毕业论文《食品中的环己基氨基磺酸钠含量的测定研究》

毕业论文《食品中的环己基氨基磺酸钠含量的测定研究》 目 录1 引言....................................................12 实验部 分................................................22.1 实验原理与测定范围....................................22.2 实验试剂与仪器........................................22.2.1 实验试 剂............................................22.2.2 实验仪器............................................22.3 分析步骤..............................................32.3.1 试样处理............................................32.3.2 试样制备............................................32.3.3 色谱分析条件........................................32.3.4 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线的绘制......................................42.3.5 空白实验............................................42.3.6 结果讨论............................................52.4 讨论..................................................83 结论...................................................10致谢.....................................................11参考文献.................................................12 1 引 言 甜蜜素又称为环己基氨基磺酸钠(Sodium cyclamate)，其分子式为C6H11NHSO3Na， 结构如下: 环己基氨基磺酸钠是一种水溶性的新型甜味剂，它的甜度是蔗糖的 3040倍，甜味自然。由于其价廉、甜度高，在食品中多做为蔗糖的代用品，无营养价值。但长期食用甜蜜素含量超标的食品会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老者危害更明显。 1969 年之前，甜蜜素被公认为安全物质。1969 年美国国家科学院研究委员会收到有关甜蜜素为致癌物的实验证据，美国食品与药物管理局(FDA)为此立即发布 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 严格限制使用，并于 1970 年 8 月发出了全面禁止的命令。1982 年 9月，Abbott 实验室和能量控制委员会在大量试验事实的基础上，以最新的研究事实证明甜蜜素的食用安全性，许多国际组织也相继发 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 大量评论明确表示甜蜜素为安全物质，但 FDA 至今还没有最终解决这个问题。尽管如此，目前仍有许多国家(包括我国)继续承认甜蜜素的甜味剂地位，允许甜蜜素的使用。 从毒理学评价来看，甜蜜素的 ADI日允许摄入量仅为 01l mg/kg 体重/日，为此国家制定了强制性标准，亦是食品日常监督检测的项目之一。根据我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB 2760-1996)的规定，“甜蜜素”可以作为甜味剂，其使用范围为: 一(酱菜、调味酱汁、配置酒、糕点、饼干、面包、雪糕、冰淇淋、冰棍、 饮料等，其最大使用量为 0.65g/kg; 二(蜜饯，最大使用量为 1.0g/kg; 三(陈皮、话梅、话李、杨梅干等，最大使用量 8.0g/kg。 