HPLC法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的含量

HPLC法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的含量 HPLC法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康 唑和醋酸曲安奈德的含量 --—— 946--——药物分析杂志ChinJPharmAnal2005,25(8) HPLC法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的含量 孙丽 (河南省药品检验所郑州450003) 摘要目的:建立高效液相色谱法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康唑和醋酸曲安奈 德含量的方法.方法:用ZORBAXSB— C.8(4.6IBm×250mill,5m)色谱柱,以甲醇一乙腈一0.5%醋酸铵溶液(43:43:14)为流 动相,流速为1.1mL?min,,柱温为 25?,检测波长为235nm.结果:硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的保留时间分别为 8.6min和3.6min;理论板数分别为11400 和9100;HPLC法测定的线性范同分别为10,200g?mL(r=0.9999)和1, 20g?mL(r=0.9999).本方法的精密度 和稳定性良好,RSD<2%.结论:本法简便,快速,准确,可靠,用于曲咪新乳膏中硝 酸咪康唑和醋酸曲安奈德的含量测定. 关键词:曲咪新乳膏;硝酸咪康唑;醋酸曲安奈德;高效液相色谱法 H]E'LCSimultaneousDeterminationofTriamcinoloneAcetonideAcetate andMiconazoleNitrateinTriamcinoloneAcetonideAcetate, MiconazoleNitrateandNeomycinSulfateOintment SUNLi (HenanInstituteforDrugControl,Zhengzhon450003;China) Abstract0bjective:ToestablishanHPLCmethodfordeterminationoftriamcinoloneacetoni deacetateandmi. conazolenitrateintriamcinoloneacetonideacetate,miconazolenitrateandneomycinsulfate ointmentatthesame time.Methods:Thecolumn:ZORBAXSB— Cl8(4.6mmx250mm,5Ixm);Themobilephase:methanol—acetoni. trile一0.5%acetatesolution(43:43:14);Theflowrate:1.1mL?min, 9?Thecolumntemperature:25?9?Thede. tectionwavelength:235nm.Results:Theretentiontimesformiconazolenitrateandtriamcinoloneacetonideacetate were8.6minand3.6minwiththeoreticalplateswere11400and9100,respectively.Thereweregoodlinearrela- tionshipwithintherangeof10—200Ixg?mL(r=0.9999)and1— 20Ixg?mL(r=0.9999).Theprecision andrepeatabilityofthemethodwasgood,RSD<2%.Conclusion:Themethodisconvenient,rapid,accurateand reliableandmaybeadoptedforassayoftriamcinoloneacetonideacetateandmiconazolenitrateintriamcinolone acetonideacetate,miconazolenitrateandneomycinsulfateointment. Keywords:triamcinoloneacetonideacetate,miconazolenitrateandneomycinsulfateointment9?miconazolenitrate9? triamcinoloneacetonideacetate9?HPLC 曲咪新乳膏是复方软膏制剂,曾用名:脚癣净霜 剂,皮康霜,主要用于抗真菌.国家药品标准采 用比色法只测定软膏中醋酸曲安奈德的含量,提取 过程烦琐,操作中极易产生误差;有文献报道也 是只测定醋酸曲安奈德的含量.本文采用高效液相 色谱外标法同时测定曲咪新乳膏中硝酸咪康唑和醋 酸曲安奈德2种成分的含量.试验结果表明,本文 条件能使主成分提取完全,操作简便,快捷,重复性 好,精密度高,为该品种的质量标准进一步修订提供 了依据 1仪器与试剂 Agilent1100四元系统高效液相色谱仪9?PE公 司uv/VIsLambda35分光光度计. 曲咪新乳膏(10g中含硝酸咪康唑100mg,醋 酸曲安奈德10mg)样品3批,曲咪新乳膏空白基质 加处方量的硫酸新霉素(其成分为单硬脂酸甘油 脂,十六一十八醇,液状石腊,甘油,三乙醇胺,吐温 80,纯化水等按处方比例配制而成),硝酸咪康唑和 醋酸曲安奈德对照品均由中国药品生物制品检定所 提供,批号分别为:0213—9502和0125—9302.乙 药物分析杂志ChinJPharmAnal2005,25(8) 腈和甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯. 2色谱条件 色谱柱:Agilent公司的ZORBAXSB—C.8柱 (4.6mm×250mm,5m),流动相:甲醇一乙腈一 0.5%醋酸铵溶液(43:43:14),流速:1.1mL? rain,,检测波长:235nm,进样量:20,柱温:25 ?,在该色谱条件下,硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的 保留时间分别约为8.6min和3.6min,理论板数分 别为11400和9100.色谱图见图1. 3 图1对照品(A),样品(B),不加样品的溶液(C)色谱图 Fig1Chromatogramsofchemicalreferencesubstances(A),sample(B) andsolutionwithouttestingcomponents(C) 1.溶剂(solvent)2.