黄连配方颗粒的HPLC指纹图谱研究

黄连配方颗粒的HPLC指纹图谱研究 ? 640?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第35卷第6期2004年6月 黄连配方颗粒的HPLC指纹图谱研究 周晖,刘萌 (温州市药品检验所,浙江温州325028) 配方颗粒是我国1993年尝试中药改革而发展 的新剂型.产品采用将中药饮片经浸提,浓缩,干燥 等若干工艺精制而成,保持原中药饮片的性味与功 能.2001年国家药品监督管理局发布的《中药配方 颗粒管理暂行规定》已明确规定配方颗粒可以在全 国范围试点临床医院进行使用,并对其质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 的 研究作了技术要求.本实验对批准研制的3家企业 的黄连配方颗粒进行HPLC指纹图谱研究,以便了 解配方颗粒与原料饮片,药材在总成分和有效成分 方面的符合程度,比较和评价不同制备工艺与产品 的内在质量,均一性等关系,建立符合中药特点的质 量标准. 1仪器与材料 Waters高效液相色谱仪,515泵二组,2487紫 外检测器,717自动进样系统.乙腈为色谱纯,其他 试剂为分析纯.黄连配方颗粒及原料饮片由临床试 用医院和研制企业提供( 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1).黄连对照药材和盐 酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供. 表1样品来源 Table1Sampleresources 编号批号规格生产单位与来源 020914 O21231 030850 0204051 0210073 0309025 每袋相当饮片3g 同上 同上 饮片 每袋相当饮片3g 同上 同上 饮片 每袋相当饮片3g 同上 同上 饮片 深圳三九医药贸易有限公司 同上 同上 同上(产地:四川) 广东一方制药有限公司 同上 同上 同上(产地:四川) 江阴天江药业有限公司 同上 同上 同上(产地:四川) 2 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 和结果 2.1色谱条件:色谱柱为AlltechC8(250mm× 4.6rflm,5m),流动相为乙腈一0.05mol/L磷酸二 氢钾,梯度洗脱:0,15min乙腈由15升为25, 保持15min,30,45min乙腈由25升为35,再 保持15min至60min;流速为0.5mL/min;检测波 收稿日期:2003—11-13 长为350nm;温度为30C;进样量为10L. 2.2对照品溶液的制备:精密称取盐酸小檗碱对照 品适量,用1醋酸水溶液稀释成40~g/mL的溶 液,即得. 2.3对照药材溶液的制备:精密称取黄连对照药材 粉末1g,置1O0mL量瓶中,加19/5醋酸水溶液约 80mL,超声30min,放冷,加溶剂至刻度,摇匀,滤 过.精密取续滤液3mL置25mL量瓶中,加1醋 酸水溶液稀释至刻度,摇匀,即得. 2.4供试品溶液的制备:取黄连配方颗粒1/3袋 (相当于饮片1g)及原料黄连饮片1g(研成粉末), 精密称定,分别置100mL量瓶中,按对照药材溶液 的制备方法制备,即得. 2.5测定方法:取各供试品溶液和对照品溶液,按 上述色谱条件注入高效液相色谱仪,记录色谱图,计 算,即得. 2.6方法学考察 2.6.1精密度试验:取同批供试品溶液连续进样6 次,测共有峰l1个,各共有峰相对峰面积RSD<3. 2.6.2重复性试验:取同批颗粒6份,按供试品溶 液制备法制备,分别进样,测得各共有峰相对峰面积 的RSD<3. 2.6.3稳定性试验:取同批供试品溶液分别在0, 6,12,24,36h进样,测得各共有峰相对峰面积的 RSD<3,表明供试品溶液在36h内稳定. 2.7指纹图谱与各项技术参数 2.7.1共有峰的指定:比较对照药材与供试品的 HPLC图和相关参数,得出其中共有峰l1个(图1). 2.7.2共有峰的相对保留时间,峰面积,相对峰面 积:ll号峰为盐酸小檗碱,是黄连的主成分,其峰面 积平均占总峰面积的57,比较稳定,选择作为参 照峰.共有峰的相对保留时间和相对峰面积见表2, 3.由表3可见样品间的共有峰相对面积RSD< 4.共有峰峰面积占总峰面积的99.5,RSD为 0.2,符合指纹图谱的有关规定(表4). 舵船r3?? 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第35卷第6期2004年6月?641? 表2样品和对照药材的共有峰相对保留时间 Table2RelativeretentiontimeofcommonpeaksofsamplesandRhizomaCoptidis O153O4560015304560 时间r/min 图1黄连对照品(A)和黄连配方颗粒(B)的HPLC指纹图 Fig.1HPLCfingerprintofRhizomaCoptidis(A) anditsgranules(B) ?xx, 一1 ?c砉xc砉x 2.8共有成分相对含量的计算:将每克对照药材与 配方颗粒黄连及原料黄连饮片的共有峰面积进行比 较,计算共有成分的相对含量,同时计算盐酸小檗碱 含量,结果见表4. 