在实际生产中，食品是甜蜜素广泛使用的领域之一，本方法就是对食品中甜蜜素含量的一种测定方法，它基于甜蜜素能在酸性介质中与亚硝酸钠反应，所衍生成的环己醇亚硝酸酯经正己烷抽提后可用气相色谱直接进样测定。方法的回收率为 95.5,105.6,能满足微量分析的要求。 2 实验部分2.1 实验原理与测量范围2.1.1 原理 在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应，生成衍生物环己醇亚硝酸酯，利用气相色谱法进行定性和定量分析。从而测定出食品中的环己基氨基磺酸钠含量。2.1.2 测量范围 本方法适用于酱菜、饮料、凉果等食品中的环己基氨基磺酸钠的测定。本实验是测定酱菜中的环己基氨基磺酸钠。2.2 实验试剂与仪器2.2.1 试剂2.2.1.1 正己烷(色谱纯)2.2.1.2 氯化钠(分析纯)2.2.1.3 层析硅胶(海沙)2.2.1.4 50g/L 亚硝酸钠溶液 :取 (现配现用) 称 25g 亚硝酸钠，用水定容至 500mL2.2.1.5 100g/L 硫酸溶液:称取 50g 浓硫酸，用水定容至 500mL2.2.1.6 环己基氨基磺酸钠标准溶液(含环己基氨基磺酸钠，98):精确称取1.0000g 环己基氨基磺酸钠，加入水溶解并定容至 100mL，此溶液中甜蜜素的浓度为 10.00mg/mL，即为 10.00mg/mL 标准储备液。2.2.1.7 本法中所用水均为去离子交换水(符合 GB6682 中—级水的规格)2.2.2 仪器2.2.2.1 气相色谱仪(Agilent 公 司):FID 检测器(附氢火焰离子化检测器)，配备 7683 自动进样器和增强型化学工作站2.2.2.2 漩涡混合器2.2.2.3 离心机(6500r/min)2.2.2.4 10uL 微量注射器2.2.2.5 粉碎机2.2.2.6 100mL 具塞大试管2.3 分析步骤2.3.1 试样处理 榨菜需将其用粉碎机粉成糊状，再制成试样。2.3.2 试样制备 准确称取 10.00g 已粉碎的包装榨菜试样于研钵中，加少许层析硅胶研磨至粉状，经漏斗倒入 100mL 容量瓶中，加水洗研钵，并将洗液一并转移至容量瓶中。加水至刻度，不时摇动，1h 后过滤，即得试样，准确吸取 20mL 于 100mL具塞比色管置于冰水浴中。与此同时准确移取 20mL 水于同等大小的具塞比色管中置于冰水浴中，同样 1h 后，备做空白实验所用。 另外，准确称取 10.00g 已粉碎的包装榨菜试样于研钵中，加环己基氨基磺酸钠标准溶液 1mL 100mg/L 再加少许层析硅胶研磨至粉状，经漏斗倒入 100mL容量瓶中，加水洗研钵，并将洗液一并转移至容量瓶中。加水至刻度，不时摇动，1h 后过滤，即得加标试样，准确吸取 20mL 于 100mL 具塞比色管置于冰水浴中备用。2.3.3 色谱分析条件2.3.3.1 毛细管色谱柱:30m×0.25mm×0.25m膜厚;2.3.3.2 进样 ?，脉冲不分流进样;2.3.3.3 载气:高纯氮气(纯度 99.999)，流速 口温度 200 1.0mL/min;程序升温:50?，保留时间 0.75min，以 45?/min 升温至 95?，保留时间 1min，再以 40?/min 升至 115?，保留时间 0.5min，再以 30?/min 升至 145?，保留时间 1.25min，全部程序时间 6.0min;2.3.3.4 FID 检测温度 220?;流速:氢气 30mL/min;空气 400mL/min;补偿气:氮气流速为 35mL /min;自动 2.3.4 标准曲线的制备 准确吸取 1.00mL 环己基氨基磺酸钠进样，进样量为 1L。 标准溶液于 100mL 具塞比色管中，加水20mL 置冰水浴中，加入 5mL 50g/L 亚硝酸钠溶液，5mL 100g/L 硫酸溶液，摇匀，在水浴中放置 30min，并经常摇动，然后准确加入 10mL 正己烷，5.0gNaCl，摇匀后置漩涡混合器上旋振 2min，待静止分层后析出己烷层于 10mL 具塞离心管中放入离心机进行离心分离，1mL 正己烷提取液相当于 1mg 环己基氨基磺酸钠。标准提取液进样 1μL 与气相色谱仪，绘制标准曲线图 1(标准为 0.1mg/mL)。 FID1 A D:AGILENTDATA20094YUE090422-TMS090422-TMS 2009-04-22 17-32-24TMS-BZ2.DpA180 4(911 甜蜜素160140120100 5.02960 4.365 4.769 40 4.25 4.5 4.75 5 5.25 5.5 5.75 6 min/t 图1 环己基氨基磺酸钠的标准曲线(100 mg/L) 结论:图 1 中最高峰为环己基氨基磺酸钠的含量，保留时间为 4.911min。