255_清喉利咽口服液的研制

255_清喉利咽口服液的研制 清喉利咽口服液的研制 袁天祥 王林泉 陈荣 王喜蜂 王效珍 金关键 武警河南总队医院，河南郑州450052 摘要 目的:研制清喉利咽口服液并制订质量控制 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。 方法:采用薄层 .34%，扫描法测定山豆根所含氧化苦参碱的含量。结果:结果加样回收率为98 -l RSD=3.77%,苦参碱在3.1,12.9mg?ml浓度范围内呈现良好的线性关系, =42.90x+22.331 ,=0.9997。结论:检验方法快捷简便,该制剂质量可控。 关键词: 清喉利咽口服液 ; 氧化苦参碱; 薄层扫描法 Preparation of QinghouLiyan Oral Liquid YUAN Tian-xiang WANG Lin-quan CHENG Rong WANG Xi-feng WANG Xiao-zhen JIN Guan-jian (Henan Provincial Corps Hospital，Chinese People’s Armed Police Force，Zhengzhou 450052，China) Abstract: [Objective] To obtain the preparation of QinghouLiyan and make the quality standards for it. [Methods] The content of Oxymatrine in Sophora subprostrata was determined By TLCS. [Results] The recovery of the samples was 98.34% with RSD of 2.5% and the concentration of Oxymatrine that ranged . -1 . -1 from3.1mgmlto12.9 mgmlshowed good line correlativity.,=42.90x+22.331 (r=0.9997). [Conclusion] the method is simple and accurate for the quality control of Liyan Oral Liquid. Key words: Qinghouliyan Oral Liquid; Oxymatrine; TLCS 清喉利咽口服液,是我院研制的治疗口腔炎、急慢性咽炎、扁桃体炎的中药 制剂，由金银花、山豆根、玄参、射干、麦冬、生地等8味中药组成，经多年 临床应用证明，疗效确切，毒副作用小。苦参碱为君药山豆根的主要有效成分 之一。本文用薄层扫描法对苦参碱进行定量分析。有效地控制清喉利咽口服液 的质量。为该制剂制定了质量控制标准。 - 1 - 1 仪器及试药 1.1 仪器 岛津CS9301PC型双波长薄层扫描仪(日本); 定量点样毛细管(美国);电光分析天平TG3288 (国产)。 1.2 试剂及药品 试剂均为分析纯。硅胶,(青岛海洋化工厂，薄层层析用); CMC-硅胶H(青岛海洋化工厂);苦参碱和氧化苦参碱对照品、山豆根对照药材 (中国药品生物制品检定所)其它药材(郑州市中药材公司);清喉利咽口服液(自制) 2 制备 2.1 药物组成 金银花，山豆根，玄参，射干，麦冬，生地，薄荷，甘草等。 2.2 药物提取 2.2.1 取射干粗粉，用80%乙醇, 进行回流提取2次，每次提取90 min，备用。 2.2.2 二花、薄荷浸润后用水蒸气蒸馏至无芳香味，收集流出液，然后将蒸馏后的母液和药渣与甘草, 麦冬, 玄参等药合并，加适量蒸馏水。第1次煎煮1.5h，第2次煎煮1.5h，第3次煎煮1h。合并煎液，加入适量澄清剂，放置后过滤，滤液浓缩，浓缩至适量, 备用。 2.2.4 煎煮 取处方其余药材加水适量，煎煮2次，分别为2，1.5,。合并2次煎液，浓缩至1?1, 冷却至室温， 缓缓加入乙醇使含醇量达45%, 静置24,, 过滤。滤液回收乙醇至无醇味备用。 2.2.5 制备 合并所有滤液, 加水至刻度，过滤，经检验合格后灌装于10ml口服液瓶中，封口，100?流通蒸汽灭菌30min, 即得。 3 质量标准 3.1 定性鉴别 3.1.1 金银花的鉴别 金银花对照品溶液的制备 取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，备用。 金银花供试样品和金银花阴性对照品溶液的制备 取合剂20ml后，置水浴上蒸干，加甲醇5ml搅拌，放置12,，过滤，滤液备用。 - 2 - 取金银花供试品、对照品、阴性对照品10μl点样于,,,—硅胶,薄层板上,以醋酸丁酯—甲酸—水(7?2 .5?2 .5) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下(365nm)下检视。