牛活体采集卵母细胞技术的研究
牛活体采集卵母细胞技术的研究 一
28一中田盲牧杂志2001年第卷第2期
牛?活?体?采?集?卵?母?细?胞?技?术?的?研?究
朱化彬,敖缸,刘云海,余颂东,王文英
(1.中国农科院畜牧所,北京100094;2.浙江省农科院畜牧兽医研究所 杭州;3.山东省农业科学院生物工程中心.济南)
蔫耍:奉研究利用自制采卵嚣甘24头健康牛和?头有生殖障碍牛进行活体采集卵巢卵母如胞斌|}o
卵母?胞田收率42.9%,共采集卵母如胞397枚,其中可用卵266枚,占66.7%.平均毒头母牛获卵母细
胞和可用卵母妇胞缸分搠为9.o2枚和6.舛枚.采集的卵母胞缝体外受精和俸外培养,移植受体母
牛.成功地分娩了裁嗣第一头活体采卵牛犊.
关?诩:牛;活体采卵;采卵嚣
中圈分类号:s.3;$814.8文献标识码:B文章一号~0258—7033(2001)02—0O7.8—02 牛活体卵巢采集卵母细胞技术是近年发展起来的
一
项珏胎工程新技术,以下简称括体采卵技术.活体
采卵技术与体外受精技术结合,可以耐有遗传价值的
供体母牛进行重复采卵获得优质征胎.并且适用于有
生殖道痰患以及外源激素超捧反应不敏摩的供体母
牛,使母畜资源得以充分利用.然而,无论使用内
窟镜还是超声波方法采集牛卵母细胞,都需要昂寅的
仪器设备,使此技术的推广应用受到一定限制.为解
决遣一问题,藐们探索了一种简易牛活体采卵器及采
卵方法,进行了括体采卵实验,井产生了我国第一头活
体采卵牛犊.奉文旨在介绍部分实验结果井进行讨论 分析.
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供体牛:44头成年荷斯坦奶牛,惆葬在半封闭 式牛合.饲料及牧草充足.管理水平良好.括体采卵前 经初步诊断.44头奶牛中24头繁殖性能正常,加头具 有繁殖痰患或超散捧卵不敏摩.实验分别在母牛发情 当无,发情7天和发情7一l5进行活体采卵.对其 中lo头供体牛的采卵操作,记录采卵针对卵泡的穿刺 欢敷及回收的卵母细胞散,计算卵母细胞回收率;在回 收的卵母细胞中,包裹2层以上紧密颗粒细胞的判断 为可用卵;耐所有供体牛记录健康状况,采卵时间,回 收卵母细胞数和可用卵母细胞敷.
1.1.2采卵嚣:自制简易采卵器有三部分组成:持针 嚣.三通导管和真空泵.三通导臂为.r形,采卵时分 别与采卵针+集卵臂和冲卵臂连接.
1.1.3采卵藏ne.BPBS+L%血清+柏d肝
素
1.2方法
1.2.1活体采卵操作过程:按常规胚胎移植操作规程 对供体牛进行保定,根据牛体重大小,肌肉注射0.5— 1.Oral静松灵进行全身麻醉.清粪井外驵消毒.操作 者一手直肠把握固定卵巢.另一手将采卵器的持针器 连同导管送至阴道子宫颈穹隆处预备采卵的一佃I,对 准卵巢位置穿刺,同时用脚踏开关开启真空泵,在采卵 针剌^卵泡时产生瞬间负压,将卵母细胞连同卵泡藏 嗳^导管进^集卵臂.试验中所用的负压为8.7kP— 10.OkP汞柱.
1.2.2卵母细胞体外受精和胚胎穆植按常规方法进 行.
2结果与讨论
2.1卵母细胞回收率活俸采集卵母细胞匠收宰是 指回收的卵母细胞数量占采集卵泡数量的百分比.本 试验中卵母细胞的回收率为49.2%(见表1),低于 t,,mey等报道的利用超声波仪进行栗卵的回收率 (69.2%).而与另外一些报道的50%左右的卵子回收 辜相近】.奉试验中以手感判断卵巢卵泡,与实际卵 泡散存在一定误差,当以采卵针对卵巢的穿刺敷作为 采集卵泡敷时.有一些井未刺^卵泡.采卵回收率必然 儡低.
