心理性应激状态下针刺对大鼠DMV放电、胃电和胃粘膜损伤的影响.doc

心理性应激状态下针刺对大鼠DMV放电、胃电和胃粘膜损伤的影响.doc 心理性应激状态下针刺对大鼠DMV放 电、胃电和胃粘膜损伤的影响 作者:王景杰，黄裕新，郭庆东，秦 明，高 巍，王庆莉 【关键词】 电针 关键词: 电针;防治作用;应激，心理性;胃粘 膜/损伤 摘 要:目的 探讨针刺对心理性应激状态下大鼠胃动力 障碍及胃粘膜损伤的防治作用. 方法 雄性SD大鼠96只随机分成3 组.A:正常对照组;B:心理性应激组;C:心理性应激+针刺组.采用高压恒 流脉冲刺激器制备心理性应激模型.电针刺激大鼠双侧足三里，细胞 外引导测定迷走神经背运动核(DMV)自发放电，浆膜法测定胃电 数据及用Chen等法测定胃粘膜损伤指数. 结果 A组大鼠迷走神经 背运动核自发放电较少，胃电活动较为规律，胃粘膜组织正常.B组 迷走神经背运动核自发放电不规律，以放电频率增加占优势，胃电 活动出现紊乱，但与心理性应激的时间和程度无明显相关性，胃粘 膜可以出现损害、甚至产生溃疡.且随着受到心理性应激反应程度的 不断增强，胃粘膜损害的程度不断加大，其损伤指数逐渐增加.但总 体上来看仍B组与C组相比，在心理性应激的2，4，6和8d二者 胃电的频率、波幅都有明显的差异(P<0.05).相同情况下，C组 与B组的胃电差异显著(P<0.05);然而，C组与A组相比，在心 理性应激反应的2，4，6和8d其胃电的频率和波幅无差异 (P>0.05).而在心理性应激反应后给予电针刺激的条件下，胃粘 膜损伤明显减轻，且随着时间的延长，这种效果更加明显.C组与B 组相比，二者的损伤指数有明显差异(P<0.01);同时，随着心理 性应激与给予电针刺激的不断增加，其保护率也在不断的增高. 结 论 心理性应激可以导致胃动力障碍和胃粘膜损伤，且关系密切.针 刺足三里对其有明显的防治作用. Keywords:electroacupuncture;protective and therapeutic;stress， psychological;gastric motor disorders;gastric mucosa/injuries Abstract:AIM To test the protective and therapeutic ef-fects of electroacupuncture on gastric motor disorders and a-cute gastric mucosal lesions under psychological stress in rats.METHODS Ninety-six male Sprague-Dauley rats were randomly divided into three groups:control group(CG，n=32)，psychological stress group(PSG，n=32)and elec-troacupuncture group(EAG，n=32).Every group was ran-domly divided into four subgroups(CG，n=32，n=8;PSG，n=32， n=8;EAG，n=32，n=8).Animal model was con-structed with impulsive stimulator of high voltage and stable currency stimulating the Chusanli with electroacupuncture.Then spontaneous electroactivity of dorsal motor nucleus of the vagus nerve(DMV)was recorded extracellularly and EGG with the serosa method，and the gastric mucosa injury index was calculated.RESULTS The spontaneous elec-troactivity from DMV was rarely observed in normal rats.EGG was regular with frequency3per minute and amplitude360,370μV.Gastric mucosa was normal.Under psycholog-ical stress，spontaneous electroactivity from DMV was irreg-ular which did not significantly correlate with time and degree of psychological stress.But we observed that increasing fre-quency of spontaneous electroactivity from DMV was pre-dominant.EGG was disorderly and irregular.There was no difference in frequency and amplitude of EGG between C group and A group on the2nd day，the4th