PI单染流式细胞术检测细胞周期PI单染流式细胞术检测细胞周期
1.消化：将细胞用不含EDTA的胰蛋白酶消化1-3min，（时间尽可能长，以减少吸管吹打），待消化充分，弃去胰酶，加入PBS5ml。
2.收集细胞：吸管吹打，移入离心管。
3.低速度离心：1000转5min弃去上清。
4.反复漂洗离心：加入PBS5-8ml，低速离心，同上步，重复3次，以除去细胞碎片。
5.获得单细胞悬液：加入1mlPBS，调整单细胞悬液至1-5*10^6/l，吸管吹打，制成单细胞悬液，4度保存。
6.PI染液制备：100ml去离子水加入5mgPI。调PH值7,2-7...
PI单染流式细胞术检测细胞周期
1.消化：将细胞用不含EDTA的胰蛋白酶消化1-3min，（时间尽可能长，以减少吸管吹打），待消化充分，弃去胰酶，加入PBS5ml。
2.收集细胞：吸管吹打，移入离心管。
3.低速度离心：1000转5min弃去上清。
4.反复漂洗离心：加入PBS5-8ml，低速离心，同上步，重复3次，以除去细胞碎片。
5.获得单细胞悬液：加入1mlPBS，调整单细胞悬液至1-5*10^6/l，吸管吹打，制成单细胞悬液，4度保存。
6.PI染液制备：100ml去离子水加入5mgPI。调PH值7,2-7。4度棕色瓶保存。4度避光保存。
7.、加入-20度预冷的乙醇。4度过夜。
8.1000转5分钟离心弃去上清，
9.加入3mlPbs重悬。
10.1000转5分钟离心弃去上清，
11.加入100ulRNA酶37度水浴孵育30min
12.加入500ulPI染液4度避光孵育30min
13.上机前轻弹试管，，设立PI单染细胞组，检测。
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