裹1筒易采卵法卵母细胞回收章
采卵头数穿散获弗母细胞散卵母细胞回收事(%) 106l3o40.2
2.2不同生殖状态供体牛的采卵数量在试验中.利 用简易采卵法分别采集了加头非健康牛和24头健康 牛卵巢卵母细胞(见表2).结果表明,健康牛无论是 平均采集卵母细胞数量还是可用卵母细胞数量郡分剐 显着高于非健康牛.逭可能是由于有繁殖障碍的牛. 卵巢活力较差.发育的卵泡数量少.
2.3不同发情阶段对采卵散量的影响在试验中分
经验交流一29一
部分地方鸡种肤色伴性遗传观察
张学余,黄凡美,赵东伟,柱
(江苏省家禽科学研究所,扬州225261) 摘要:试验对泰和璃,仙居鸡,固姑璃,北京油璃,萧山璃,狼山璃(N秉)进行肤色件性
遗传观察.蛄果袁
明:泰和鸡常染色捧上舍有一对黑色素基固"PI"',仙居璃,萧山璃,北京油璃性染色
体上舍有"五d基因,
猿山鸡,固始鸡,泰和鸡性染色体上舍有"id''基因,泰和鸡与舍有Id基因璃种(仙居
璃,萧山璃,北京油
鸡)杂交,代肤色能白别雌雄,套鸡为黄皮肤,母鸡为黑皮肤. 关键词:地方鸡种;肤色;基固;遗传;染色体
中圈分类号:.58312文棘标识码:B文章鳙号:0258—7033{2(301)一位一0O29一位
我国地方鸡种具有许多特殊质量性状.着名 的泰和鸡具有乌皮,乌肉,乌骨等特征.固始鸡,狼山鸡 (N系)具有青腿,青脚的特征,这些色素表现出来的特 征较为复杂.据报道肤色的遗传受酶性伴性基因 id和显性增色基因Fin控制(袁樱,1993)J.进一步探 索泰和鸡与部分地方鸡种肤色伴性性状,对加速培育 乌骨鸡新品系具有关键作用.
本试验目的探讨泰和鸡肤色与部分地方鸡种肤色 的伴性遗传及其相互关系,以期提出适宜肤色纯化方 案.为培育肤色一致的乌骨鸡新品系提出依据. 1材料和方法
1.1试验材料本试验利用本所保存的泰和鸡,仙居 鸡,固始鸡,萧山鸡,北京油鸡,狼山鸡(N系)等鸡种进 行多批次有关组合的正反交试验,并应用部分外来鸡 注:表中标有不同英文字母表示P<13.05,下表同. 别在不同的发情阶段采卵,结果见表3.
裹3不同发情阶段对采集卵母细胞数量的影响 由表3可以看出.发情第7天和第7—15天所获 卵母细胞数和可用卵母细胞数均高于发情当天 (P(0.05).发情当天卵巢上大卵泡的卵泡藏吸出后 形成的凹陷和卵泡膜髟响对其他周围的小卵泡的采 集.
2.4体外受精和胚胎移植试验将活体采卵获得的 卵母细胞进行体外成熟和体外受精培养.卵母细胞分 裂率和桑囊率分别为67.7%和15.2%.在浙江省农 科院畜牧所和山东省农科院生物中心t县实验牛场移 植受体17头,?天妊娠检查怀孕4头,并于1998年7 月14日出生了我国第一头活体采卵牛犊. 3小结
牛活体采卵技术充分利用了优良母膏赍源.能够 保证所获得的胚胎有明确的谱系.本研究采用简易采 卵法收到了很好的采卵效果.但由于条件所限.有关长 期连续采卵和超排处理对采卵效果和卵巢功能的髟响 将在以后的研究中讨论.
参考文献:
[1]f?Mc,at.[J].0_11988-30:751—762.
[2]D.(J].BlmNeMl?.19q'3.1l:10—15.
[3]Sire~lJD.[J].?dR掣d.1995,掘:48"/一494. [4]kmCR-ete1.1JJI,Hi'日d.盯-1994,41:67—72. [5]Km^M.de1.[J].I,Hi'日d.盯,1993.39:251.ahar.
[6]Gibb啊JR.etel_[J].n?l嘲:c雹r.1994,41:2136.抽.
本文档为【牛活体采集卵母细胞技术的研究】，请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑，
图片更改请在作品中右键图片并更换，文字修改请直接点击文字进行修改，也可以新增和删除文档中的内容。
该文档来自用户分享，如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服，我们会及时删除。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生，若发现您的权利被侵害，请联系客服邮件isharekefu@iask.cn，我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权，请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传，仅限个人学习分享使用，禁止用于任何广告和商用目的。
浙公网安备 33021202002483