供试品与对照品相应的位置上显现相同颜色的斑点;阴性对 [1]照品溶液在相应的位置无。 3.1.2山豆根的鉴别 取合剂20ml后，置水浴上蒸干，加三氯甲烷10ml，加氨试液0.2ml，振摇15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5ml使溶解，作为供试品溶液，备用。 以不含山豆根的制剂同法制备阴性对照液。另取苦参碱和氧化苦参碱对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含1mg的对照品溶液。吸取供试品溶液和阴性对照液各6μl与对照品溶液6μl，分别点于同一CMC-硅胶,薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨水(4?1?0.1)为展开剂，展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同橙黄色的斑点;在与氧化苦参碱对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的斑点出现。 3.1.3 玄参的鉴别 取合剂20ml后，置水浴上蒸干，加甲醇10ml搅拌，放置1,，过滤，滤液备用。另取哈巴苷和哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录?,)试验，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各3μl，对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶,薄层板上，以正丁醇-醋酸-水 (7?1:2)为展开剂，用展开剂饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点。阴性对照无干扰。 3.1.4 射干的鉴别 样品液:取本品20 ml，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至1.5 ml，供试。对照药材液:取射干对照药材1,，同法制成对照药材溶液。薄层色谱:吸取上述2种溶液各1µl，分别点于同一聚酰铵薄膜上，以氯仿-丁酮- 甲醇 (3?1?1) 为展开剂，展开，取出，晾干。喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试色谱中，在与对照药材色谱在相应位 置上，显相同颜色的荧光斑点。 3.1.4 生地黄的鉴别 样品液: 取本品20,l，蒸干，加甲醇20ml使溶解，加热回流1小时，放冷，过滤，浓缩至5ml，作为供试品溶液，备用。 取梓醇对 - 3 - 照品，加甲醇制成0.5mg/ml溶液作为梓醇对照品溶液。薄层色谱:吸取上述2种溶液各5µl，分别点于同硅胶,薄层板上，以氯仿-甲醇-水(14?6?1) 为展开剂，上行展开，展距15cm，用10%回香醛试液在105?加热至斑点显示清晰。 供试品色谱与对照药品色谱在相应位置上，显示同样色斑。 3.1.5 麦冬的鉴别 供试品溶液的配备:取本品20,l，加三氯甲烷-甲醇(7;3)混合溶液20ml，浸泡3小时，超声处理30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5ml使溶解，作为供试品溶液，备用。 对照生药材溶液的制备:取麦冬对照药材2g，按供试品溶液的制备方法制成对照生药材溶液。 阴性对照溶液的制备:按处方比例制成缺麦冬的样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。薄层层析:分别吸取供试液、对照生药材液、阴性对照液各10μl，分别点于同一硅胶GF薄层板上，以甲苯-甲醇-冰醋酸(80:5:0.1)为展开254 剂，展开后，取出晾干，置紫外灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照 [1]药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。阴性对照无相应的斑点。 3.2 方法与结果 3.2.1薄层层析与扫描条件 以0.2%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶,薄层板;以氧仿-甲醇-浓氨试液(4:1:0.1)为展开剂，预饱和30min后展开，取出，晾干,喷以稀碘化铋钾试液，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定, ,测定波长:λs=520nm,λ,=650nm;线性化参数Sx=3;光束狭缝:0.4mm×0.4mm。λs=520nm，λR=650nm，照薄层色谱法进行扫描。 3.2.2供试品溶液及对照品溶液的制备:精密吸取本品20,l置蒸发皿中蒸干。