醋酸曲安奈德(triamcinoloneacetonideacetate) 3.硝酸咪康唑(miconazolenitrate) 3波长选择 取硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德对照品适量,分 别用流动相溶解并稀释制成100Ixg?mL及l0g ?mL的溶液,用紫外分光光度计,在200,300nm 波长范围内扫描,硝酸咪康唑及醋酸曲安奈德分别 在230nm及240nm的波长处有最大吸收.另取此 2个对照品溶液.照上述色谱条件,分别在检测波长 230,235,240nm处进行测定,结果:以230nm为检 测波长时,醋酸曲安奈德与硝酸咪康唑的检出量比 (以峰面积计)为1:10,比例差别较大;以240nm为 检测波长时,两者的检出量比为1:0.68,硝酸咪康 唑的检出量大大减少;以235nm为检测波长时,两 者的检出量比为1:3.5,比较合适,图形也好看,故 确定235nm为检测波长. 4空白试验 按处方比例配制软膏空白基质,照样品测定项 下供试品溶液的制备和测定方法进行测定,结果表 明,基质等其他成分均不干扰测定.色谱图见图1. 5线性关系 精密称取60?减压干燥20h的硝酸咪康唑和 醋酸曲安奈德对照品分别约100mg和10mg,同置 100mL的量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇 匀,作为对照品储备液,分别精密量取储备液0.5, 2.5,5.0,7.5,10.0mL,分置50mL量瓶中,加流动 相稀释至刻度,摇匀.按上述色谱条件进行测定.得 到峰面积A与浓度c(Ixg?mL..)的线性回归方程. 结果表明,硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德浓度分别在 l0,200g?mL和1,20g?mL范围内,均与 峰面积呈良好的线性关系.回归方程分别为: A=l1.3l5C+26.33lr=0.9999 A=32.588C+0.58lr=0.9999 6精密度试验 在上述色谱条件下,取线性关系项下的同一对 照品溶液(硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的浓度分别 为100Ixg?mL和l0Ixg?mL),连续进样6 次,其峰面积积分值的RSD均为0.2%. 7稳定性试验 在室温条件下,将同一供试品溶液放置0.0. 2.0,4.0,8.0,24.0h,照上述色谱条件进行测定,结 果硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德的峰面积积分值的 RSD分别为0.12%和1.6%,说明供试品溶液在24 h内稳定. 8回收率测定 按处方比例,取缺硝酸咪康唑及醋酸曲安奈德 的空白基质,按样品标示量的80%,100%,120%各3 份,置小烧杯中,分别加入对照品溶液,加甲醇适量, 置60?水浴中,加热使溶解,并洗涤移入100mL量 瓶中,放冷至室温,稀释至刻度,摇匀,滤过.精密量 取续滤液5mL,置25mL的量瓶中.加流动相稀释 至刻度,摇匀,置冰浴中冷却2h以上,迅速滤过,取 续滤液作为供试品溶液;另精密吸取对照品储备液 5mL,置50mL量瓶中,加流动相至刻度,摇匀,作 为对照品溶液.取上述2种溶液各20L,分别注 入液相色谱仪,记录色谱图,各测定3次,按外标法 以峰面积计算.硝酸咪康唑的平均回收率(凡=3) 药物分析杂志ChinJPharmAnal2005,25(8) 分别为99.8%,100.0%,99.3%,RSD分别为0.37%, 0.21%,0.71%;平均回收率(n=9)为99.7%.醋 酸曲安奈德的平均回收率(n=3)分别为101.4%, 100.6%,10o.5%,RSD分别为0.89%,0.50%, 0.41%;平均回收率(n=9)为100.8%. 9样品测定 取3个批号曲咪新乳膏样品,精密称取适量 (约相当于硝酸咪康唑25mg和醋酸曲安奈德2.5 mg),置小烧杯中,按回收率试验项下的方法进行样 品含量测定,结果见表1. 表1样品测定结果(^=3) Tab1Testingresultsofsamples 注:括号内为RsD(%);A.硝酸咪康唑;B.醋酸曲安奈德 Note:RSD(%)intheparenthesis;A.miconazolenitrate;B.triamcinoloneace- tonideacetate 10讨论 10.1在参考药典收载的高效液相色谱法测定硝 酸咪康唑软膏含量的基础上,用外标法同时测定硝 酸咪康唑和醋酸曲安奈德2种成分的含量,操作简 便,快捷,提取完全,重复性好,精密度高,基质不干 扰测定,适用于曲咪新乳膏的质量控制. 10.2软膏中的基质可污染柱子,因此在样品处理 时采用冰浴冷却后迅速过滤的方法.为了使基质完 全除去,以减少其对柱子的损害,并使测定结果更加 准确,一定要在冰浴中冷却2h以上. 参考文献 1NationalStaIldardRisenfromChemicalMedicineRegionalStandard (化学药品地方标准上升国家标准).Vol2(第二册).2002.67 2DUANLian—hua(段莲华),LIYu—li(李玉丽),GUOJing(郭 晶),eta/.DeterminationoftriamcinoloneacetonideacetateinPikang? shuangointmentbyHPLC(HPLC法测定皮康霜软膏中的醋酸曲安 奈德).ChinJPharmAnd(药物分析杂志),2002,22(4):321 3ChP(中国药典).2000.VolH(二部):846 (本文于2004年5月8日收到) 欢迎订阅2006年《药物分析杂志》 《药物分析杂志》是由中国科学技术协会主管,中国药学会主办,中国药品生物制品检定所编辑出版的 学术性期刊.主要栏目有研究论文,交流,综述等.报道化学药物,中药与天然药物,抗生素,蛋白质,多肽类 药物,生物技术药物等的分析,质量标准研究,临床药物分析,药物分析基础理论与实践以及新方法,新技术 的应用,并及时报道国家重大研究课题的最新成果. 本刊为我国自然科学核心期刊,被国内外主要检索系统收录. 本刊坚持质量第一,面向广大读者,以其独具的深度与广度展示我国药物分析的现状与发展. 本刊2005年开始由双月刊改为月刊,大16开本,每期96页,国内外公开发行.每期定价15元,全年定 价180元,国内邮发代号:2—237,国外读者请同中国国际图书贸易总公司(中国国际书店,北京399信箱)联 系.欢迎广大读者到当地邮局订阅,并欢迎有关专业人员集体订购,价格从优. 希望为本刊推广发行者,价格另议. 地址:北京市天坛西里2号(100050)联系人:刘小帅 电话:(010)67058427传真:(010)67012819E—mail:ywfx@nicpbp.org,cn