A006 微量还原型谷胱甘肽测定试剂盒说明书

A006 微量还原型谷胱甘肽测定试剂盒说明书微量还原型谷胱甘肽测定试剂盒（Glutathione Reduced Assay Kit，酶标微板法，96T）一、所需仪器酶标仪，4℃离心机，微量移液器、8 道（12 道）微量移液器试剂盒灵敏度：1.5μmol/L 二、样本前处理 ○ 培养细胞： ① 用 0.25%的胰酶消化细胞 ② 取 0.1M pH 7.4 的等渗 PBS 缓冲液洗细胞一次 ③ 低速离心收集沉淀细胞，再加入 0.3~0.5ml 缓冲液悬浮细胞，超声或手动研磨破碎细胞后待测上清液制备：取破碎后的细...

微量还原型谷胱甘肽测定试剂盒（Glutathione Reduced Assay Kit，酶标微板法，96T）一、所需仪器酶标仪，4℃离心机，微量移液器、8 道（12 道）微量移液器试剂盒灵敏度：1.5μmol/L 二、样本前处理 ○ 培养细胞： ① 用 0.25%的胰酶消化细胞 ② 取 0.1M pH 7.4 的等渗 PBS 缓冲液洗细胞一次 ③ 低速离心收集沉淀细胞，再加入 0.3~0.5ml 缓冲液悬浮细胞，超声或手动研磨破碎细胞后待测上清液制备：取破碎后的细胞悬液 0.1ml，加 0.1ml 试剂一混匀，3500～4000 转/分离心 10 分钟，取上清液待测。 ○ 组织：匀浆的制备：准确称取组织重量，按重量体积比加入 9倍的生理盐水制成组织匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清即 10%组织匀浆。上清液制备：取 10%组织匀浆 0.1ml，加 0.1ml 试剂一混匀，3500～4000 转/分离心 10 分钟，取上清液待测。 ○ 血清（浆）：直接取血清（浆）0.05ml，加试剂一 0.2ml 混匀，3500～4000 转/分离心 10 分钟，取上清液待测。 ○ 全血： 10 倍溶血液的制备：取 0.1ml 肝素抗凝全血加双蒸水 0.9ml，充分混匀，直至透亮为止。上清液制备：取 10 倍溶血液 0.05ml，加 0.2ml 试剂一混匀，3500～4000 转/分离心 10 分钟，取上清液待测。六、操作步骤： ① 取出透明 96 孔板，依照顺序对应分别加入 100μl 各个浓度标准品于空白孔中； ② 分别标记样本编号，加入 100μl 待测样本于空白孔中； ③ 在标准孔和样品孔中分别加入 100μl 试剂二、25μl 试剂三； ④ 轻轻摇动孔板，静置 5 分钟，405nm 波长，用酶标仪测定吸光度值（30 分钟内完成比色）； ⑤ 用标准曲线确定所得样本溶液的 GSH 浓度； ⑥ 测定组织及细胞时，将所得样本溶液的 GSH 浓度除以其样本的总蛋白浓度对结果进行校正。

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