日常用品的抑菌实验论文
不同日用化学品的抑菌效果探究 西南位育中学:孙思敏、陈哲、孟思妤、林杰希
指导老师:吴彦君
一、前言
随着我国城乡经济的快速发展,人们的相互交往日益广泛,给各种传染性疾病的传播增加了机会。所以,研究开发具有消毒灭菌、洗涤去污、稳定性好、无毒副作用等功能的家庭日用化学品,具有较大的社会效益和经济效益。随着生活水平的提高,人们对家庭常用日用化学品(牙膏、洗洁精、洗发水、洗手液)抑菌
要求
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越来越高。就此近日我们对不同日用化学品的抑菌效果进行了实验与探究。以下为主要的实验过程。
二、关键词:日用化学品、抑菌、大肠杆菌
三、实验器材和方法
,一,实验准备 :
1. 化学用品:
供试细菌
编号 产品名称 产地 主要成分 大肠杆菌 枯草杆菌 金黄色葡
萄球菌
1 夏士莲洗 安徽 十二烷基
发露 醇醚硫酸
钠、聚季铵 盐-10、水
2 上海防酸 上海 山梨醇、
牙膏 水合硅石、
水、氯化锶 3 target洗 美国 酒精、液
手液 体蜡、油酸 皂
图1:三种日用化学品
P.S.:3种日用化学品均在有效使用期内。
2.菌种:大肠杆菌，接种普通营养琼脂，37?，24 h。 3.培养基种类:琼脂凝胶培养基
4.实验器材:小试管、锥形瓶、培养皿、烧杯、量筒、玻璃棒、药匙、剪刀、标签贴纸、标记笔、牛皮纸、灭菌带、三角玻扒、接种环
,二,实验步骤:
1.培养基的配置:
(1)成分:蛋白胨1.6g，牛肉膏0.48g，氯化钠0.8g，琼脂2.72g，
蒸馏水160mL，pH7.2。(如图2所示:左起氯化钠、蛋白胨、牛肉膏、琼脂)
图2:培养基的成分
(2)制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于锥形瓶内， 121?，20min高压灭菌备用。(附带圆形抑菌片消毒)
图3:配置好的培养基液体
2. 培养基的分装:
每个组员1支试管中注入10ml培养基并将试管捆扎放进烧杯中，其余倒入锥形瓶。(如图4所示)
图4:培养基分装在试管中
3. 培养基的高温灭菌:121? 20min 高压蒸汽灭菌锅 4.油镜观察大肠杆菌:
(1)制片
涂菌:用无菌操作方法从试管中沾取菌液一环，用接种环在洁净无脂的载玻片上做一薄而均匀、直径约1cm的菌膜。涂菌后将接种环火焰灭菌。
干燥:于空气中自然干燥。亦可把玻片置于火焰上部略加温加速干燥(温度不宜过高)。
固定:目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上，便于染料着色，常用加热法，即将细菌涂片面向上，通过火焰3次，以热而不烫为宜，防止菌体烧焦、变形。此制片可用于染色。
(2)染色
染色:将涂片置于水平位置，滴加染色液覆盖于涂菌处，染色约2min。
水洗:倾去染色液，斜置载片，用自来水的细水流由载片上端流下，不得直接冲在涂菌处，直洗至从载片上流下的水中无染色液的颜色为止。
干燥:自然晾干或用吸水纸轻轻地吸干，注意不要擦掉菌体。
待标本完全干燥后，先用低倍镜和高倍镜观察，将典型部位移至视野中央，再用油镜观察。
图5:大肠杆菌载玻片制作
(3)观察
将标本片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的位置，然后提高镜筒，在标本的待检部位滴镜油一滴，再换油镜观察。
转动粗调节器使载物台徐徐上升(或使镜筒渐渐下降)，直至油镜头浸没至油中。此时眼睛应从侧面观察，避免压碎标本片和损坏镜头。
然后双眼移至接目镜，一面从接目镜观察，一面反方向缓慢地转动粗调节器(下降载物台，或上升镜筒)，当出现模糊物象时，换用细调节器，转动至物象清晰为止。
观察完毕，应先提高镜筒，并将油镜头扭向一侧，再取下标本片。油镜头使用后，应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。
图6:油镜观察大肠杆菌
5. 倒平板与摆斜面:
(1)戴好手套，将三角瓶中的凝胶培养基倒入培养皿中，高度约为培养皿高度的1/2。
(2)摆斜面:戴好手套，将试管中的凝胶培养基拿出灭菌锅倾斜15，放置于操作台上。(如图7所示)
图7:倒平板
6.抑菌液的配置与抑菌片制作:
(1)抑菌液的配制:将各样品 4 g分别放入对应的锥形瓶中，加蒸馏水4 ml，振荡至样品完全溶解 ，配制成1:1的样品液。 (2)抑菌片的制作:将消毒过的无菌滤片浸入到抑菌液中，浸10——15min。
图8:抑菌片的制作
7.菌种的涂布与抑菌片放置:
(1)菌种的涂布:将菌液分离样品摇匀，将0.1ml菌悬液小心地滴在平板培养基
表
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面中央位置。右手拿无菌三角玻扒在平板培养基表面上,将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动,使之分布均匀，然后改变方向沿另一垂直来回推动,平板内边缘处可改变方向用三角玻扒再涂布几次。(如图9所示)
图9:菌种的涂布
(2)抑菌片的放置:将抑菌片用镊子从抑菌液中夹出，放入培养皿。(如图10所示)
8.观察抑菌圈大小并记录数据:
对照组与实验组恒温培养24H，观察抑菌圈的大小。
图10:抑菌片的放置
8.实验结果:无明显现象
四、实验分析和讨论
原因分析:细菌培养时间不够;温度、湿度不恰当导致细菌死亡;实验过程有明显误差(酒精灯温度过高)……
试验时间:2010.3.26
浙公网安备 33021202002483