day，the6th day，the8th day after psychological stress with stimulating chu-sanli by electroacupuncture under psychological stress.Gas-tric mucosal lesion appeared，even did ulcer.The degree of gastric mucosal lesion became more and more serious，and le-sion index increased gradually with the continues psychologi-cal stress.But gastric mucosal lesion alleviated significantly under psychological stress with electroacupuncture stimula-tion.And the effect was more significant with the continues electroacupuncture stimulation.There was significant differ-ence in lesion index between C group and B group(P<0.01).The protective rate increased gradually with the elec-troacupuncture stimulation.CONCLUSION Psychological stress can lead to gastric motor disorders and gastric mucosal lesions，and the correlation is severe.Stimulating Chusanli can impose protective and therapeutic on them. 0 引言 随着社会的发展和生活节奏的加快，人们 所面临的社会问题越来越多，工作、生活状况，就业问题，人际关 系、家庭问题等一系列错综复杂的问题，常常使人出现焦躁、忧虑. 这些情感、心理上的变化都会使人产生应激性反应.所以，现代生活 中，心理社会因素已经成为重要的应激源，而且这种状况也越来越 受到人们的重视.但就目前状况来看，人们对于心理性应激所导致的 胃动力障碍和胃粘膜损伤的研究报道尚少,1, .既往研究发现针刺 可以调节胃运动功能以及对胃粘膜损伤具有保护作用,2，3, .我 们探讨心理性应激导致胃运动功能障碍和胃粘膜损伤以及观察电针 对其的防治作用. 1 材料和方法 1.1 材料 X-Y记录 仪(日本光电公司生产)，C立体定位仪(上海江湾仪器厂生 产)，电针仪(上海医疗仪器厂生产)，双导智能胃肠电图仪(合 肥仪器厂生产)，高压恒流脉冲刺激仪(西安交通大学理工学院研 制)，SD雄性大鼠体质量(200?20)g，由本校实验动物中心提供. 模型制作将96只SD大鼠经过7d适应期饲养后，随机分成A，B， C组，每组32只(每组再随机平均分成4个小组).A组为正常对照 组，B组为心理性应激组，C组为心理性应激+针刺组.心理性应激动 物模型的制作分3期进行,4, ，适应期(I期)此期为7d，每天将各组大鼠放置实验盒内25min,4d大鼠可自行钻入实验盒.其目的是消除实验盒造成的应激影响.心理性应激形成期(II期)此期为7d.由此期开始，将大鼠进行分组.A组不给任何刺激，也不行针刺.B，C组同时开始给予应激性刺激.心理性应激刺激即对大鼠给予不 规则 编码规则下载淘宝规则下载天猫规则下载麻将竞赛规则pdf麻将竞赛规则pdf 光照和电激，且光照和电激是随机的.C组在给予应激后电针刺激双侧足三里.心理性应激记忆期(III期)15d后，B，C组动物均不再给予电刺激，余与II期相同. 1.2 方法 在II期的2，4，6和8d分别开始进行迷 走神经背运动核单位放电的记录及胃电的记录，随后 取胃观察胃粘膜损伤情况并进行损伤指数的计算.C组则于II期开始给予电针刺激双侧足三里，取穴于膝关节外下方腓骨小头下约5mm处，进针深度7mm,5, ，电针参数选为频率50Hz，强度20V，时间30min，1次 d-1 ，以双下肢轻微颤抖为宜.于实验前12h禁食，在846合剂麻醉下(每100g体质量0.1mL)打开腹腔，在胃前壁距幽门0.3,0.5cm处浆膜面上埋置胃电引导电极.随后将动物俯卧，头部用立体定位仪固定.在左枕骨上打一个直径为0.3cm的小洞，剪去脑膜，暴露小脑，然后以琼脂封口，以三磺季酚酰制动,6, .用灌以3mol L-1 KCl玻璃微电极，通过小脑插入延髓.按大鼠脑图谱定位，在迷走神经背运动核区用微电极寻找单位，当找到自发放电的单位时开始描记.记录迷走神经核单位放电.信号输入经序列密度处理，由平衡记录仪描出每秒放电频率的直方图.胃电信号直接描记在胃电记录仪上.分别记录迷走神经背运动核的单位放电及胃电，记录结束后将胃取出，计算应激后及电针后胃粘膜的损伤指数.胃粘膜损伤指数和保护率计算方法参照Chen等的计分法计算损伤指数和保护率:0分:无损伤;2分:1,2mm;4分:2,4mm;6分:4,6mm;8分6,8mm;10分:8,mm.极大值为10分.总的严重程度:瘀点或糜烂0.6分:1?;1.2分:2?;1.8分:3?