高效液相色谱操作规程

高效液相色谱操作规程高效液相色谱操作规程第一部分：进样前准备工作 1．溶剂 LC的溶剂包括：自己的流动相，超纯水，体积比为1：1的流动相与超纯水的混合溶液。例如，如果你的流动相是甲醇：水＝85：10，那么你需准备的溶剂如下：纯甲醇，超纯水，50％甲醇水混合液。（以下以甲醇为流动相为例） 1．1 过滤使用前，应将纯的甲醇（要求是色谱纯，最好是进口的色谱纯）用0.45µm的滤膜过滤。50％的甲醇水溶液也用过滤过的甲醇和超纯水配。注意：此不操作切不能省，尤其是国产色谱纯。否则，很容易造成色谱柱的堵塞，造成柱压过高，从...

高效液相色谱操作规程第一部分：进样前准备工作 1．溶剂 LC的溶剂包括：自己的流动相，超纯水，体积比为1：1的流动相与超纯水的混合溶液。例如，如果你的流动相是甲醇：水＝85：10，那么你需准备的溶剂如下：纯甲醇，超纯水，50％甲醇水混合液。（以下以甲醇为流动相为例） 1．1 过滤使用前，应将纯的甲醇（要求是色谱纯，最好是进口的色谱纯）用0.45µm的滤膜过滤。50％的甲醇水溶液也用过滤过的甲醇和超纯水配。注意：此不操作切不能省，尤其是国产色谱纯。否则，很容易造成色谱柱的堵塞，造成柱压过高，从而使你的测定工作不能进行。 1．2脱气使用前所有的溶剂都要用超声清洗仪脱气15min. 原因：液相色谱最重要的一点就是整个流路不能有气泡，否则会造成峰分离不好，响应不理想等后果。而使用的溶剂或多或少都会融入空气，所以使用前必须脱气。 2．样品样品包括标样和实际样品。所有样品的最后性状都应是透明的液体。为避免堵塞，样品同样得用0.45µm的滤膜过滤。第二部分:仪器使用 1. 将吸液头放进相应的流动相中.通常标有A的放入纯水中,B泵放进纯有机溶剂中.没有任何标记的吸液头放进50%的有机溶剂水混合液中. 2. 开仪器.开启顺序为:CTO-20A,SIL-20A,SPD-M20A,LC-20AT.等待几秒钟后,开电脑. 3. 点击工作站图标,如图: .之后出现界面 4. 点击出现界面 5. 点击OK.可听到蜂鸣一声,仪器连接正常,进入工作站. 6. 设置方法.点击界面中的高级须更改的参数主要有: 点击数据采集------输入所需的LC停止时间------点击应用于所有的采集时间点击泵-----选择模式里的低压梯度-----设置泵A总流速,溶剂B浓度. 点击柱温箱------设置柱温箱温度. 点击自动排气------选择流动相A,流动相B. 方法设置完成.另存方法文件到自己建立的文件夹里.保存完成后,点击下载(界面右上角). 7. 点击自动排气图标.出现排气界面. 8. 排气完成.点击仪器开关图标,泵开关图标,柱温箱开关图标. 9. 点击绘图.开始走基线.通常需走30分钟,视基线的好坏更改而定.基线不平,则需更长的分析时间.点击更该分析时间图标,输入所须的时间,点击确定. 10. 基线平衡之后,就可以进样.将样品放入样品架.如果是单次进样，就点击单次运行。设置单次运行信息。完成后，点击开始，即开始进样。如果是批处理进样，则点击批处理------点击向导------新建批处理表 ------保存批处理表 -------点击批处理开始，即开始进样。

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