2.3.5 空白实验 在 100mL 具塞比色管中加水 20mL 置冰水浴中，加入 5mL 50g/L 亚硝酸钠溶液，5mL 100g/L 硫酸溶液，摇匀，在水浴中放置 30min，并经常摇动，然后准确加入 10mL 正己烷，5.0gNaCl，摇匀后置漩涡混合器上旋振 1min或振摇 80 次，待静止分层后析出己烷层于 10mL 配塞离心管中放入离心机进行离心分离，空白液进样 1μL，测得响应值，绘制图谱。 FID1 A D:AGILENTDATA20094YUE090422-TMS090422-TMS 2009-04-22 17-32-24731.DpA1801601401201008060 4.366 4.48240 4.25 4.5 4.75 5 5.25 5.5 5.75 6 min/T 图 2 空白实验中环己基氨基磺酸钠色谱图 结论:图 2 中，在保留时间为 4.911min 时，没有明显高峰，则说明在空白样液中甜蜜素的含量为 0mg/mL。2.3.6 结果讨论2.3.6.1 试样测定 试样管加入 5mL 50g/L 亚硝酸钠溶液，5mL 100g/L 硫酸溶液，摇匀，在水浴中放置 30min，并经常摇动，然后准确加入 10mL 正己烷，5.0gNaCl，摇匀后置漩涡混合器上旋振 1min或振摇 80 次，待静止分层后析出己烷 层于 10mL 配塞离心管中放入离心机进行离心分离，每毫升正己烷提取液相当于 1mg 环己基氨基磺酸钠，标准提取液进样 1μL，测得响应值，得出试样的甜蜜素含量。 平行测定 2 个样品。 FID1 A D:AGILENTDATA20094YUE0428-TMS090428-TMS 2009-04-28 18-33-35BZ3.DpA180 4.9181601401201008060 4.367 5.035 4.77440 4.25 4.5 4.75 5 5.25 5.5 5.75 6 min/T 图 3 试样 1 的甜蜜素含量图谱 图 结论: 3 中最高峰为试样 1 的环己基氨基磺酸钠的含量(即甜蜜素的含量)。保留时间:4.918min，锋面积:903.97pAS，甜蜜素含量:502.78mg/L。 FID1 A D:AGILENTDATA20094YUE0428-TMS090428-TMS 2009-04-28 18-33-35BZ3.DpA180 4.9171601401201008060 4.367 5.035 4.77440 4.25 4.5 4.75 5 5.25 5.5 5.75 6 min/T 图 4 试样 2 的甜蜜素含量图谱结论:图 4 中最高峰为试样 2 的环己基氨基磺酸钠的含量(即甜蜜素的含量)。保留时间:4.917min，锋面积:903.97pAS，甜蜜素含量:502.78mg/L。2.3.6.2 试样加标回收 为了评价方法的准确性，通过在样品中添加了 1mL、100mg/L 环己基氨基磺酸钠标准溶液，计算回收率。回收率是通过比较在实验值和理论添加值得到的。操作如下: 向加标试样管加入 5mL 50g/L 亚硝酸钠溶液，5mL 100g/L 硫酸溶液，摇匀，在水浴中放置 30min，并经常摇动，然后准确加入 10mL 正己烷，5.0gNaCl，摇匀后置漩涡混合器上旋振 1min或振摇 80 次，待静止分层后析出己烷层于 10mL配塞离心管中放入离心机进行离心分离，每毫升正己烷提取液相当于 1mg 环己基氨基磺酸钠，标准提取液进样 1μL，测得响应值，得出加标试样的甜蜜素含量。 FID1 A D:AGILENTDATA20094YUE090422-TMS090422-TMS 2009-04-22 17-32-24743H.D pA 4.918 - 180 甜蜜素 160 140 120 5.033 100 80 4.368 4.773 5.126 60 4.629 4.988 4.468 4.546 40 4.25 4.5 4.75 5 5.25 5.5 5.75 6 min 图5 试样的甜蜜素回收含量图谱 图 结论: 5 中最高峰为加标试样的环己基氨基磺酸钠的含量(即加标后甜蜜 。素的含量) 保留时间:4.918min，锋面积:903.97pAS，甜蜜素含量:592.26mg/L。