几种溶液(PBS、TBS、Citrate buffer、Trypsin、Pepsin、AEC、Blotto A)的配制方法几种溶液（PBS、TBS、Citratebuffer、Trypsin、Pepsin、AEC、BlottoA）的配制方法1、PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。2、TBS:Tris缓冲液配方:(0.5MpH7.6)Tris(三羟甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris加入HCl后，用HCl(1N)或NaOH...
几种溶液（PBS、TBS、Citratebuffer、Trypsin、Pepsin、AEC、BlottoA）的配制方法1、PBS:取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。2、TBS:Tris缓冲液配方:(0.5MpH7.6)Tris(三羟甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris加入HCl后，用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6,最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液，4C冰箱中保存。TBS配方：Tris-HCI缓冲液(0.5MpH7.6)100mlNaCI8.5~9g(0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。3、枸橼酸盐缓冲液(Citratebuffer):3.1储存液：0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸(C6H8O7H20)溶于1000ml蒸馏水中。0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O72H20)溶于1000ml蒸馏水中。3.2工作液：取9mlA液和41mlB液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶(Trypsin)：ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释)，则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml0.05%或0.1%pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。5、胃酶(Pepsin)：4%胃蛋白酶，用0.1mol/LHCL配制。6、DAB:6.1ZLI-9032/9033DABKit:使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中，即可获得1mlDAB工作液，简单易用。6.1ZLI-9030DAB:6mgDAB溶于lOmITBS（0.05MpH7.6），再加入0.1ml浓度为3%的H2O2，过滤掉沉淀物，即可。7、AEC:4mgAEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液（pH5.2），然后加入0.15ml3%H2O2，过滤掉沉淀物。8RIPA:1xPBS,1%NP40,0.5sodiumdeoxycholate,0.1%SDS（此液体可长期保存）。以下抑制剂以储存液方式保存，临用前加入RIPA中。10mg/mlPMSF异丙醇溶液（用量为10ml/ml）Aprotinin（Sigma产品，用量为30ml/ml）1000mMsodiumorthovanadate冷冻液（用量为10ml/ml）9、BlottoA:常规使用1xPBS,5%milk,0.05%Tween20。10、BlottoB:与Phosphotyrosine抗体共用，1xPBS,1%milk,0.05%Tween20。部分实验中milk可完全去除，但可能引起背景增高。
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