收稿日期: 2006- 08- 20
基金项目:科技部科技型中小企业技术创新基金项目 (立项
代码: 03C2621450066 )和广西科学研究与技术开发计划项目 (合
同编号:桂科攻 02104001)。
作者简介: 覃国森, 1962年生,男, 广西玉林人, 硕士, 副教
授,主要从事动物养殖研发工作。
3种常用药物对菲牛蛭的急性毒性试验
覃国森 1,周维官 2,周维海 3,覃 壬 3,丘 毅 3
( 1广西农业职业技术学院, 南宁 530004; 2广西科学院生物研究所,南宁 530003;
3广西南宁市科康生物科技公司 530022)
摘要: 高锰酸钾 24 h半致死浓度 LC50为 7. 67 m g /L, 安全浓度 SC为 0. 54 m g /L; 强氯精 24 h半致死浓度
LC50为 19. 00 mg /L,安全浓度 SC为 0. 97 m g /L;生石灰 24 h半致死浓度 LC50为 83. 00 mg /L,安全浓度 SC为
6. 00 mg /L。3种试验药物毒性强弱为高锰酸钾 >强氯精 >生石灰,安全浓度大小为生石灰 >强氯精 >高锰
酸钾。根据试验结果,
建议
关于小区增设电动车充电建议给教师的建议PDF智慧城市建议书pdf给教师的36条建议下载税则修订调整建议表下载
高锰酸钾不宜作为菲牛蛭的防治药物, 生石灰由于品质和浓度配置不易掌握而存
在风险应慎用, 强氯精可以作为防治菲牛蛭疾病的有效药物。
关键词: 菲牛蛭;药物; 毒性试验;安全浓度;半致死浓度
中图分类号: S948, Q959. 194 文献标识码: A 文章编号: 1003- 1278( 2007) 05- 0099- 03
菲牛蛭 (H irud inar ia manillensis, 俗称金边蚂蟥 ), 隶属
于环节动物门、蛭纲、无吻蛭目、医蛭科、牛蛭属, 以吸吮
人和脊椎动物如牛、青蛙等的血液为生,是吸血水蛭中个
体较大的品种, 生活在水田、水沟、江河、池塘和湖泊中,
主要分布于华南的广西和广东等省区。科学研究
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
明,
菲牛蛭的抗凝血酶活性即药理作用明显强于目前中药材
市场上通常使用的非吸血水蛭的宽体金线蛭 (Whitm an
p ig raW h itm an) [ 1, 2], 并已证实吸血水蛭的抗凝血酶活性
成分主要是天然水蛭素 ( H irud in), 非吸血水蛭的抗凝酶
活性成分不含天然水蛭素 [ 3, 4] ,而天然水蛭素是迄今世界
上所发现的最强天然抗凝血酶物质, 其抗凝和溶栓作用
优于传统的抗凝药物 ) ) ) 肝素 [ 5, 6]。近年来国内已有很
多单位投入巨资从事天然水蛭素的研发, 从而也促进了
华南地区菲牛蛭养殖业的发展。目前, 在广西菲牛蛭活
体售价高达 200元 /kg, 是宽体金线蛭活体 25元 /kg的 8
倍。
为使菲牛蛭养殖业能健康发展, 疾病防治是一项重
要研究内容, 药物毒性试验是其中之一,而常用药物对菲
牛蛭的急性毒性试验在国内外尚未见有报道。本文用高
锰酸钾等 3种常用药物对菲牛蛭进行急性毒性试验, 以
求各自的半致死浓度和安全浓度, 为菲牛蛭的疾病防治
提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 试验菲牛蛭
试验用菲牛蛭为南宁市科康生物科技公司养殖基地
人工繁育的 4月龄菲牛蛭, 选择体质健壮、规格基本一致
的个体, 平均体质量 1 g /条左右。试验前将菲牛蛭放在塑
料盆内暂养 3 d以适应试验环境,期间不投料。
1. 2 试验药物
高锰酸钾 ( KMnO4 )为化工原料用品, 质量分数为
9913% ,由中美合资云南群星化工有限公司生产; 强氯精
(三氯异氰脲酸,简称 TCCA )为生产制品, 有效氯质量分
数 85. 0% , 由南宁化工股份有限公司生产; 生石灰 ( CaO )
