临床免疫学检验
教案
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课程名称 临床免疫学检验 年级 级 专业、层次 检验本科
授课教师 职称 课 型(大、小) 大班理论课 学时 2学时 授课题目(章、节) 第十一章 生物素-亲合素放大技术
基本教材或主要参考书 王兰兰，主编.《临床免疫学与检验》北京:人民卫生出版社 第 次课 授课时间: 2007.9-12
教学目的与要求:
目的:
掌握生物素(亲合素放大系统的基本类型和原理。
要求:
1.掌握生物素-亲合素放大系统的基本类型和原理。
2.熟悉:生物素亲合素放大系统的特点，生物素-亲合素在酶免疫、荧光免疫、放射免疫 分析、分子生防学分析技术中的应用。
3.了解:生物素、亲合素、链酶亲合素的理化性质与标记特性。
内容与时间安排，教学方法:
内容:
生物素(biotin)、亲合素(avidin)是一对具有高度亲合力的物质，它们的结合迅速、专一、稳定并具有多级放大效应。生物素一亲合素系统(biotin-撕din system，BAS)即是以生物素和亲合素具有的独特相互识别和结合特性为基础而发展的一种灵敏、特异和稳定的实验技术。BAS与免疫标记技术的有机结合，极大地提高了免疫测定技术的灵敏度。时间
安排:2.0学时
教学方法:CAI讲授结合板书
教学重点、难点:
重点:
1(生物素-亲合素放大系统的基本类型和原理。
2(生物素亲合素放大系统的特点
难点:生物素-亲合素在酶免疫、荧光免疫、放射免疫分析、分子生防学分析技术中的应用。 教研室审阅意见:
教研室主任签名:
基本内容 手段 课堂设计和时间分配
简图 讲解生物素的理化性质与标记 20 第一节 生物素的理化性质与标记
简表 min 一、活化生物素
示意 二、活化生物素标记蛋白质
图
设问
讨论 讲解亲合素、链霉亲合素的理化性质与第二节 亲合素、链霉亲合素的理化性质
标记 15 min 与标记
一、理化特性 二、亲合素(或链酶亲合素)的标记 讲解生物素-亲合素系统的特点 20 第三节 生物素-亲合素系统的特点
min 一、灵敏度 二、特异性
三、稳定性 四、适用性
五、其他
讲解生物素-亲合素系统的应用 第四节 生物素-亲合素系统的应用 15 min
一、生物素-亲合素系统基本类型及原理 二、生物素-亲合素系统在酶免疫测定中
的应用
三、生物素-亲合素系统在荧光免疫技术
中的应用
四、生物素-亲合素系统在放射免疫测定
中的应用
五、生物素-亲合素系统在分子生物学中
的应用
5 min
思考题
小结
生物素—亲合素(链霉亲合素)系统具有的多级放大独特效应，可极大地提高
分析测定的灵敏度;二者之间的高亲和、高特异结合以及既可偶联生物大分子，
又可连接标记材料的特性，使该系统在标记免疫分析技术领域中的应用具有很强
的稳定性和适用性。该系统有二种基本类型:以游离亲合素为中间物，分别连接
包含生物素化大分子的待检反应体系和标记生物素的BAB法或ABC技术;另一类
小 结 是直接用标记亲合素连接生物素化大分子反应体系进行检测的BA法或LAB。
在生物素—亲合素(链霉亲合素)放大系统应用中，无论采用酶、荧光素或
发光物作为检测示踪剂，均是待测抗原与生物素化抗体反应形成复合物后，再利
用生物素与亲合素间的多价放大结合特性，或直接与标有示踪剂的生物素结合
(BA、LAB法)，或依次与亲合素(链霉亲合素)、生物素示踪标记物反应连接成聚
合物(BAB、ABC法)，最终使待测反应信号被放大，提高检测方法的灵敏度。
1. 生物素的分子结构特点是什么,
2. 生物素通过什么结构、形式与生物大分子相连结,
3. 亲合素或链霉亲合素的分子结构、理化性质有何特点, 复习思4. 为什么亲合素、链霉亲合素具有“桥联”作用,
考题、5. 亲合素、链霉亲合素可以被哪些示踪剂标记,
作业题 6. 为什么生物素,亲合素系统具有放大作用,
7. 生物素与亲合素或链霉亲合素的结合是否与抗原抗体结合相同,
8. 生物素,亲合素系统放大的是反应过程还是单一检测信号的能量,
9. 生物素、亲合素或链霉亲合素如何与标记免疫技术联接,
10.如何将生物素,链霉亲合素放大系统用于所有双位点ELISA?
固相膜免疫测定的概念
常用固相膜免疫测定技术
下次课 免疫金标记技术的特点和原理
预 习
要 点
教学实施顺利、圆满完成。
实 施
情况及
分 析
浙公网安备 33021202002483