聚酰胺层析柱用于奶杏黄酮分离时柱寿命的研究

科技进展 《Ac№r in ScKmce＆Technlogy) 聚 酰 胺 层 析 柱 用 于 银 杏 黄 酮 分 离 时 柱 寿 命 的 研 究 王怡红 宋 苇 张征林 (东南大学化学化工系，210096) 崔 群 (南京化工大学化工系，210009) 2 z R 2 I7／。、 摘要 论述了以改性聚酰胺为柱填料对银杏黄酮进行柱层析精制的基本原理。测试了使用该法时的柱层析寿命，分 析了影响柱寿命的主要因索，提出并用实验证实了“先萃取后上柱 的新方法。 有效延长了柱寿命，改善了GBE的质量。 关键词苎 璺塑 柱寿命 ，蕈 目， 直 菇， 1 前 言 黄酮类化合物广泛分布于植物药中，其药理作用 多种多样。在新研制开发的富含黄酮类化合物的天 然植物药中，首推以银杏叶提取物(GBE)所制成的药 品。GBE中起重要生物活性作用的化合物为黄酮糖 甙类化合物(Fl 0- glycosides)和银杏内脂类化合物 (Ginkgolides and bilobalides)。黄酮类化合物中富含酚 羟基，是多环多元酚类化合物。目前在银杏叶中发现 的黄酮类化合物有35种，按甙元的不同可分为单黄 酮甙类、双基酮甙类、二氢黄酮类、黄酮醇类、异黄酮 类化合物，由于它们分子中所含羟基数目和位置的不 同、所含芳香核及糖甙数目的不同，导致了分子极性、 酸性强弱及水溶性的差异。国内外生产 GBE的方法 大致有两种；银杏叶粗提物的溶剂萃取法和柱层析分 离法。柱分离法中柱分离的好坏关系到GBE中黄酮 甙含量的高低，对于黄酮类化合物的柱层析分离来 说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。该吸附剂是利用黄 酮类化合物富含酚羟基的特点，通过分子中的酚羟基 与聚酰胺分子中的酰胺基形成氢键缔合产生吸附。 吸附的强度主要取决于黄酮类化合物中羟基的数目 与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成 氢键的缔合能力大小，溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化 合物形成氢键缔合的能力越强，则聚酰胺对黄酮类酚 性物的吸附作用将越弱。聚酰胺层析柱正是利用此 性质对银杏黄酮进行吸附、脱附而分离的。由于所有 银杏黄酮单体均可在聚酰胺柱上得以分离，故聚酰胺 柱能够吸附全部银杏黄酮。我们进行的提取工作，不 是进行黄酮单体分离，是要得到黄酮总体，即要求总 的黄酮的质和量。由于银杏叶中黄酮类化合物种类 繁多、性质有差异，故而在一定的柱层析条件下，总有 一 部分黄酮不被吸附，一部分黄酮不被洗脱，所以层 析条件将对 GBE的组成、含量、得率产生影响。另 外，由于粗提物中含有一定柱层析条件下难以洗脱的 杂质，难洗脱杂质和一部分吸附力大的黄酮留在柱子 上，影响下一次的吸附分离。 纯聚酰胺作为柱层析填料，存在流速慢和低分子 杂质混入问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ，用改性的聚酰胺柱克服了上述问题， 且使单位聚酰胺的吸附能力增大。得到的提取物含 量超过国际规定含量的 1倍以上，本文对改性聚酰胺 柱的柱寿命进行分析研究，使柱分离产物稳定。 2 实验部分 2．1 实验方法 银杏叶以75％的乙醇一水溶液三次浸提，浸提 液合并浓缩至小体积，加水沉降、过滤，得粗提液。 银杏粗提液以一定流速(100mL／min)流过柱径为 4Omm、柱长为800ram、装柱量为l8吨的改性聚酰胺层 析柱体，进行吸附，3倍柱体积的去离子水冲洗，水洗 液黄酮薄板分析呈阴性，用70％乙醇水溶液洗脱。 2．2 分析方法 过程控制分析采用薄层色谱法，最终产物含量分 析用高压液相色谱法 化工时刊 19蚰 年 【12)卷第 1O期 一 19 — 维普资讯 http://www.cqvip.com 3 结果与讨论 科技进展 (Adv~ e8ln Science＆ Iog 3．1 桂寿命的确定 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1数据说明：(1)吸附次数增多、柱黄酮吸附量 下降。粗提液中含有 了0％乙醇无法洗脱的难洗脱物 (如叶绿素、鞣质等)及一部分难以洗脱的黄酮类化舍 物，这部分物质与改性聚酰胺的吸附力大于黄酮类化 合物，故而它们均被吸附在拄顶端。难洗脱物被吸附 在柱填料表面，使之失效，降低了有效柱吸附容量。 随着吸附次数的增加，难洗脱物在柱上积累，层析柱 有效柱长逐渐缩短 而黄酮类化合物性质有差异，各 种黄酮分布于柱长方向的不同位置处，有效柱长的减 小，使一部分黄酮流出柱外不被吸附，洗脱物中黄酮 量减少。故进行上柱液的前期除杂可延长柱寿命。 (2)柱分离产物中洗脱杂质的量变化不大，得率逐渐 降低，降低幅度依次减小。柱分离产物得率的降低是 由于黄酮量的降低所致。