残渣置索氏提取器中用无水乙醇-浓氨试液(3:2)1,l湿润，30分钟后，加氯仿80,l,加热回流提取4小时，提取液回收氯仿并浓缩至干，残渣用甲醇溶解并移至5,l容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照品溶液的制备:精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的氧化苦参碱对照品,加甲醇制成每1,l含1,g的溶液,即得。 3.2.3方法:吸取供试品溶液6μl与对照品溶液2与4μl，分别交叉点于同一CMC-硅胶,薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨水(4?1?0.1)为展开剂，展开，晾干， - 4 - 喷以稀碘化铋钾试液。吸取供试品溶液3μl。对照品溶液2μl与4μl分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶,薄层板上，以氧仿-甲醇-浓氨试液 :0.1)为展开剂，预饱和30min后展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试(4:1 液在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描。λs=520nm,λR=650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。 3.2.4标准曲线:精密吸取氧化苦参碱对照品溶液(0.6341mg/ml)1，2，3， 4，5μl点于自制的同一硅胶,薄层板上，以正文“含量测定”项下方法测定，结果见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1。 表1　标准曲线 点样量(μl)μ,峰面积 10.634147.986 21.299978.394 31.841198.986 42.3954120.998 52.9898147.988 以浓度(μg)对峰面积(,)作图得回归方程为:,=41.82x+22.25 ,=0.9995 3.2.5 加样回收试验:取与重现性试验同一批号样品5份各25.0ml,分别加入氧化苦参碱对照品溶液(0.3994,g/ml )5.0,l，按含量测定项进行提取测定结果见表2。 表2 回收率试验 批号:20040808 样品氧 ,,,试验样品量化苦参加入量测得量回收率平均回 次数(mL)碱含量(mg)(mg)(%)收率(%)(%) (mg)2.5351.9974.43595.14 125.02.5351.9974.46796.75 225.0 2.5351.9974.626104.7198.343.77325.0 2.5351.9974.47597.15 425.0 2.5351.9974.49197.95 525.0 3.2.6 含量测定 10批样品按正文测定方法测定，含量测定以面积积分值对苦参 - 5 - 碱浓度绘制标准曲线，结果见表3。 表3 样品的含量 含量%(mg/ml)均值%批号面积积分12(mg/ml) 110.3310.3810.36653.880 25.535.485.51422.196 35.986.026.00437.560 47.997.987.99542.382 511.5611.5411.55711.470 67.597.567.58516.732 78.588.58.54564.692 86.986.966.97486.691 97.287.487.38506.238 109.439.529.48608.364 回归方程:,=143.32+49.32,，,=0.9995。RSD=2.50%,结果表明:苦参碱在 -l2.08,13.92mg?ml浓度范围内呈现良好的线性关系。 含量测定限度: 10批样品测定结果平均值为8.135%(mg/ml)，下浮20%，8.13×80%=6.50。故暂定为每100,l中含山豆根以氧化苦参碱(,,,,)计，152422不得少于6.50mg。 3.2.7 精密度试验:分别取同一供试液2μl,重复点于同一自制的硅胶,薄层板上，依法操作, 连续测定5次， RSD =1.76%。 3.2.8 重现性试验:取同一批号样品5份，按含量测定项进行提取，测定结果RSD =3.36%。 4 讨论 4.1本实验果表明:用薄层扫描法测定清喉利咽口服液中氧化苦参碱的含量，方法简便、快速、重现性好。 4.2 乙醇用量和乙醇浓度对射干中总黄酮的提取有非常显著性和显著性影响,优选药材8倍量80%乙醇，每次提取90min为最佳。 作者简介 袁天祥 1965.2 河北原阳人 主管药剂师 主要从事医院药物制剂研究 - 6 - 5 参考文献 1 中国药典[M]，一部，2005版，北京:化学工业出版社，20~235 2 徐叔云、卞如濂、陈修主编，药理实验方法学[M]，第一版，北京,人民卫生出版社，1982,363~379. - 7 -