ms培养基大量元素母液配制实验报告

ms培养基大量元素母液配制实验报告 实验一MS培养基母液的配制与保存 实验一 MS培养基母液的配制与保存 一、目的要求 1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能; 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 二、仪器与用具 1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱; 2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签; 3、试剂:95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。 三、方法步骤 (一)母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。 优点:(1)保证各物质成分的准确性; (2)便于配置时快速移取; (3)便于低温保藏。 1、MS大量元素母液(10×) 称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。 ? ? ? ? ? 化学药品 1升量 10升量(10×) 50升量(50×) 16.5g 19.0g 4.4g 3.7g 1.7g NH4NO3 1650 mg KNO3 1900 mg CaCl2?2H2O (CaCl2) 440 mg () MgSO4?7H2O(MgSO4) 370 mg () KH2PO4 170 mg 2、MS微量元素母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 ? ? ? ? ? ? ? 化学药品 MnSO4?4H2O ( MnSO4?H2O) ZnSO4?7H2O H3BO3 KI Na2MoO4?2H2O CuSO4?5H2O CoCl2?6H2O 1升量 22.3mg (21.4 mg) 8.6 mg 6.2 mg 0.83 mg 0.25 mg 0.025 mg 0.025mg 10升量 223mg (214 mg) 86mg 62 mg 8.3 mg 2.5mg 0.25mg 0.25mg 100升量(100×) 注意:CoCl2?6H2O和CuSO4?5H2O可按10倍量(0.25 mg×10=2.5 mg)或100倍量(25 mg)称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。 3、MS铁盐母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 Na2?EDTA FeSO4?7H2O 1升量 37.3 mg 27.8 mg 10升量 373 (转载于:www.xiElw.coM 写论文 网:ms培养基大量元素母液配制实验报告)mg 278 mg 100升量(100×) 注意配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶(烧杯)中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 ? ? ? ? ? 化学药品 烟酸 盐酸吡哆素(VB6) 盐酸硫胺素(VB1) 肌醇 甘氨酸 1升量 0.5 mg 0.5 mg 0.1 mg 100 mg 2 mg 10升量 5mg 5mg 1 mg 1 g 20mg 100升量(100×) 5、生长调节剂 单独配制，浓度为1—5 mg/ml(书中为0.5 — 1 mg/ml)，本实验要求配成1 mg/ml 。 配制培养基母液时注意事项: ?一些离子易发生沉淀，可先少量水溶解，在按配方顺序依次混合; ?配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水; ?药品应用化学纯或分析纯; ?溶解生长素时，可用少量0.1—1 N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0.1—1 N的HCl加热溶解(如再加蒸馏水，易产生白色沉淀，此时可加入热水)。 (二)母液的保存 1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期、配制者。(注意将易分解、氧化者，放入棕色瓶中)例如:MS大量(10×)，2012.9.15,11 级1班甲组 2、贮藏:4?冰箱。 四、作业 1、写出实验报告。 2、配制培养基母液时应注意哪些事项, 篇二:MS培养基母液的配制与保存 实验一 MS培养基母液的配制与保存 一、目的要求 1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能; 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 二、仪器与用具 1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱; 2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签; 3、试剂:95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有 机物，蒸馏水。 三、方法步骤 (一)母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100 倍。 优点:(1)保证各物质成分的准确性; (2)便于配置时快速移取; (3)便于低温保藏。 1、MS大量元素母液(10×) 称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。 ? ? ? ? ? 化学药品 1升量 10升量(10×) 50升量(50×) 16.5g 19.0g 4.4g 3.7g 1.7g NH4NO3 1650 mg KNO3 1900 mg CaCl2?2H2O (CaCl2) 440 mg () MgSO4?7H2O(MgSO4) 370 mg () KH2PO4 170 mg 2、MS微量元素母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 ? ? ? ? ? ? ? 化学药品 MnSO4?4H2O ( MnSO4?H2O) ZnSO4?7H2O H3BO3 KI Na2MoO4?2H2O CuSO4?5H2O CoCl2?6H2O 1升量 22.3mg (21.4 mg) 8.6 mg 6.2 mg 0.83 mg 0.25 mg 0.025 mg 0.025mg 10升量 223mg (214 mg) 86mg 62 mg 8.3 mg 2.5mg 0.25mg 0.25mg 100升量(100×) 注意:CoCl2?6H2O和CuSO4?5H2O可按10倍量(0.25 mg×10=2.5 mg)或100倍量(25 mg)称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。 