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病理组织常用固定液的配制

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病理组织常用固定液的配制病理组织常用固定液的配制(免疫组化)一、常规固定液的配制(1)10%甲醛液浓甲醛?10ml蒸馏水?90ml(2)缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液(Ph7.2)90ml?(3)10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4)Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75ml甲醛2ml冰醋酸5ml该固定液中的冰醋酸,对胶原纤维等组织有膨胀作用,而甲醛对组织有收缩作用,两种试剂的混合使用,用以抵消彼此间的副作用,使组织固定达到优良的固定水平。(5)醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙...

病理组织常用固定液的配制
病理组织常用固定液的配制(免疫组化)一、常规固定液的配制(1)10%甲醛液浓甲醛?10ml蒸馏水?90ml(2)缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液(Ph7.2)90ml?(3)10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4)Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75ml甲醛2ml冰醋酸5ml该固定液中的冰醋酸,对胶原纤维等组织有膨胀作用,而甲醛对组织有收缩作用,两种试剂的混合使用,用以抵消彼此间的副作用,使组织固定达到优良的固定水平。(5)醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水,后加入甲醛。该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好,组织固定后,做冰冻切片,再给予显示。当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。从免疫组织化学的角度来说,甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测,据多人认为,它对lgA,lgM,J链,K链和λ链的标记效果较好,且背景清晰。但美中不足的是:经它固定的组织,可与蛋白形成醛交联蛋白,这种醛键可封闭抗原。固此,在免疫组化实际检测中,应根据不同的要求和需要,采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ,以便破坏醛键重新暴露抗原。(6)Zenker氏固定液:重铬酸钾 ?25g升汞?   50g蒸馏水 ?1000ml冰醋酸  50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中,尢其是重铬酸钾,应用热水或加温的方法将其溶解,然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中,如暴露于空气中,该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深,导致失效。临用时,取贮存液950ml,加入50ml的冰醋酸,即可使用。应用该固定液固定的组织,一般不要超过24h,取出组织,流水冲冼12小时以上,然后保存于75%-80%的酒精中,在切片染色前,必须用碘除去汞盐的沉着。应用该固定液的组织,细胞核及细胞浆染色十分清晰,特别是要显示骨骼肌的横纹时,应用本液可获得满意的结果,但由于其含有醋酸,故不能用于保存细胞颗粒,红细胞及含铁血黄素。(7)Helly氏液重铬酸钾? 25g升汞?   50g蒸馏水 ?1000ml甲醛?   50ml临用时加入甲醛,因其加入后于24小时后可发生沉淀而失效,因用时应特别注意。该液是白细胞颗粒的优良固定剂,因此凡为白细胞或造血器官如骨髓,脾脏及患先天性梅毒之肝脏等,可用此液固定。此液原配方要求加入硫酸钠,但据我们经验认为,硫酸钠在液中对组织无任何作用,故省去。二、冷冻切片固定液(1)乙醚酒精液无水乙醚1份95%酒精1份(2)酒精—冰醋酸液?95%酒精100ml冰醋酸3~5滴三、细胞学涂片固定液的配制(1)酒精—冰醋酸液95%酒精97ml冰醋酸3ml(2)乙醚--酒精液95%酒精50ml乙醚50ml冰醋酸1ml(3)Carney`s液无水酒精60ml氯仿30ml冰醋酸10ml
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上兵伐谋
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分类:工学
上传时间:2020-06-26
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