大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)中英文说明书

大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)中英文说明书 大鼠大鼠大鼠大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶抗酒石酸酸性磷酸酶抗酒石 酸酸性磷酸酶抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)酶联免疫酶联免疫 酶联免疫酶联免疫分析分析分析分析 试剂试剂试剂试剂盒使用说 明书盒使用说明书盒使用说 明书盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围检测范围检测范围检测范围:::: 96T 60pg/mL - 1600pg/mL 使用目的使用目的 使用目的使用目本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) 的:::: 含量。 实验原理实验原 理实验原理实验本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)水平。 原理 用纯化的大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被 单抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)，再与HRP标记的抗酒石酸酸性 磷酸酶5b(TRACP5b)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜 色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)呈正相关。用酶标仪在450nm波长 下测定吸光度(OD值)，通过 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线计算样品中大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) 浓度。 试剂盒试剂盒试剂盒 试剂盒组成组成组成1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 组成 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(3200 pg/mL) 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本标本标本标本 要求要求要求要求 1(标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20?保存，但应避免反复冻融 2(不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤操作步 骤操作步骤操作1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 步骤 释。 1600pg/mL 5号标准品 150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液 800pg/mL 4号标准品 150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液 400pg/mL 3号标准品 150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液 200pg/mL 2号标准品 150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液 100pg/mL 1号标准品 150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl， 然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37?温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37?避光显色 10分钟. 10. 终止:每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 操作程序总结操作程序 总结操作程序总结操作 程序总结:::: 计算计算计 算计算 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。 注意事项注意事 项注意事项注意1(试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 事项 用完，板条应装入密封袋中保存。 2(浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3(各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4( 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值 大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5( 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6(底物请避光保存。 7(严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8(所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9(本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 保存条件及有效期保存条 件及有效期保存条件及有1(试剂盒保存:;2-8?。 效期保存条件及有效期 2(有效期:6个月 Rat tartrate-resistant acid phosphatase 5b((((TRACP5b)))) FOR RESEARCH USE ONLY Assay range::::60pg/mL - 1600pg/mL 96 determinations Purpose This kit allows for the determination of TRACP5b concentrations in Rat serum, cell culture supernates and other biological fluids Principle of the assay The kit assay Rat TRACP5b level in the sample, use Purified Rat TRACP5b antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add TRACP5b to wells, Combined TRACP5b antibody which With HRP labeled, become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Rat TRACP5b in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve. Materials provided with the kit 1 wash solution 20ml×1bottle 7 Stop Solution 6ml×1 bottle Standard(3200 2 HRP-Conjugate reagent 6ml×1 bottle 8 0.5ml×1 bottle pg/mL) 3 Microelisa stripplate 12well×8strips 9 Standard diluent 1.5ml×1bottle 4 Sample diluent 6ml×1 bottle 10 Instruction 1 Closure plate 5 Chromogen Solution A 6ml×1 bottle 11 2 membrane 6 Chromogen Solution B 6ml×1 bottle 12 Sealed bags 1 Specimen requirements