2.3.6.3 计算公式 试样中环己基氨基磺酸钠的含量为 式中: X——试样中环己基氨基磺酸钠的含量，g/kg; m——试样质量，g; V——进样体积，L; 10——正己烷加入量，mL; A——测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量，g。2.3.6.4 数据处理 表 1 试样中甜蜜素的计算 试样质量 进样体积 正己烷加入 测定的甜蜜素质 g/kg) 标样 10.00 1 10.00 100.00 试样中甜蜜素 试样 g L 量(mL) 量(mg/L) 含量( 100.00 空白 0.00 1 10.00 0.00 0.00 试样 1 10.00 1 10.00 503.95 503.95 试样 2 10.00 1 10.00 502.78 502.78 回收 10.00 1 10.00 592.26 592.26结论:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的相对极差为 2.3在允许范围2.2,8.2内.，国标规定标准为 650g/?测定结果平均值为 503.36g/?符合国标规定值。2.3.6.5 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值 10。 表 3.精密度实验结果(n4) W甜蜜素 样品号 1 2 3 4 Average RSD 结果 590 603 591 612 599 0.0372.3.6.6 回收率 取样品 10.00g，加入不同浓度的甜蜜素标准溶液，测定加标回收率， 结果见表 3。 表 3. 回收率测定结果 测定序号 加入量mg/L 测定量 回收率 1 0.02 0.0191 95.5 2 0.05 0.0517 103.4 3 0.08 0.0778 97.4 4 0.10 0.1046 104.6结论:回收率在 95.5,104.6，符合国标规定标准，证明使用气相色谱法测定甜蜜素含量的方法准确可靠。2.3.7 讨论2.3.7.1 试剂的纯度对测定的影响 本实验中， 亚硝酸钠和正己烷的纯度对实验结果影响较大。应采用没有变质的分析纯以上的亚硝酸钠， 正己烷也应使用色谱纯试剂或重新蒸馏。使用纯度不高或久存变质的试剂， 会造成提取液进毛细管色谱柱测定时出现许多杂峰，导致无法分辨所需的待测物峰。2.3.7.2 标准溶液及正己烷提取液的稳定性 标准溶液使用时应现用现配，正己烷提取液最好在两天内测定。因为随着天数的增加，出现的杂峰也随之而增加。2.3.7.3 分流进样中载气比的选择 将含有 0.05mg 甜蜜素的样品提取后，在分流比为 1:1，5:1，10:1 的条件下分别测定。当分流比为 10:1 时，溶剂峰信号大大降低，而待测物的峰面积近乎不变;此条件下仍可检测出低含量样品。2.3.8 结论 RSD 为 本方法测食品中的环己基氨基磺酸钠可行， (相对极差) 2.2,8.2，回收率为 95.5,104.6，本实验与 GB/T5009.97—2003 食品中环己基氨基磺酸钠的测定方法相比， 本方法符合标准。 并且可以看出本方法分辨率高，灵敏度高，准确可靠。 致 谢 岁月如梭，不知不觉我即将走完大学生涯的第三个年头，回想这一路走来的日子，父母的疼爱关心，老师的悉心教诲，朋友的支持帮助一直陪伴着我，让我渐渐长大也慢慢走向成熟。 本文从拟定题目到定稿，历时数十日。在本毕业论文即将结束之际，我在这里要特别感谢三年来给予我帮助和支持的老师及同学。首先，要感谢我的指导老师路蕴老师在这次论文设计中她细心指导，在此向我的导师路蕴老师致以诚挚的谢意。在论文的写作中，路老师给了我许许多多的帮助和关心。其次，要感谢我校领导及化医中心的全体老师，他们在这次论文完成过程中给予的大力支持。 再次，我要感谢我们学院给我们授课的各位老师，感谢重庆出入境检验检疫局的各位老师及师傅们在我毕业论文写作中，与他们的探讨交流使我受益颇多，他们也给了我很多无私的帮助和支持，我再次深表谢意。参考文献1 中华人民共和国国家标准(食品中环己基氨基磺酸钠的测定方法 GB/T5009.97—2003) 北京.中国标准出版社，20032《现代食品分析新技术》化学工业出版社化学与应用化学出版中心陈家华.方晓明.朱坚 等编著3GB2760-1996 中华人民共和国国家标准.食品添加剂使用卫生标准4《食品分析》 金明琴主编.北京.化学工业出版社.2008.105 《气相色谱法测定食品中甜蜜素》文君.王宣俊6 《过量添加甜蜜素，甜甜蜜蜜伤害你》李青山.顾艳伟.中国消费者报.2004指导教师评语: 指导教师签字: 时 间:毕业考核委员会评语: 时 间: