改良网织纤维染色与粘液套染法
级钎银,凄良,耘液睦
临床与实骚嫡理学杂志.,cf'ath~1993;Dec9{4】'3I7'
0技术交流0
7.}'改良网织纤维染色与粘液套染法 至笙噩R,f占.g
(口川省^氏医院病理科成都610072) 来源于胃肠道等器官粘膜上皮和腺上皮 的小细胞低分化腺癌或未分化癌,与这些粘 膜相关淋巴组织发生的牯膜相关淋巴瘤,在 病理诊断中容易混淆,采雨网织纤维和粘液 染色对鉴别诊断及判断肿瘤组织来源有一定 的帮助.笔者从I989年开始摸索在一张切片 上采用GordonandSweet网织纤维染色改良 法(高碘酸替代高锰酸钾氧化和草酸漂白还 原作用)套染A]cianblue枯液染色,同时显示 两种来源完全不同的组织成分,取得了满意 效果切片染色对比清晰.定位准确,具有明 显可比性,便于光镜下观察.现将
方法
快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载
,结果 及体会介绍如下.
l材料和方法
LI染色前处理按常规进行,下各染色步 骤后均用蒸馏水洗.
L2I高碘酸水溶液氧化3rain. 1.32.5硫酸铁铵农溶液媒染5rain 1.4氢氧化二氧络银液染色30,45s.
1,54中性甲醛水溶液显色2rain 1.60.2氰化金水溶液调色I,2rain. 1.75硫代硫酸钠水溶液固定2rnin. 1.eI阿利新蓝8(3X溶干3醋酸水溶液 (pFI2?5)染色I5,20rain.
L9脱水,透明,封固.
2结果
网织纤维呈黑色;酸性粘多糖呈蓝邑 3体会
3.1高锰酸钾是一种强氧化剂,其水溶液呈 紫红色.它不但能氧化网织纤维中相邻碳原 子同的碳键和二硫键而形成醛基,屙时使除 网织纤维以外其它组织成分有不同程度的破 坏,还能逐渐将所形成的醛基继续氧化成葛 酸,常用草酸漂白还原来加阻断由于-茸锰 酸钾氧化不彻底,经草酸漂白后仍有少量,. 锰酸钾残留在切片上,形成物理性着色,使背 景呈棕黄色而高碘酸是一种性质稳定,具有 IljJ显选择性的氧化剂.其农溶液无色透明,巴 不仅能氧化组织内的碳键而生成醛,还能氧 化经甲醛固定存在于组织内多糖分子中的乙 二醇基,使碳键的多肽链解链生成醛类化合 物乙二醛,暴露组织表面辩离醛基和多糖分 子内的乙二醛基.高碘酸不会继续把所形成 的醛基进一步氧化成按酸.避免了组织内酸 性成分的增加,井能替代高锰酸钾氧化和草 酸漂白还原作用.
3.2粘液主要是由广泛存在于上皮和间质 中的酸性粘多糖和只存在于胃粘膜及十二指
肠勃鲁纳腺中的中性粘多糖所组成中性粘 多糖常用PAS染色反应来显示,但甲醛对中 陛粘多糖染色反应有明显影响.原因是甲醛 在固定组织时虽不与多糖起反应.却与蛋白 质起反应,凝固蛋白质而封闭乙二醛基.尽管 固定组织经水冼后在脱水过程中除去了甲醛 的量,但裱贴切片中甲醛的含量仍接近
I.9.高碘酸虽然能使经甲醛固定存在干组 织内多糖分子中的封闭醛基解链,但同织纤 维染邑时幽于甲醛与氢氧化二氨络银液反应 的生成物羧酸盐与乙二醛基作用所产生的阻 抑作用,造成PAS染色对中性粘多糖反应 强度减弱而着色困难,使醛基"外的葚他物 质(过氧化物等)或非醛基的PAS阳性物质 (还原酶等)着色容易而失去特异性,若再硐 高碘酸氧化电难使受阻抑醛基得反转,使
.3l8?临床与实验崭理学杂志.,prllhol1993IDec9(4)
PAS染色反应呈漫粉红色一片.同时网织 纤维的嗜银性也团银离子可溶于碘液而产生 脱色现象,使网织纤维着色不清呈灰黑色.而 本文介绍的改良法能较好地克服以上缺点, 效果满意.
