酵母细胞培养实验
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一:实验目的
1.掌握酵母细胞的生活方式以及生长周期
2.掌握酵母细胞生长所需要的生活条件
3.掌握酵母培养基的制备
2．实验材料
1.菌种：啤酒酵母
2物料：葡萄糖 麦芽糖 硫酸铵 氯化钾 硫酸镁 氯化钠 酵母膏 蛋白胨
3.器材：10个250ml的三角瓶，1个500ml的烧杯，玻璃棒，天平，称量纸，药 匙，蒸馏水，移液枪，枪头，超菌工作台，酒精灯，报纸，封口膜，橡 皮筋若干
3．实验步骤
1.称量:称量2.5g的酵母膏，和1.875g的蛋白胨。2.5g葡萄糖，1.875g麦芽 糖，0.625g的硫酸铵，0.625g氯化钾，0.625g的硫酸镁，0.625g氯化 钠。
2.溶解:将称量后的药品溶解到125ml的中，混合搅匀。
3.调PH:调节ph5.5-6.0之间。
4.分装：将10个250ml的三角瓶分成2组，分别标号1-1,1-2,1-3,1-4,1-5和 2-1,2-2,2-3,2-4,2-5在标号为1的三角瓶中分别加入15ml的混合液 体，在标号为2的三角瓶中加入10ml的混合液体。用封口膜将10个三 角瓶封住，并且包上报纸。
5.灭菌：将10个三角瓶放入115
灭菌20min。
6.接种：在超菌工作台上，用移液枪吸取1ml的酵母菌液接种于带有标号为1 的
三角瓶中，将带有2标号的三角瓶也放入其中。
7.培养：将带有标号为1的5个三角瓶放入200rpm，温度为31
的摇床中进行 培养。
8.补料：经过24h的培养后，在超菌工作台上将带有2标号的三角瓶一一对应带 有1标号的三角瓶中进行补料。调节摇床温度为28
。
9.酵母计数：再培养24h后，结束培养，收集酵母，并对酵母用血球计数板进行 计数，计算酵母得率。
四：实验结果和
分析
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1.实验结果： 经过血球计数板进行计数酵母数量再稀释10倍的酵母原液中在120-130 个每毫升。
2.实验分析
（1）葡萄糖和麦芽糖一起用导致C源可能在一定程度上造成了浪费，而且酵母 对葡萄糖的利用较为缓慢，可能在一定程度上导致酵母生长缓慢。
（2）没有用P源可能在一定程度上导致啤酒酵母生长略微缓慢，其中有一部分 酵母的体积不是很大。
3.注意事项
（1）在超菌工作台上时候应该尽量避免污染杂菌，尤其是芽孢杆菌的污染，灭菌温度和时间不能过长，避免葡萄糖的C化。
（2）酵母的前期培养过程中大量的利用培养基中的营养成分，产生大量的能量，所以前阶段温度不宜为31
，应该调低2-3
，补料过后可以调节温度为31
。
浙公网安备 33021202002483