08生物制药综合实验
银杏外种皮中活性成分的提取与测定
指导教师: 王改玲
一、目的要求:
1(掌握中药成分系统预试的原理及
方法
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。
2(掌握黄酮类化合物的一般提取方法及原理
3(掌握利用紫外可见分光光度计测定黄酮类化合物的一般方法
二、试剂与仪器:
试剂:芸香叶苷
标准
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品，银杏外种皮。
丙酮、 乙醚(石油醚)、氯仿、乙醇、醋酸、氨水、吡啶
香草醛、浓HCI、无水硫酸钠、NaoH、醋酸镁、盐酸羟胺、氢氧化钾、FeCL3、镁粉、AICI3 、α-萘酚、醋酐、氯仿、浓硫酸、AgN03 、溴酚兰、明胶、铁氰化钾、碘化铋钾、碘、碘化钾、苦味酸、磷钨酸、亚硝酰铁氰化钠、3、5—二硝基苯甲酸、CuSO4 、茚三酮、亚硝酸钠、硝酸铝。
仪器:紫外可见分光光度计、粉碎机、烘箱、分析天平、恒温水浴锅、100ml 容量瓶、大量载玻片、大量小试管。
三、实验步骤
(一)系统预试
检品溶液的制备:
A:中草药水浸液:取中草药碎块或粉末10g，加蒸馏水约100ml 70??水浴，浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。
B:中草药醇浸液::取中草药碎块或粉末10g，加蒸馏水约100ml 70??水浴，浸渍10分钟，过滤，滤液供鉴别用。
各种成分检测
1、生物碱的鉴别
生物碱类成分(除有少数例外)均与多种生物碱沉淀试剂在酸性溶液(水液或稀醇液)
2、苷类的鉴别
,(1)-萘酚试验(Molish)反应
(2)水解反应:
(3)碱性酒石酸铜(斐林试剂Fehling’s test solution)试验
注:中草药对苷的一般鉴别是正反应，还可进一步作个别苷类的鉴定。具体方法如后。
A:蒽苷的鉴别
(1)与碱成盐显色反应(Borntrager反应): (2)园形滤纸层析:
B:黄酮苷的鉴别
? 浓盐酸镁粉
? pbAC2
? 纸片法:
C:强心苷的鉴别
(1)三氯化铁冰醋酸反应(Keller-Kiliani反应)
(2)碱性3.5-二硝基苯甲酸反应(Kedde反应)
(3)亚硝酰铁氰化钠反应(Legal反应)
(4)碱性苦味酸(Baljet反应)
D:皂苷的鉴别
(1)溶血试验:(2)泡沫试验:
(3)醋酐浓硫酸试验(Liebermann-Burchard反应)
(4)氯仿—浓硫酸试验(Salkowski反应) E:香豆素苷的鉴别
(1)内酯化合物的开环与闭环反应:。
(2)肟异羟酯酸铁试验
3、挥发油的定性鉴别
(1))观察其色泽，是否有特殊香气，及辛辣烧灼味感。
(2)挥发性
(3)pH检查
(4)FeCl反应(检酚类): 3
(5)苯肼试验
(6)荧光素试验法: (7)香荚醛——浓硫酸试验: 4、鞣质类化合物的鉴别 (1)感观试验
(2)三氯化铁反应
(3)沉淀蛋白反应
(4)生物碱反应
(二) 银杏黄酮提取与测定 (1)银杏黄酮的提取
a) 材料处理
b) 回流提取
c) 抽滤、定容
d) UV测定
(2)银杏黄酮的测定
e) 标准曲线配置
f) 标准曲线制作
g) 未知夜中黄酮测定
四、实验结果与讨论
浙公网安备 33021202002483