为生产制品, 市售优质品。
1. 3 试验条件
试验时间为 2005年 5~ 6月, 每个周期为 4 d。试验
用水为经曝气 24 h的自来水, 水温 22~ 26e , pH 值 6. 9
~ 7. 3,溶解氧 6. 1~ 7. 3 m g /L。试验容器为塑料桶 ,每桶
放药液 10 L, 放菲牛蛭 10条 (将菲牛蛭装入 100目的网袋
内并用线扎紧, 然后放入水中, 以防菲牛蛭爬上桶壁离水
而影响试验结果的准确性 )。试验期间不投料。
1. 4 试验方法
参照卢玲等 [ 7]、王明学等 [ 8]方法。首先选择适当浓
度比例进行预备试验, 然后根据结果确定试验所需的药
物浓度范围。每种药物设 5个浓度组和 1个空白对照组,
每组设 2个平行试验, 求其平均值。试验用的高锰酸钾
和强氯精先配成母液,再按
要求
对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗
稀释至所需的浓度, 现配
现用。生石灰先化为 10%石灰乳后再按要求稀释至所需
的浓度, 现配现用。试验期间不换药液,观察
记录
混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载
菲牛蛭
反应和死亡情况。
1. 5 数据处理
采用直线内插法求出半致死浓度和安全浓度, 依安
全浓度的高低来排列菲牛蛭对 3种药物的敏感性顺序。
LC50 = C 1+ ( C2 - C1 ) ( 50% - P 1 ) /( P2 - P1 )
( 1)
SC = 0. 1 @ 96 h LC50 ( 2)
式中: LC50) 半致死浓度: C1、C2) 死亡率近 50%的
低端和高端药液浓度; P 1、P2 ) 死亡率近 50% 的低端和高
端死亡率; SC) 安全浓度。
2 结果
3种药物对菲牛蛭的急性毒性试验结果如表 1。
2. 1 高锰酸钾
#99#2007年第 27卷第 5期 水 利 渔 业 (总第 153期 )
当高锰酸钾质量浓度为 8. 0 m g /L时, 2 h后出现中
毒症状, 菲牛蛭行动缓慢, 反应迟纯, 身体伸展,陆续分泌
粘液; 3. 5 h后开始死菲牛蛭, 死亡的菲牛蛭身体略弯曲,
略硬, 24 h死亡率 100% ;当质量浓度为 7. 3 mg /L时, 4 h
后开始死菲牛蛭, 24 h死亡率 40% , 48 h死亡率 70% , 96
h死亡率 100% ; 当质量浓度为 6. 2 m g /L时, 8 h后开始死
菲牛蛭, 24 h死亡率 10% , 48 h死亡率 50% , 96 h死亡率
90% ; 当质量浓度为 5. 0 m g /L时, 16 h后开始死菲牛蛭,
24 h死亡率 10% , 48 h死亡率 20% , 96 h死亡率 30% ;当
质量浓度为 4. 0 mg /L时, 菲牛蛭行动正常, 至 96 h死亡
率仍为 0。
表 1 3种药物对菲牛蛭的急性毒性试验 *
试验药物 质量浓度 /
m g# L- 1
死亡率 /% LC50 /m g# L- 1
24 h 48 h 96 h 24 h 48 h 96 h
安全浓度 /
m g# L- 1
高锰酸钾
4. 0
5. 0
6. 2
7. 3
8. 0
0
10
10
40
100
0
20
50
70
100
0
30
90
100
100
7. 67 6. 20 5. 40 0. 54
强氯精
8. 0
10. 0
15. 0
17. 0
20. 0
0
30
30
40
100
0
50
60
80
100
0
60
80
100
100
19. 00 10. 00 9. 67 0. 97
生石灰
50. 0
60. 0
70. 0
83. 0
90. 0
0
30
30
50
100
0
40
50
70
100
0
50
60
90
100
83. 00 70. 00 60. 00 6. 00
* 整个试验过程空白对照组没出现菲牛蛭死亡现象,即死亡率为 0.
