MS培养基母液的配制与保存
MS培养基母液的配制与保存 一、目的要求
1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。|
2、掌握培养基各种母液的保存方法。
二、仪器与用具
1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱等。
2、用具:烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签等。
3、试剂:95%酒精，0.1-1 NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。 三、方法步骤
(一)母液的配制
母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点:(1)保证各物质成分的准确性。
(2)便于配置时快速移取。
(3)便于低温保藏。
1、MS大量元素母液(10X)
称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。
化学药品 1升量 10升量 ? NH4NO3 1650 mg/L 16(5g ? KNO3 1900 mg/L 19(0g ? CaCl2?2H2O 440 mg/L 4(4g ? MgSO4?7H2O 370 mg/L 3(7g ? KH2PO4 170 mg/L 1(7g
2、MS微量元素母液(100X)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量 ? MnSO4?4H2O 22(3 mg/L 223mg
( MnSO4?H2O) (21(4 mg/L)
? ZnSO4?7H2O 8(6 mg/L 86mg ? CoCl2?6H2O 0(025mg/L 0(25mg ? CuSO4?5H2O 0(025 mg/L 0(25mg ? Na2MoO4?2H2O 0(25 mg/L 2(5mg ? KI 0(83 mg/L 8(3 mg ? H3BO3 6(2 mg/L 62 mg 注意:CoCl2?6H2O和CuSO4?5H2O可按10倍量(0(25 mgX10=2(5 mg)或100倍量(25 mg)称取后，定容于100ml水中，每
次取10ml或1ml，(即含0(25 mg的量)，加入到母液中。
3、MS铁盐母液(100X)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量
Na2?EDTA 37(3 mg/L 373 mg
FeSO4?7H2O 27(8 mg/L 278 mg
注意配制时，应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶(烧杯)中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液(100X)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品 1升量 10升量 ? 烟酸 0(5 mg/L 5mg ? 盐酸吡哆素(VB6) 0(5 mg/L 5mg ? 盐酸硫胺素(VB1) ? 肌醇 100 mg/L 1 g ? 甘氨酸 2 mg/L 20mg 5、生长调节剂
单独配制，浓度为1-5 mg/ml(书中为0(5 -1mg/ml)，一般配成4 mg/ml 。
配制培养基母液时注意事项:
?一些离子易发生沉淀，可先用少量蒸馏水溶解，在按配方顺序依次混合;
?配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水;
?药品应用化学纯或分析纯;
?溶解生长素时，可用少量0(5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0(5 –1N的HCl加热溶解。 (二)母液的保存
1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液，放入棕色瓶中保存。
2、贮藏:4?冰箱。
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