺验证结果 . 验证结果.%,说明拟定的工艺比较稳定。 由此确定清咽膏