2. 2 强氯精
当强氯精质量浓度为 20. 0 mg /L时, 3 h后出现中毒
症状, 菲牛蛭身体稍收缩,在盆底静止不动, 4 h后开始死
菲牛蛭, 死亡的菲牛蛭体色无变化, 24 h死亡率 100% ;当
质量浓度为 17. 0 m g /L时 , 4 h后开始死菲牛蛭, 24 h死亡
率 40% , 48 h死亡率 80% , 96 h死亡率 100% ; 当质量浓
度为 15. 0 mg /L时, 9 h后开始死菲牛蛭, 24 h死亡率
30% , 48 h死亡率 60% , 96 h死亡率 80% ; 当质量浓度为
10. 0 mg /L时, 14 h后开始死菲牛蛭, 24h死亡率 30% , 48
h死亡率 50% , 96h死亡率 60% ; 当质量浓度为 8. 0 m g /L
时, 菲牛蛭行动正常,至 96h死亡率仍为 0。
2. 3 生石灰
当生石灰质量浓度为 90. 0 mg /L ( pH 8. 85)时, 2 h后
出现中毒症状, 菲牛蛭行动缓慢, 反应迟钝, 分泌粘液 ,体
表有少量瘀血, 3 h后开始死菲牛蛭, 24 h死亡率 100% ;
当质量浓度为 83. 0 mg /L ( pH 8. 80)时, 6 h后开始死菲牛
蛭, 24 h死亡率 50% , 48 h死亡率 70% , 96 h 死亡率
90% ; 当质量浓度为 70. 0 m g /L( pH 8. 77)时 , 10 h后开始
死菲牛蛭, 24 h死亡率 30% , 48 h死亡率 50% , 96h死亡
率 60% ;当质量浓度为 60. 0 m g /L ( pH 8. 72)时, 14 h后开
始死菲牛蛭, 24 h死亡率 30% , 48h死亡率 40% , 96h死亡
率 50% ;当质量浓度为 50. 0 m g /L ( pH 8. 68)时,刚开始时
菲牛蛭在溶液中缓慢游动, 4h后菲牛蛭恢复正常活动,至
96 h死亡率仍为 0。
3 讨论
3. 1 菲牛蛭对 3种药物的敏感性
3种试验药物对菲牛蛭的敏感性大小可用半致死浓
度 LC50衡量, LC50越小, 敏感性越大,毒性越强。若将试验
药物对菲牛蛭 24 h的 LC50依大小排列, 其敏感性大小依
次为: 高锰酸钾 >强氯精 >生石灰。 3种试验药物对菲牛
蛭的安全浓度 SC大小依次为: 生石灰 >强氯精 >高锰酸
钾, 与菲牛蛭对 3种药物的敏感性相一致。因此, 建议高
锰酸钾不宜作为菲牛蛭的防治药物, 生石灰由于品质和
浓度配置不易掌握而存在风险应慎用, 强氯精可以作为
防治菲牛蛭疾病的有效药物。
3. 2 3种药物的适用性
3. 2. 1 高锰酸钾 高锰酸钾是一种强氧化剂,溶水后产
生新生态氧, 与有机物接触后发生氧化作用以及与蛋白
质结合产生收敛作用以杀灭活性菌体, 本身还原为二氧
化锰, 生产上常用于防治鱼、虾等细菌、真菌和寄生虫类
疾病及设施、工具的消毒, 常用剂量为 2~ 5 m g /L[ 9]。本
次试验高锰酸钾的 24 h LC50为 7. 67 m g /L, 48 h LC50为
61 20 m g /L, 96 h LC
50
为 5. 40 mg /L。高锰酸钾安全浓度
SC为 0. 54 mg /L, 小于生产常用剂量, 仅为常用剂量的
10% ~ 27% ,不宜作为菲牛蛭疾病防治的药物。