从总体上说，易洗脱杂质的 性质应与黄酮相近，但要比黄酮易于吸附，致使柱有 效容量的降低不影响这部分杂质的吸附。得率减小 幅度逐次降低，可认为是柱上难洗脱黄酮亦有一定的 吸附作用。(3)改性聚酰胺对黄酮类化合物的吸附量 远大于其单层饱和吸附量。改性聚酰胺分子_E 0 』 N—c一(c )j-3-链与链之间排布比较紊乱，加之 1 0CH3 聚台物脂肪链的柔韧性使涂布与载体表面的聚合物 分子元一定取向和规则．也致使聚酰胺与黄酮氢键结 台点无规则性。黄酮类化合物是多环多羟基化合物， 如香豆山奈黄素： 表 1 吸附次数与产品黄酮■之间的关系 ^ J s 分子中可有不止一个酚羟基与改进聚酰胺形成氢键 缔台，但也总有不发生缔合的酚羟基，不发生缔合的 酚羟基又可与其它分子的合适部位发生氢键缔合，由 此发生多层吸附使黄酮吸附量增多。 3．2 上液经溶剂萃取后上柱情况 取2．1所得粗提液，按粗提液：溶剂(环己烷：四 氯化碳=1：1)=1：1的比例，萃取3次．取水相蒸去 溶剂后加水上柱，结果如下表： 表2 豫杂后上柱次数和黄酮暇附■之间关系 表2说明：溶剂萃取除去了部分难洗脱物后。改 善了柱吸附性能，同样5次吸附后，柱分离产物质量 仍好。所以除杂程度越高，柱分离效果越好，柱寿命 越长。 4 结 论 (1)改性聚酰胺与黄酮等物的多分子层吸附导 致柱吸附量远大于其单分子层饱和吸附量。 (2)上柱液前期除杂对柱分离效果和寿命影响 很大。未经溶剂萃取的粗提液的柱分离次数为4次， 之后应进行柱再生处理。 参考文献 譬譬 墨苎和吸附量为 ‘6 。I， m0 黄酮平 1 中草药成册化学．人民出版社．1980，25 28 均相对分子质量为760 ‘⋯一⋯⋯ ⋯⋯⋯’ ’ 一 20 一 化工时刊 1998年 (12)卷第 10期 维普资讯 http://www.cqvip.com 科技进展 《AcI帕n。es in sd帅∞＆ 咖 Iogy) 低浓度下醪塔 NT的算图法 (四J『l轻化工学 自贡643033) 丁& 2 z 、 己 (四川轻化工学 花孚王藿 自贡 f 摘要 根据低浓度下醪塔Nr的计算公式，绘制成算图。能供酒精工业中醪塔或精馏塔在低浓度下NT的计算。 关键词堡兰 兰垦兰兰 西喜 蔓 茬 1 引 言 醪塔是酒精工业中的蒸馏塔。由发酵而得的成 熟醪液(稀酒精一水溶液)，因为酒精组分含量少，但 又要回收其精酒组分，故通过醪塔蒸馏进行粗分。 醪塔的理论板数NT在工程设计计算中一般用梯 级图解法确定。但由于在低浓度下图解困难，因此低 浓度下醪塔NT只有近似计算。 2 低浓度下醪塔 NT的算图 2．1 作图依据 2．1．1 醪甚物料衡算和操作关系 醪塔为回收塔，它采用塔顶加料，塔顶无回流，直 接蒸汽加热。如图1。 全塔物料衡算： F+ =D+W (1) = ％ + (2) 醪塔操作关系：假设恒物质的量流成立，则 Ir， Ym+1= ( 一‰) (3) 式中：L =W ：qF ： 1Io： D +(q一1)F 式(3)为醪塔操作关系即直线关系。 2 徐任生 ．天然产物化学 ．科学出版社．1993， 3 精细化工 14(6)．12(1997) (收稿日期：1998—09—09) Study of the Life Span of Polyamide Columne Seperating Flavonol Glycosides from Ginkgobiloba L Wang Yihong Song Wei Zhang Zhengling Cui Qun (‘Department of Chemical En Ilee血g，Southeast University，Nanjing 210096) (。Department 0fChemical En nee血g，TheUniversity ofChemica1．Technology ofN且Iljing210009) Abstract The flavonol glycosides of Ginkgobfloba L．is pared by columne chromatography with reformed pinyamide．The life span of the eolumne is studied ，and a new method of“extracting first and ehromatographir,g last” is proposed and also carried out by experiments．Th e life span of the colunme is effectively extended and the quality of GBEisimproved． Keywords eolumne chromatography，GBE，life span of eolumne 化工时刊 1998年 (12)卷第 10期 一 21 — 维普资讯 http://www.cqvip.com