枣考文献
LP曲rAGE着马仲魁译组织化学.第1卷+制苦与光 学技术.北京;^民卫生出J}5}牡-l985:88一l3O 2P.f^6E着马仲蛀译组织化学.第2卷-
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
技术? 北芽c:中国医药科技出版杜.I990353~.90 3cuIli.gCF^着孔庆雷译组织病理学与组织学技术手
册,北京:科学出黼杜,19822544Z94 4胥维勇.临床与实验病理学杂志,199I{7【2):139 5孙遒恒中华病理学杂恙.I985;1,1(d1:307
1I993年4月l6日收槁,1993年7月l3日垮回) ?技术交流?锄撕鹈隙糯,良,哆
'I~-teidenhain—Azan染色在垂体腺瘤诊断的应用 丝钟思陶7p
脑垂体腺瘤是一神常见的肿瘤组织学 上根据构成肿瘤的细胞种类可分为赚色性细 胞腺瘤,嗜酸性细胞腺瘤和嗜碱性细崛腺瘤 三种.在临床治疗上往往需要将嗜酸性细胞 腺瘤区分为生长素细胞腺瘤和泌乳索细胞腺 瘤.常规HE染色不能分别显示这些细胞, PAS三色法也只能显示嫌色细胞,嗜酸性细 胞和嗜碱性细胞".对肿瘤细胞分泌何神激 素作出判断通常需用免疫组化或电镜方法才 能达到目的,而免疫组化及电镜方法因试剂 昂贵和技术设备等条件限制未能普遍应用. 我们探索应用Heidenhain—Azan特殊染色方 法(简称H—A法)来区分垂体惰酸性细咆艨 瘤的生长素细胞和泌乳索细胞,以协助谚断. 实验证明结果满意.
l材料和方法
1.1材料
采用外检的垂体腺瘤组织,尸解垂体组 织,正常_,(鼠及注射雌激素一个月后的大鼠 垂体组织.组织用Bouin液固定或10甲醛 液固定,常规脱水包埋,石蜡切片3,4m.先 作lie和PAS三邑染色,确定为嗜酸性细胞
腺瘤后再作H—A染色.
1.2染色方法
1.21切片脱蜡到水,蒸馏水稍洗.
12.2入已预热的偶氮卡红G液(偶氡卡 红G0.2g,蒸馏水J00mI加热煮沸约【 rain,冷却后加入冰醋酸Jm1)染『5,30rain.
蒸馏水稍洗.
L2.3入0.『苯胺95酒精液分化至细胞 核呈淡红色约2,5rain.蒸馏水稍洗. 1.24入I醋酸95酒精液Jrain.冼去残 留在切片上的苯胺油.蒸馏7K稍慌. 12.55磷钨酸水溶液J5,30rain.蒸馏 水椭洗.
12.B入苯胺蓝桔黄G醋酸液(苯胺蓝0.『 g,桔黄G2g蒸馏水100mI.沫醋酸5ml加热 煮沸,冷后过滤,用时以蒸馏水稀释,倍.)染 『5,30rain.蒸馏水稍洗.
1.2.7常规脱水透明,中性树胶封固. 2染色结果与体会
H—A染色是胶原纤维的优良染色法,也 可用于区分细胞的特殊颗粒.如脑垂体前叶 蛐胞和胰岛的",,y细胞.我们探索发现 此法可用于区分生长煮细胞和泌乳素细胞 生长素细胞染成红色或桔红邑,泌乳素细胞 Bl
浙公网安备 33021202002483