3. 2. 2 强氯精 强氯精的化学名称为三氯异氰脲酸,是
所有含氯药剂中含有效氯最高的一种, 其有效氯质量分
数一般都在 85%以上。产品纯度高,水解最终产物是氯、
水和二氧化碳, 使用后无不溶解物。含氯药剂释放出的
氯、氯在水中形成的次氯酸 ( HOC l)、次氯酸形成的新生态
氧, 三者都能将菌体蛋白氧化变性, 改变膜通透性, 干扰
酶系统生理生化及影响 DNA合成等过程, 使病原菌迅速
死亡。含氯药剂溶于水中 ,产生的次氯酸愈多,杀菌力愈
强, 经多年的实验和广泛应用证明, 对养殖水体消毒及鱼
类传染病的防治有很好的效果, 水体消毒质量浓度一般
#100# (总第 153期 ) 水 利 渔 业 2007年第 27卷第 5期
为 0. 2~ 0. 4 m g /L。本次试验强氯精的 24 h LC50为 19. 00
m g /L, 48 h LC50为 10. 00 m g /L, 96 h LC50为 9. 67 mg /L。
强氯精安全浓度 SC为 0. 97 m g /L, 大于水体消毒浓度,可
作为菲牛蛭疾病防治药物, 推荐以 8 m g /L为浸洗药物,
时间以 10~ 15 m in为宜。
3. 2. 3 生石灰 生石灰的杀菌作用在于氧化钙与水生
成氢氧化钙, 氢氧化钙再解离生成的氢氧根离子, 提高了
水体的 pH 值 ( pH8. 5以上 ) ,过碱的环境使病原体和其它
有害生物不能生存而死亡, 以达消毒目的。本次试验生
石灰的 24 h LC
50
为 83. 00 mg /L, 48 h LC
50
为 70. 00 mg /L,
96 h LC50为 60. 00 m g /L, 安全浓度 SC为 0. 54 mg /L。杨
潼 [ 10]认为施用生石灰可消灭吸血水蛭, 但水的 pH 值不
能低于 8. 6。而在本试验过程中, 分别采用 pH 自动测定
仪测定了 5组溶液中的 pH 值, 均在 8. 6以上, 即使是这
样, 当生石灰质量浓度为 50. 0 m g /L ( pH 8. 68)时, 96h后
菲牛蛭的死亡率仍为 0, 这有待今后进一步探讨。值得注
意的是, 生石灰虽然取材容易, 但其品质差异较大, 且准
确配制所需要的药液浓度较为困难, 因此生产上用于菲
牛蛭疾病防治的风险较大,应慎用。
3. 3 药物使用的影响因素
在使用 3种药物过程中, 除了本试验所反映的浓度、
接触时间外, 还受水的 pH、水温、水的浑浊度和有机质含
量等因素影响。次氯酸 ( HOC l)是弱电解质, 其离解程度
取决于水温和水的 pH, 而次氯酸 ( HOC l)的杀菌效率比次
氯酸离子 ( OC l- )高约 80倍。用含氯药剂消毒水体时,水
温每提高 10e , 病菌杀灭率约提高 2~ 3倍。水的浑浊度
高, 悬浮物质较多, 细菌多附着在这些悬浮颗粒上, 则氯
的作用达不到细菌本身, 使杀菌效果降低。大量有机物
对高锰酸钾有快速衰减作用 [ 11] ,使用强氯精、漂白粉在有
机质含量丰富的水体中应加大剂量 [12]。因此, 建议在使
用上述药物防治菲牛蛭疾病时须根据环境条件的变化适
当调整药液的浓度,以防不测。
参考文献:
[ 1] 欧兴长, 等.四种水蛭抗凝血酶作用的研究 [ J]. 天
然产物研究与开发, 1996, 8( 2): 54~ 56.