3、MS铁盐母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 Na2?EDTA FeSO4?7H2O 1升量 37.3 mg 27.8 mg 10升量 373 mg 278 mg 100升量(100×) 注意配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶(烧杯)中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液(100×) 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 ? ? ? ? ? 化学药品 烟酸 盐酸吡哆素(VB6) 盐酸硫胺素(VB1) 肌醇 甘氨酸 1升量 0.5 mg 0.5 mg 0.1 mg 100 mg 2 mg 10升量 5mg 5mg 1 mg 1 g 20mg 100升量(100×) 5、生长调节剂 单独配制，浓度为1—5 mg/ml(书中为0.5 — 1 mg/ml)，本实验要求配成1 mg/ml 。 配制培养基母液时注意事项: ?一些离子易发生沉淀，可先少量水溶解，在按配方顺序依次混合; ?配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水; ?药品应用化学纯或分析纯; ?溶解生长素时，可用少量0.1—1 N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0.1—1 N的HCl加热溶解(如再加蒸馏水，易产生白色沉淀，此时可加入热水)。 (二)母液的保存 1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期、配制者。(注意将易分解、氧化者，放入棕色瓶中)例如:MS铁盐(100×)，2013.10.22,12 生技班甲组 2、贮藏:4?冰箱。 四、作业 1、写出实验报告。 2、配制培养基母液时应注意哪些事项, 篇三:实验二培养基母液的配制及保存 实验二 培养基母液的配制及保存 一、目的要求 了解并掌握植物组织培养中MS培养基母液、生长调节剂母液配制与保存的基本知识及操作规范，能根据配方准确计算各种药品的称取量。 二、基本原理 在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、有机物、铁盐、激素等分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液，置于冰箱内保存。当配制培养基时，按预先计算好的量分别吸取各种母液即可。本实训以MS培养基为例，学习培养基母液的配制方法。 三、试剂与主要用具 1(仪器、用具 电子天平(感量0.01g和0.0001g)、药匙、玻璃棒、称量纸、吸水纸、滴管、洗瓶、标签纸、烧杯(50ml、100ml、200ml)、容量瓶(100ml、200ml、500ml、1000ml)、试剂瓶(100mL、200mL、500ml、1000ml)、量杯、量筒、移液管、移液枪、洗耳球、电炉、冰箱等。 2(试剂 (1)95%乙醇、1mol/L NaOH、1mol/L HCl (2)MS培养基各成分试剂 (3)植物生长调节剂:2，4-D、6-BA、IAA、NAA等 (4)洗涤剂、蒸馏水 四、方法步骤 1(大量元素母液的配制 按照MS培养基配方的需要量，将各种化合物称量扩大10倍，用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。完全溶解后，按表4-1顺序依次混合已溶解的化合物溶液，并搅拌，以免产生沉淀，注意最后加入氯化钙溶液，混匀，用量筒定容到500ml，倒入试剂瓶中并贴好标签。保存于4?冰箱待用。 表4-1 MS培养基大量元素母液(10倍)的配制剂量 2(微量元素母液的配制 按照MS培养基配方需要量，将微量元素各种化合物(如表4-2)扩大100倍，用万分之一的电子天平分别准确称取，用少量蒸馏水溶解，也可以混合溶解，混合后定容到500mL。将配制好的母液倒入试剂瓶中，并贴好标签，保存于4?冰箱中。 3. 铁盐母液的配制 常用的铁盐是FeSO4?7H2O和Na2-EDTA的螯合物，必须单独配制。配制时，按照扩大100倍的用量(如表4-3)，分别称取FeSO4?7H2O和Na2-EDTA，分别溶解后，将Na2-EDTA溶液缓缓倒入FeSO4溶液中(需加热溶解)，搅拌均匀使其充分螯合，用蒸馏水定容到500mL后贮放于棕色玻璃瓶中，贴好标签，保存于4?冰箱中。 表4-3 MS培养基铁盐母液(100倍)的配制剂量 4(有机物母液的配制 按照表4-4 中各成分浓度扩大100倍后的用量，用感量0.0001g电子天平分 别称量各有机物。分别溶解定容后装入试剂瓶中，也可以混合溶解定容，装入同一试剂瓶中，写好标签，放入冰箱中保存。一般有机物都溶于水，但叶酸(VBc)先用少量稀氨水或1mol/L NaOH溶液溶解;VH(生物素)先用1mol/L NaOH溶液溶解;VA、VD3、VB12应先用95%乙醇溶解，然后再用蒸馏水定容。 表4-4 MS培养基有机物母液(100倍)的配制剂量 扩大倍数、计算实际称取量。 5(激素母液的配制 激素母液必须分别配制，浓度根据培养基配方的需要量灵活确定，一般是0.1,2mg/ml，根据需要确定配制的浓度。称量激素要用感量万分之一天平。配制激素母液时应注意，各激素的溶剂不同，具体见表4-5。 表4-5 常用植物激素及生长调节物质的溶剂 中文名 2，4-二氯苯氧乙酸 吲哚乙酸 吲哚丁酸 α-萘乙酸 6-苄基氨基腺嘌呤 腺嘌呤 激动素 玉米素 赤霉素 脱落酸 缩写 2,4-D IAA IBA α-NAA 6-BA Ade KT ZT GA ABA 溶剂 NaOH/乙醇 NaOH/乙醇 NaOH/乙醇 NaOH/乙醇 NaOH/ HCl H2O HCl / NaOH NaOH 乙醇 NaOH 注:称取10mgNAA溶解后定容至100ml，即得到0.1mg/mlNAA贮备液。 称取100mg 6-BA溶解后定容至100ml，即得到1mg/ml6-BA贮备液。 6(在配制母液时应注意: (1)培养基各试剂应使用分析纯，用蒸馏水溶解及定容。 (2)在称量时应防止药品间的污染，药匙、称量纸不能混用，每种试剂使用一把药匙，多出的试剂原则上不能再倒回原试剂瓶。 (3)使用电子天平时注意不要把药品撒到称盘上，用完以后，用洗耳球将天平内的脏物清理干净。 (4)母液配制好后，贴上标签，标明母液名称、试剂浓度或扩大倍数、配制日期，并存放在4?冰箱中。使用前，要进行检查，若发现试剂中有絮状沉淀、或长菌、或铁盐母液的颜色变为棕褐色，都不应再使用。 五、结果与分析 1 为什么要配制培养基母液, 2 在配制培养基时，配制1升MS基本培养基应吸取本实验中所配制的四种 混合母液各多少毫升, 3仔细观察在配制母液过程中的现象与遇到的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ，如是否产生浑浊或沉淀，并分析出现混浊的原因。