植物乳杆菌对亚硝酸根离子的清除作用

／主品工案 ■微生物制剂 植物乳杆菌对亚硝酸根离子的清除作用 上海交大昂立股份有限公司 严 榕 傅昌年 周朝辉 摘 要 用亚硝酸盐在弱酸性条件下与对氨基 苯磺酸重氮化后 ，再与盐酸萘 乙二胺偶合生成红色化合 物的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ．测定植物乳杆菌 6009、6010、6013、6026、6027、6043、6051等 7个菌株 对亚硝酸根 离子的清除 率：结果 7个菌株都有清除能力，其 中菌株 6010清除率为最优 ： 关键词 植物乳杆菌 亚硝酸根 离子 清除率 1． 前 言 近年来 ，随着人们健康意识的逐步增强 ，微生态制 剂市场 十分活跃 ，相应的产品多种多样。微生态制剂 主要是通过其 含有的活菌及其代谢产物 ，如有机酸、细 菌素 、H 等来达到调节人体微生态平衡的 目的。 亚硝胺是 人和动物的强致癌物质 ，是 由仲胺 、叔胺 与NO：离子在一定条件下形成的。人们直接从食物中 摄取的亚硝胺是微平其微的，但形成亚硝胺的前体类 物质却大量存 于食品中，这些物质也能产生于食物 在体内的代谢过程中：如果某种物质具有清除亚硝胺 或其前体的作用 ，那么这种物质就可能具有防癌的作 用 、 本文将具体考察 匕海交大昂立股份有限公司研究 昕提供的 7株植物乳杆菌对亚硝 酸根离子的清除率 ， 从中确定 1侏对亚硝酸根离子清除率最高的菌株 ，通 过反懂时间埘清除率影响的研究 ，确定一个最佳的反 幢时问，并 且通过实验证明陈 旧发酵液对亚硝酸根离 子是否同样仔在清除作用 2． 材料和方法 2．1 菌株 ：植物乳忏菌 (Lactobacillus plantarum)6009、 6010、6013、6026、6027、6043、6051： 2．2 菌株来源 ：均 由上海 交大 昂立股份有限公司研 究所分离并保存? 2．3 主要试齐lJ和设备 2．3．1 主要c式剂 ：100rag／L亚硝酸钠溶液 ，0．4％对氨 基苯磺酸溶液，0．2％盐酸萘乙二胺。 2．3．2 设备：紫外分光光度仪 ，电子天平 ，立式圆形 力蒸汽灭菌锅 ，隔水式电热恒温培养箱 ： 2．4 培养基成分 ：葡萄精 ，异麦芽糖 ，酵 母膏 ，蛋白 胨 ，NaC1，牛磺酸等 2．5 发酵液的制备 ：将种子液以万分之 _I的接种量 接入培养基中，16h培养一 2．6 ：实验方法 ： l】测定 NAN() 脂 理 ：哑硝酸盐在弱酸性的条件下， 对氯基苯磺酸 蓖氮化．再与盐酸萘 乙二胺偶合生成 · 40 食品工业>2t)o3年 第 6期 红色化合物 ； 2)由 100mg／L的 NaNO： 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 储备液制得 5mg／L的 标准应用 液； 3)亚硝酸钠标准曲线的绘制 ：分别吸取 5rag／L的 标准液 2．0、3．0、4．0、5．0、6．0、7．0、8．omL于 5OraL容 奄 瓶 中静 置 30rain，然 后 加 入 0．4％对 氨 基苯 磺 酸 4．0mL，摇匀 ，静置 5nlin，再加入 0．2％盐酸萘乙二胺 2mI．，最后用蒸馏水稀释至刻度并摇匀 ，放置 15rain后 ， 在 540nm下进行 比色测定 。以标准亚硝酸钠量为横坐 标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。用最小二乘法 进行直线 回归 ，得回归方程 A=0．0106C+0．0232，相 关 系数 r=0．993； 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1 标准 NaNO 量与吸光度 A的关 系 序 号 1 2 3 4 5 6 7 标准NaNO 量 10 15 20 25 30 35 40 (mg／L) A(54Ohm) 0．I】6 0．184 0．237 0．294 0 35l 0．396 0．43l NaNO 2(mg／L) 图 1 标准亚硝酸钠量和吸光度的关 系 4)各菌株对亚硝酸根离子 的清除率的测定：选取 各菌株发酵液 ，用 0．22urn的滤膜过滤 ：分别吸取 5rag／ L的 NaNO：标准液 8．OmL于 50mI 容量瓶中，再分别加 入发酵液滤液 0，1．0，2．0，3．0，4．0，5．0，6．0，7．0， 8．OraL，常温下反应 30rain，加入 0．4％的对氢基苯磺酸 4．OmL，摇匀 ，静置 5min，加入 0．2％的盐酸萘乙二胺 2．0mL，用蒸馏水稀释至刎度，摇匀 ，放置 15rain岳，在 54{him下进行比色测定 ； THE FOOD INDUSTRY 维普资讯 http://www.cqvip.com ■微生物制剂 二工案 5)时间对亚硝酸根离子清除率影响的测定 ：分别 吸取 5mg／L的 NaNO 标准液 8．0mL于七个 50mL容量 瓶中，再分别加入发酵液滤液 6．