表4共有峰面积和相对含量 Table4Areasofcommonpeaksandrelativecontent ?642?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第35卷第6期2004年6月 3讨论 3.1本实验采用1醋酸水溶液为溶剂,黄连配方 颗粒和饮片溶出较好;采用乙腈一0.05mol/L磷酸 二氢钾梯度洗脱,黄连中各成分得到较好分离, HPLC色谱图效果良好.经方法学考察:盐酸小檗碱 精密度,重复性,稳定性试验良好;在4,80ffg/mL 与峰面积呈良好线性关系,方程为A一84917c一 59263,r一0.9999;平均回收率为99.6,RSD为 1.1(,z一3).本法可用于黄连饮片及其配方颗粒 的质量评价和控制. 3.2从指纹图看,3厂家9批配方颗粒与原料饮片,对照药材在总成分和有效成分方面具有良好的相似 性.采用相似度计算法计算,与平均样品值比较,共有 峰相对保留时间的相似系数,一?0.9999;共有峰相 对峰面积的相似系数,一?0.993.平均共有峰总面积 在99以上.提示各家黄连配方颗粒的生产工艺基 本成熟,用于生产的原料饮片品种稳定,质量可靠. 3.3相对于对照药材,3个厂家黄连配方颗粒的共 有峰总面积和盐酸小檗碱的含量差异较大.提示各 厂家有必要按有关规定 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 工艺和质量,研究颗粒 与饮片的等效性关系,合理调整配方颗粒的标示规 格,制定出科学,统一的质量标准. HPLC法测定鼻炎灵片中欧前胡素的含量 赵春香,梁英,王丽娜 (1.吉林省药品检验所,吉林长春130062;2.吉林省利华制药厂,吉林长春130000) 鼻炎灵片是由苍耳子,黄芩,白芷等8味中药经 提取加工制成的中药复方制剂.具有透窍消肿,祛风 退热之功效,主要用于慢性鼻窦炎,鼻炎及鼻塞头痛, 浊涕臭气,嗅觉失灵等.原质量标准没有含量测定项. 本实验采用HPLC法对制剂中欧前胡素进行了含量 测定.方法简便,快速,可以有效地控制产品的质量. 1仪器与试药 LC一10ATvp高效液相色谱仪,sPD一10Avp 紫外检测器,wDL一95工作站. 欧前胡素(批号:0826—9502)对照品购自中国药 品生物制品检定所,鼻炎灵片由吉林省博维药业有 限公司提供.甲醇为优级纯,其他试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件:用AgilentZorbax80AExtend—C18 4.6mm,5um)色谱柱,甲醇一0.3磷酸 (250mm× 溶液(60:40)为流动相,检测波长为248nm.理论 塔板数按欧前胡素峰计不得低于8000. 2.2供试品溶液的制备:取本品10片,除去糖衣 后,精密称定,研细,精密称取0.7g,置索氏提取器 中,加甲醇适量,回流提取3h,提取液蒸干,残渣加 甲醇使溶解,并转移至25mL量瓶中,加甲醇至刻 度,摇匀.用微孑L滤膜滤过,取续滤液,即得. 2.3标准曲线的制备:精密称取欧前胡素对照品 5.21mg,置25mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻 收稿日期:2003—10-03 度,摇匀,作为对照品溶液.精密量取0.1,0.25, 0.5,1.0,2.0,3.0mL,分别置25mL量瓶中,加甲 醇稀释至刻度,摇匀,分别精密量取10ffL注入液相 色谱仪,记录峰面积积分值.以进样量为横坐标,峰 面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程 为:A一72422776C+9415O,r一0.9998.结果表 明欧前胡素在0.0083,0.25fig与峰面积呈良好 的线性关系. 2.4空白试验:按处方比例及制备工艺配制缺白芷 的阴性对照适量,称取0.7g,按2.2项下的方法操 作,并测定,结果阴性对照无干扰,见图1. 2.5精密度试验:取同一对照品溶液,连续进样5 次,每次10ffI,记录欧前胡素峰面积,结果峰面积 RSD一0.40.4. 2.6重现性试验:取同一批号样品(批号 200211O1),制备供试品溶液,平行测定5份,得欧前 胡素的含量为23.2ug/片,RSD为2.0%. 2.7稳定性试验:取同一对照品溶液,每隔24h注 结果欧前胡素峰 入液相色谱仪10ffL,记录峰面积, 面积RSD为0.4%(,z一6),结果表明对照品溶液在 5d内稳定性良好. 2.8加样回收试验:精密称取已知含量的样品适量 (批号:200211O1,含欧前胡素约44fig),置索氏提 取器中,精密加入0.2084mg/mL欧前胡素对照品