[ 2] 李文, 等. 七种水蛭抗血小板聚集与抗凝血研究
[ J]. 中药药理与临床, 1997, 13( 5): 32~ 34.
[ 3] 刘君, 等.对不同食性的水蛭药效价值的探讨 [ J] .
中医药学刊 , 2005, 23( 4) : 705~ 706.
[ 4] 张汉贞, 等. 不同食性的水蛭抗凝血酶活性的比较
[ J] .中药材, 1998, 21( 12): 599~ 600.
[ 5] 赵恒利, 等. 水蛭素基础及临床研究发展状况 [ J] .
中国药学杂志, 2006, 41( 5): 321~ 324.
[ 6] 陈华友, 黄静,蒋芝君, 等. 抗凝良药水蛭素的研究
进展 [ J] .生物学通报, 2003, 38( 3): 3~ 5.
[ 7] 卢玲, 宋福.鱼类急性毒性试验 [ J]. 生物学通报,
2002, 37( 7): 52~ 53.
[ 8] 王明学, 周志刚, 徐永福. 鱼类急性毒性试验基本
要求探讨 [ J] .内陆水产, 1998, 37( 9): 26~ 27.
[ 9] 黄志斌, 胡红.水产药物应用表解 [M ] . 南京 :江苏
科学技术出版社, 2001. 31~ 65.
[ 10] 杨潼.中国动物志 环节动物门 蛭纲 [ M ]. 北京:
科学出版社, 1996. 33.
[ 11] 黄鹤忠,梁守二, 吴康, 等. 3种药物对河蟹幼体的
毒性试验 [ J] . 水利渔业, 1998, ( 6): 15~ 16.
[ 12] 黄辉,沈忠明, 蒲德成, 等.大鳍鳠对 8种常用水产
药物的敏感性试验 [ J] . 水利渔业, 2005, 25( 4):
102~ 104.
(责任编辑 张俊友 )
(上接第 52页 )
2. 6 加强看护,定点垂钓
闪电河水库渔业增殖综合开发, 市、县两级共安排渔
政管理人员 5名, 累计处理偷捕鱼事件 43起, 罚没款共
71 46万元, 有力地保护了库区的正常生产。为了方便垂
钓爱好者钓鱼, 在库区东南岸划定约 1 500 m的专属垂钓
区。其它任何地方不得垂钓, 否则按偷盗鱼处理。
3 效益
5坝上大水面渔业综合增殖6项目, 原始投入资金 90
万元 (市县两级水产部门及相关技术人员出资 15万元,
个体户李冒财出资 75万元, 双方约定按利润 3 B 7分
成 )。2003年底已收回全部投资。 2004和 2005年, 共计
盈余 346. 6万元,投入产出比约 1 B 1. 92。闪电河水库渔
业综合增殖已经走上了一条健康稳定发展的道路。
4 讨论与
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
4. 1 初级生产者的生产与保护
水生维管束植物和浮游植物是水域太阳能的固定
者, 是多种鱼直接利用的天然饵料, 也是水中溶氧的制造
者, 其生产量的大小,往往决定渔业自然产量的丰歉。保
护种植水生植物, 是大水面渔业综合增殖的基础。大水
库水面禁放、限放草鱼种, 不仅有利于水环境的稳定, 也
有利于大水面渔业的增殖。
4. 2 精养与粗放相结合
网箱培育大规格鱼种,其鱼种生产的费用相应降低,
运输不便与运输成本高的难题得到解决。鱼种投放大水
面后, 利用其在网箱培育过程中形成的摄食习惯, 对大水
面鱼类补饲全价配合料,既解决了饵料资源不足的问题,
又适当提高了成鱼生长速度, 同时生产的成鱼具有水库
鱼的鲜美味道。精养与粗放相结合, 既利用了大水面优
越的非生物环境 ,又利用了网箱高产养殖技术,是今后大
水面渔业增殖的一条新途径。
(责任编辑 张俊友 )
#101#2007年第 27卷第 5期 水 利 渔 业 (总第 153期 )