极大值为4?.保护率计算P%=B-C/B%(P为保护率;B为应激组;C为应激+电针组). 统计学处理:实验数据用x ?s 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示，显著性检验用t检验. 2 结果 2.1 电针对心理性应激大鼠迷走神经背运动核单位放电的影响 正常情况下，大鼠迷走神经背运动核自发放电的细胞较少，其电活动影响着胃电和胃的运动.本实验表明，正常情况下，迷走神经背运动核的自发放电较少(Fig1A).在心理性应激条件下，迷走神经背运动核的自发放电频率有明显的改变，呈较为紊乱的状态并随着应激时间的增加其变化更加明显，但放电频率增高的趋势相对占优势，表明心理性应激可以激发(或抑制)迷走神经背运动核的自发性放电，从而影响胃电的活动和胃的运动.与应激组相比，应激+电针组的自发放电频率有所减少，到治疗6d自发放电的频率已开始减 少，到治疗8d自发放电的频率减少明显，与正常对照组相比，有接近的趋势，提示电针对其有明显的调整作用.而且，随着治疗时间的延长，这种调整作用更加明显. 2.2 电针对心理性应激引起的胃粘膜损伤的作用 正常情况下，胃粘膜无损伤.心理性应激情况下，胃粘膜出现损伤，并随着时间的延长，粘膜损伤指逐渐增加(Tab1).在给予条件下，胃粘膜损伤明显减轻，且保护率也有增加.表1 胃粘膜损伤指数和电针刺激的保护率(略) 2.3 电针对心理性应激大鼠胃电参数的影响 正常情况下，胃电的频率和波幅具有明显的规律性，其频率在3次 min-1 ，波幅在360,370μV(Tab2).在心理性应激状况下，胃电的频率和波幅呈现不规律状况，与应激的时间无明显相关性.在对心理性应激给予电针刺激条件下，胃电逐渐趋于规律，其频率和波幅与正常对照相比较，二者无明显差异.表2 电针对心理性应激大鼠胃电参数的影响(略) 3 讨论 越来越多的事实和研究证明，心理社会因素已成为目前社会生活中的重要应激源如下岗再就业、经济状况、工作压力、人际关系等错综复杂的问题皆可引起应激反应.使人产生烦躁、忧虑，以致产生各种生理和心理上的问题，严重者可以导致诸多的功能障碍或损害.如本研究的心理性应激可以导致胃运动功能障碍和胃粘膜的损害.已有研究报道，迷走神经背运动核的电活动影响着胃电活动,4, ，胃电活动与胃动力密切相关,7, .正常情况下，胃电活动有明显的规律性，其参数一般为频率3次 min-1 、波幅360μV.本实验表明，心理性应激条件可以导致延髓的迷走神经背运动核神经元细胞自发放电频率发生改变.与正常情况相比，其自发放电频率呈现相对紊乱的状态.由此可以进行推测，心理性应激导致胃运动功能障碍的机制是由于心理性应激对中枢神经系统的影响，进而影响到延髓的迷走神经背运动核的自发放电的改变，从而出现因中枢神经系统功能紊乱而导致的胃运动功能障碍.在心理性应激条件下，大鼠胃电频率个别有增加也有减少，胃电的波幅变化也有类似的情况，但仍以增多为明显.从Tab2看，应激条件下大鼠胃电的频率波幅与正常对照组相比较，二者有明显的差异.证明心理性应激的确可以导致胃运动功能障碍.心理性应激可以导致胃粘膜的损伤.从心理学的角度来看，在本实验的II期，在随机给大鼠不规则光照和电激条件下，大鼠无法建立心理性适应，在心理上始终处于高度紧张状态，形成明显的心理性应激状况.正是由于这种状况的持续存在，因而导致胃粘膜损害的发生.从Tab1我们可以看出，随着应激反应的产生，胃粘膜出现损害，且随着应激时间的不断延长，损伤程度也不断增高.提示长期处于应激状况下，胃粘膜的损伤会不断加重.这可能正是临床上常见的急性胃粘膜病变、胃溃疡发生的原因之一. 我们观察了电针对心理性应激所导致的胃运动功能障碍和胃粘膜损伤的防治作用.从Fig1我们可以看到，给予电针刺激组其迷走神经背运动核自发放电的频率较应激组有相对稳定的趋势.且与正常对照组相比较，随着治疗时间的延长，二者自发放电的频率有接近的倾向.因此，从一个侧面提示电针通过对迷走神经背运动核自发放电活动的影响进而影响胃电的活动和胃的运动.推测电针对心理性应激引起的胃动力障碍的调整作用，可能是通过这一途径实现的.但其明确机制有待进一步证明.从Tab1来看，应激+电针组的胃粘膜损伤指数较应激组明显减少，并随着应激和电针刺激时间的不断延长，这种作用也更加明显，且应激+电针组与应激组的胃粘膜损伤指数二者相比差异明显，其保护率也呈增加的趋势.表明电针刺激对心理性应激引起的胃粘膜损伤具有明显的保护作用.其机制可能通过对下丘脑和某些胃肠道激素及神经肽的影响 ,1，8，9, 来实现的.如对一氧化氮合酶、生长抑素、表皮生长因子、生长激素、前列腺素E2 、降钙素基因相关肽等的影响，来调节胃的分泌、血流及粘膜和粘膜屏障的再生和修复.由Tab2分析来看，应激组大鼠胃电较正常组有明显的变化且无明显的规律性.而应激+电针组大鼠胃电的变化与应激组比较有显著性差异，与正常对照组比较二者无显著性差异.表明电针刺激对心理性应激大鼠的胃电变化有良好的调节作用.其机制可能 是与电针刺激引起某些胃肠道激素变化有关,2，10, ，如对血管活性肠肽、胆囊收缩素、胃泌素等的影响.总之，心理性应激可以导致胃运动功能障碍和胃粘膜的损伤.给予电针刺激足三里，对心理性应激引起的胃运动障碍起明显的调节作用，对心理性应激引起的胃粘膜损伤具有明显的保护作用.这为临床治疗提供了科学的理论依据.也进一步证实了针刺对胃肠功能具有调整作用.