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13.CRISPER-cas9突变体鉴定方法

13.CRISPER-cas9突变体鉴定方法13.CRISPER-cas9突变体鉴定方法2014-10-6SEL1酶切鉴定法原理：SEL1酶能识别由于碱基缺失所造成的突环。PCR体系：10xbuffer 2.5uldNTP 2ulp-F 1ulp-R 1ulrTag 0.2ddH2O 18.3总体积 25ul酶切体系：PCR产物 5ulddH2O 4ulSEL1 1ul总体积 10ul程序： 45℃ 15min普通酶切鉴定法原理：Cas9载体设计位点中在PAM附近有相应的酶切位点，若目标基因在设计的位点处发生突变，则P...

13.CRISPER-cas9突变体鉴定方法 2014-10-6SEL1酶切鉴定法原理：SEL1酶能识别由于碱基缺失所造成的突环。PCR体系：10xbuffer 2.5uldNTP 2ulp-F 1ulp-R 1ulrTag 0.2ddH2O 18.3总体积 25ul酶切体系：PCR产物 5ulddH2O 4ulSEL1 1ul总体积 10ul程序： 45℃ 15min普通酶切鉴定法原理：Cas9载体设计位点中在PAM附近有相应的酶切位点，若目标基因在设计的位点处发生突变，则PCR产物用相应的酶来切不起作用即切不开，反之则能切开。PCR体系同上，酶切体系同普通酶切一样。

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