煎煮时间及甘草配伍剂量对附子中酯型生物碱含量的影响

煎煮时间及甘草配伍剂量对附子中酯型生物碱含量的影响　　【摘要】目的研究煎煮时间及甘草剂量对附子中酯型生物碱含量的影响。要领接纳紫外分光光度法测定附子中的酯型生物总碱含量；接纳高效液相法比力乌头碱和次乌头碱的含量。效果酯型生物碱含量的低落，与煎煮时间和甘草剂量有较高的相干性；煎煮时间凌驾30in，100g制附子煎煮液所含的乌头碱和次乌头碱含量低于2g/l。结论大剂量附子用药必需通过公正煎煮和配伍以低落毒性，发挥其专长。　　【关键词】附子煎煮时间甘草生物碱　　Abstrat:bjetiveTstudytheeffetnester-typealkalidsinRadixAnitiLaterlisPreparatabydifferentdetingtieandpatibilitydsagefRadixGlyyrrhizae.ethdsTdeterinethententfester-typealkalidsithultraviletspetrphtetry(UV).TdeterinethententsfanitineandhypanitineHighPerfraneLiquidhratgra(HPL).ResultsThereashigherrrelatinbeteenthententsfester-typealkalidsanddetingtie,rpatibilitydsagefRadixGlyyrrhizae.henthedetingtieasver30in,thententsfanitineandhypanitineerelerthan2g/linthedetinithadsagef100g.nlusinInrdertdereasethetxi,andreduethespeialtyfRadixanitilaterlispreparataithalargedsage,thereasnabledetingtieandpatibilityareiperative.　　Keyrds:RadixAnitiLaterlisPreparata;Detingtie;RadixGlyyrrhizae;patibility；Alkalids　　附子为毛莨科植物乌头AnituarihaeliDebz的子根加工品［1］，是中药首选的温里药，具有温经止痛、温中散寒、回阳救逆、温阳扶正等成果，实用于阳虚阴盛，急危厥脱症，与别的中药机动配伍利用，可治疗多种疾玻?中国药典?附子饮片划定剂量为3～15g。但附子之大剂量应用古已有之，唐代?令媛要方?就有纪录用附子达4两者〔合今约130g〕，当代一些名老中医也擅长用大剂量附子在临床获得明显疗效［2］。但同时，不少医家因畏其毒性不敢应用，或用之不妥反致中毒。　　当代研究表白［3］附子含多种化学身分，其重要有用身分为生物碱类，毒性身分重要为二萜类双酯型生物碱，如乌头碱、新乌头碱、次乌头碱。经炮制加工后此中酯型生物碱被部门撤除或水解，而毒性低的乌头原碱含量那么增长。因附子为毒性中药，纵然颠末炮制，大剂量应用仍存在必然风险。临床用药一样平常通过长时间煎煮和配伍用药减低附子毒性，此中与甘草配伍较为普及，但随着毒性减低，药理活性亦随之递减。因此，怎样通过公正煎煮和配伍以低落毒性，并最大限度地发挥其专长，有紧张的临床意义。　　本研究通过接纳紫外分光光度法测定附子中的酯型生物碱含量，研究煎煮时间及甘草剂量与附子中酯型生物碱含量的相干性。同时，参照?中国药典?［1］〔Ⅰ部〕正文附子项下乌头碱限量检测要领，接纳高效液相法比力差异煎煮时间大剂量附子提取液中乌头碱和次乌头碱含量，从附子大剂量用药的宁静和有用角度，开端为临床用药提供根据。　　1仪器与质料　　1.1仪器aters高效液相色谱仪〔996二极管阵列检测器、600泵、2022数据处置惩罚软件〕；紫外-可见光分光光度仪(美国发玛西亚公司,B20-RADUV/V4000型)；薄膜旋转蒸发仪〔上海申科仪器装备厂〕。　　1.2质料和试剂制附子、甘草购自本院药学部，为?中国药典?〔Ⅰ部〕收载品种。乌头碱〔批号0720-9807〕、次乌头碱〔批号798-9403〕购自北京生物成品检定所。所用试剂为色谱纯或阐发纯。　　2要领与效果　　2.1酯型生物总碱的含量测定［4］　　尺度溶液配制：细密称取乌头碱尺度品5.1g，加1l·L-1Hl溶液4滴溶解，加纯水稀释，加1l·L-1NaH水溶液4滴，混匀，定容至10l，备用。