0mL于其中六个容量 瓶中，常温下分别反应 lO，20，3O，4o，50，60min，加入 0．4％的对氨基苯磺酸 4．0mL，摇匀，静置 5min，加入 0．2％的盐酸萘乙二胺 2．0mL，用蒸馏水稀释至刻度 ， 摇匀，放置 15min后 ，在 540nm下进行比色测定； 6)对 NaNO 清 除物测定 ：分别吸取 5mg／L的 NaNO：标准液 8．0mL于 50mL容量瓶 中，再分别加入 新鲜发酵液和保存 9个月 的陈旧发酵液的上清液 0， 1．0，2．0，3．0，4．0，5．0，6．0，7．0，8．0mL，常温下反应 30min，加入 0．4％的对氨基苯磺酸4．0mL，摇匀，静置 5min，加入 0．2％的盐酸萘乙二胺 2．0mL，用蒸馏水稀 释至刻度 ，摇匀 ，放置 15min后，在 540nm下进行比色 测定。 3． 结果与讨论 3．1 菌株发酵滤液对亚硝酸根离子的清除作用 表 2 不同菌株的发酵滤液对 No；的清除率(％) 加样量(mL) l 2 3 4 5 6 7 8 60o9 24．4 50 57．1l 6l-85 72．63 73．82 75．12 78．08 60lO l7．8 46．1 54．85 65．96 71．39 74．47 77．3 78．96 6ol3 26．86 47．09 59．3l 66．67 71．77 72．48 75．8 77．1l 6Oz6 28．39 48．93 55．64 62．27 68．o8 68．43 70．69 73．06 6027 17．49 37．59 43．74 55．08 61．47 62．4l 64．07 64．54 6ID43 21．28 36．17 43．74 53．9 57．92 62．88 65．48 66．67 6o5l 22．22 44．2l 54．61 62．65 65．48 64．3 70．45 73．29 由表 2和图 2(略)可知 ，所有发酵滤液的清除率 都随着加样量的增大而增大。对 NO；的清除率也都快 速上升，到最后趋于平衡。而且 ，这 7个菌株对 NO；的 清除规律总体相似，都具有较强的清除 NOi的作用。它 们的清除率依次为 ：6010>6009>6013>6026>6051> 6027>6043。相对而言，清除率最大的是 60lO，最小的 是 6043。 通过该实验，我们发现，这些菌株对亚硝酸盐都具 有很明显的清除作用 ，随着菌株发酵滤液加样量的增 加，清除效果就愈加显著，这也证明了其发酵滤液能从 源头上对一些致癌的亚硝酸胺的前体物质进行有效抑 制。由于菌株本身是有益菌，在对亚硝酸盐产生清除 作用的同时，无任何不良的副作用产生。这对相关防 癌 、治癌的研究有着很积极的推动作用，同时也进一步 拓宽了该领域的研究思路和方法。可见，开发和利用 植物乳杆菌于临床，具有很大的研究前景。 3．2 时间对亚硝酸根离子清除率影响的测定 表 3 时间对亚硝酸根离子清除率的影响 时间(min) 10 20 30 40 50 60 吸光度A 0．1l6 0．1o6 0．1o2 0．10l 0．1o2 0．101 清除率(％) 69．o7 71．73 72．80 73．0r7 72．80 73．o7 ，～ 一 稚 叁 蜒 0 20 40 60 80 t／min 图 3 时间与亚硝酸根离子清除率的关系 由图3所示 ，清除率一开始随着加样量的增大而增 大 ，10min时的清除率最小 ，之后 ，清除率随着时间的 增大，而迅速增大。而在30min以后 ，清除率趋 向于稳 定，30min至60min清除率基本相同。所以，根据该实验 可以确定30rain为清除亚硝酸根离子的较理想时间。 3．3 对 NaNO：清除物测定 NOi清除率 ： (加入标准 NaNO：的量 一NaNO 的 残留量)／加入标准的量 ×100 表 4 不同时间的发酵滤液对 NO；清除率的对比 新 鲜发酵液 陈旧发酵液 加 样量 ( mL) 清除率(％) 清除率(％) O 0 0 l 21．60 l5．9o 2 46．10 31．62 3 54．85 45．09 4 65．96 51．20 5 71．39 59．8O 6 74．47 61．52 7 77．30 63．o3 8 78．96 66．84 ，～ 、一 辞 叁 蜒 t／h 图 4 不同时间的发酵滤液对 NO；清除率的影响 由图4可知 ，陈旧发酵液的清除率虽然低于新鲜 发酵液，但是对 NOi的清除率仍维持在相当高的百分 率， 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 陈旧发酵液对于 NO；同样具有较强的清除作 用。 4． 结 论 通过实验证明，菌株 6010的发酵滤液对 NO2的清 除率最大，并且较好的清除时间在 30min左右，而存放 数月的发酵液对 NO；仍有一定的清除作用。 参考文献(略 )回 《食品~ ))2oo3年第 6期 41 · 舳加∞如 ∞∞ 加m 0 维普资讯 http://www.cqvip.com