HE染色步骤
1( 将于60?烤箱中的烤片取出后立即放入二甲苯?(透明)中15min，若切片已放置已久，
则在浸二甲苯之前需将切片在60?烤箱中烤2h以上;
2(将切片于二甲苯?15min，应观察到组织切片呈透明状，否则继续浸于二甲苯中; 3(切片浸于1/2酒精+1/2二甲苯5min;
4(将切片从二甲苯中取出稍甩掉二甲苯，于梯度乙醇中脱去二甲苯:无水乙醇?5min?无水乙醇?5min ?95%酒精5 min?90%酒精5min?80%酒精5min?70%酒精5min; 5(切片从70%酒精取出后稍冲洗:浸洗于蒸馏水?5min ?蒸馏水?5min; 6(蒸馏水浸洗后稍甩干水分用苏木精染色约15min;
7(苏木精染色后用自来水冲洗(稍洗);
8(冲洗后用1%盐酸酒精(99毫升70%酒精+1毫升浓HCl)镜检分化，操作时可以按先浸10S后用自来水稍冲洗，吸水纸吸掉水珠后镜检，若观察到细胞质部分染色很浅而核仍较深则自来水冲洗约15分钟(时间可为几分钟至1小时不等，以充分洗掉HCl)，否则分化不全时则继续学浸于盐酸酒精中至20S、30S等直至达到满意染色。
9(冲洗后判断染色，浸入1%氨水酒精(99毫升70%酒精+1毫升浓氨水)迅速(约几s至半分钟不等，不同的组织情况不同，需进行摸索)取出用蒸馏水冲洗后于蒸馏水?(3min) ?蒸馏水?(3min);
10(甩干水分，1%伊红(水溶性伊红Y 1g溶于100毫升85%酒精)染色约3min，若着色困难可在每100毫升染液中加入1,2滴冰醋酸，使易着色且不易脱色;
11(70%酒精稍冲洗切片将伊红洗掉，之后则梯度乙醇浸洗(脱水作用):70%酒精(1 min) ?80%酒精(1min) ?90%酒精(3min) ?95%酒精(2min) (此段时间应尽量缩短，因伊红易在95%酒精中脱色)?无水酒精?(5min) ?无水酒精?(5min) ;
12(1/2二甲苯+1/2酒精(5min) ?二甲苯?(5min) ?二甲苯?(15min); 13(将染色完成的切片取出，确保二甲苯未干燥，迅速用移液枪吸取树胶滴在组织上，盖上盖玻片，待凝固后观察结果。封片树胶浓度要适中，过稀易出现大气泡、溢胶污染切片, 影响观片。过稠易出现后薄不均、折光差，及细小气泡。封固过程中， 最好直接从二甲苯中取出封片，保持二甲苯不挥发，避免组织大片破裂。
注:
1( 在透明时，应随时将二甲苯瓶对准座灯灯光或阳光观察组织块是否透明。为加速透明可
在恒温箱内进行(不能超过40?);二甲苯也应定期更换，否则二甲苯吸入微量水，水居于二甲苯下部，使组织块又吸水，影响浸蜡;为除掉二甲苯中微量的水，也可将装有无水硫酸铜的玻璃管放入装有二甲苯的瓶中[aj(当配制二甲苯无水酒精混合液时出现雾状混浊，即可证明二甲苯中混有水)。
不可使蜡箱温度过高。 2( 浸蜡箱的温度比蜡的熔点高2~3?即可.
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