测定波长选择：细密量取乌头碱尺度品溶液0.10l，置于60l分液漏斗中，加水2.90l，再参加醋酸-醋酸钠缓冲液〔pH=6.0〕5.0l，溴麝香草酚蓝指示液2.0l，末了细密参加10.0l氯仿，振摇3in，静置1h，氯仿层用脱脂棉过滤，弃初滤液，网络续滤液。以不含乌头碱的试剂空缺同法操纵作参比，于400～700n波长之间举行扫描，测得最大汲取波长为410n。　　尺度曲线制备：别离量取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2l乌头碱尺度品溶液，加纯水至3.0l，按前“测定波长选择〞项下要领操纵，于410n处测定汲取度，盘算回归方程为：Y=2.6688X-0.3755，r=0.9975，线性范畴1.02～6.12g。　　制附子单煎供试样品的制备：取制附子粗粉100g共4份，别离加水煎煮30，60，90，100，120in，煎煮液用脱脂棉过滤，滤液用旋转蒸发仪于75℃摆布在水浴上浓缩至100l。量取煎煮液20.0l，用氯仿萃取5次，10l/次，归并氯仿液，蒸干后按前“制附子原药〔不煎煮〕供试样品的制备〞项下要领操纵，得供试样品。附子与甘草合煎供试样品的制备：取制附子粗粉120g共6份,别离与甘草12，20，40，60，80，120g配伍，合煎60in，煎煮液按前“制附子单煎供试样品的制备〞项下要领浓缩至120l，并同法操纵，得供试样品。　　供试样品含量测定:别离量取各供试样品2.0l，加纯水至3.0l，按前“测定波长选择〞项下要领操纵，于410n处测定汲取度，并盘算生物碱含量。效果见表1～2。表1煎煮时间对制附子中酯型生物碱含量的影响〔略〕表2甘草配伍剂量对制附子中酯型生物碱含量的影响〔略〕　　相干性阐发：别离以时间-生物碱含量〔制附子∶甘草〕配比-生物碱含量数据举行线性回归数据阐发。效果见图1～2。　　由图1～2可见，随着煎煮时间延伸和甘草剂量增长，附子中酯型生物总碱呈落落趋势，且酯型生物总碱含量与煎煮时间和甘草剂量有较高的相干性，r0.9〔图1，r=0.9679；图2，r=0.9738〕。　　2.2样品中乌头碱与次乌头碱含量的比力　　尺度品溶液配制:取乌头碱、次乌头碱尺度品，用10%甲醇溶解并定容为2g/l的溶液，备用。　　供试品溶液制备:制附子原药供试品溶液按?中国药典?［1］〔Ⅰ部〕正文附子项下乌头碱限量查抄供试品制备要领操纵制备：取制附子粗粉20.0g，置具塞锥形瓶中，加乙醚150l，振摇30in，安排1～2h，分取醚层，蒸干，用10%甲醇溶解并定容至2l，备用。另取制附子单煎30，60in的药液100l〔相称于100g饮片〕，60℃浓缩至50l，用乙醚萃取4次，50l/次，分取醚层，蒸干用10%甲醇溶解并定容至2l，备用。　　由表4可见，100g制附子煎煮≥30in，其煎煮液所含的乌头碱和次乌头碱含量低于2g/l，也低于20g制附子饮片原药的乌头碱和次乌头碱含量。　　3结论　　以上研究表白，增长制附子煎煮时间或增长甘草的配伍剂量，可水解或撤除具有毒副作用的乌头碱、次乌头碱等二萜类双酯型生物碱，低落毒性。酯型生物碱总含量的低落，与煎煮时间和甘草剂量有较高的相干性。由于酯型生物碱同时为药效身分，因此，在低落毒性包管宁静的同时，应留意淘汰有用身分的丧失，包管药效。本实行效果表白，100g制附子煎煮≥30in，其煎煮液所含的乌头碱和次乌头碱含量低于2g/l，也低于20g制附子饮片原药的乌头碱和次乌头碱含量〔如今?中国药典?Ⅰ部正文中附子乌头碱限量查抄中乌头碱比较品浓度为2g/l，附子饮片检测取样量为20g〕。从临床用药的宁静和有用角度思量，在附子饮片质量切合?中国药典?质量检测划定的条件下，附子大剂量用药剂量不凌驾100g时，发起煎煮时间为60in，并可按照临床必要选择甘草配伍剂量。　　【参考文献】［1］国度药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学产业出书社,2022：132.［2］罗国昌，张瑞贤.近20年附子超大剂量应用外表［J］.中国中药杂志，2022，30〔2〕：96.［3］阴健，郭力弓．中药当代研究与临床应用［］.北京：学苑出书社，1994：382.［4］丘小惠.活性炭对乌头类生物碱的吸附作用［J］.广州中医药大学学报，1997，14〔4〕：268.