附录热原检查法本法系将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在
规定
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时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。供试用家兔供试用的家兔至少应为普通级动物健康,体重1.7~3.0kg,雌兔应无孕。预测体温前7日即应用同一饲料饲养,在此期间内,体重应不减轻,精神、食欲、排泄等不得有异常现象。未曾用于热原检查的家兔,应在检查供试品前3~7日内预测体温,进行挑选。挑选的条件与检查供试品相同,仅不注射药液,每隔30分钟测量体温1次,共测8次,8次体温均在38.0~39.6℃的范围内,且最高与最低体温差不超过0.4℃的家兔,方可供热原检查用。用于热原检查后的家兔,若供试品判定为符合规定,至少应休息48小时后可重复使用;对血液制品、抗毒素和其他同一过敏原的供试品在5天内可重复使用1次。若供试品判定为不符合规定,则组内全部家兔不再使用。试验前准备热原检查前1~2日,供试验用家兔应尽可能处于同一温度的环境中,实验室和饲养室的温度相差不得大于3℃(二部修订),实验室的温度应在17~25℃,热原检查全过程中,应注意室温变化不得大于3℃;并应保持安静,避免强光照射,避免噪声干扰和引起动物骚动。家兔在检查前至少1小时开始停止给食并置于适宜的装置中,直至检查完毕。家兔体温应使用精密度为±0.1℃的测温装置。测温探头或肛温计插入肛门的深度和时间各兔应相同,深度一般约6cm,时间不得少于15分钟。每隔30分钟测量体温1次,一般测量2次,两次体温之差不得超过0.2℃,以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔,正常体温应在38.0~39.6℃的范围内,同组各兔间正常体温之差不得超过1℃。检查用的注射器、针头及一切与供试品接触的器皿,应置干烤箱中用250℃加热30分钟,也可用其他适宜
方法
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除热原。检查法供试品或稀释供试品的无热原稀释液,在注射前应预热至38℃。供试品的注射剂量按各制品
规程
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的规定。但家兔每1kg体重注射体积不得少于0.5ml,不得大于10ml。取适用的家兔3只,测定其正常体温后15分钟内,自家兔耳静脉缓缓注入规定剂量并预热至38℃的供试品溶液,然后每隔30分钟按前法测量其体温一次,共测6次,以6次体温中最高的一次减去正常体温,即为该兔体温升高的温度。如3只家兔中,有1只家兔体温升高0.6℃或0.6℃以上;3只家兔体温升高均低于0.6℃,或但体温升高的总和达1.4℃或1.4℃以上,应另取5只家兔复试,检查方法同上。结果判定在初