A族乙型溶血性链球菌耐药性和分子流行病学调查研究
A族乙型溶血性链球菌（group A streptococcus pyogens，GAS）是链球菌中致病性较强的一种细菌，是急性呼吸道感染尤其是上呼吸道感染的重要致病原，可以引起急性扁桃体炎、猩红热和脓疱疮，也可引起严重的侵袭性感染如败血症、坏死性筋膜炎和链球菌中毒休克综合征。然而，随着大环内酯类抗生素的广泛使用，近十年来GAS对大环内酯类抗生素的耐药已经成为全球性关注的问题，细菌耐药性的增长已经成为临床治疗中的棘手问题。
M蛋白是GAS的主要致病因子，由emm基因编码。M蛋白抗原变异是M分型的基础，到目前为止，根据M蛋白抗原特异性可将GAS分为100多个型别，不同的型别其致病性不同，部分菌株感染可引起人类严重并发症如风湿热/风湿性瓣膜性心脏病（RF/RHD）及急性肾小球肾炎等，因此，GAS分型对流行病学研究有重要意义。然而，GAS对大环内酯类抗生素的耐药性及分子流行病学的大规模研究在国内报道甚少，而重庆地区尚缺乏儿童GAS分离株耐药性和分子流行病学大规模调查研究。
目的：了解重庆地区GAS耐药特点；了解重重地区GAS的emm基因分布特点；分析重庆地区emm基因的主导型和感染性GAS的emm基因与疾病的关系。
方法：收集我院住院患儿正常无菌部位血液、脓液、胸水标本及我院门诊患儿咽部、皮损部标本及健康儿童咽部咽拭子标本进行培养、分离、鉴定A族乙型溶血性链球菌。微量肉汤稀释法检测A族乙型溶血性链球菌对8种抗生素的敏感性。聚合酶链反应（PCR）扩增并进行测序从而对emm基因进行分型确定emm基因的型别。
结果：
（一）感染性GAS菌株组成 85株非侵袭性感染GAS菌株，急性扁桃体炎菌株为77株；猩红热为7株；脓疱疮的菌株为1株。5株侵袭性感染GAS菌株，2株为血培养分离株；2株为腹股沟脓肿的脓液培养分离株；1株为肺炎的胸腔积液培养分离株。
（二）GAS菌株对8种抗菌素的敏感性试验结果 1、85株非侵袭性感染GAS菌株对抗菌药的敏感性试验结果 85株非侵袭性感染GAS菌株对大环内酯类抗生素和克林霉素的耐药率在91.67％-97.62％；对四环素的耐药+中介为75％；对青霉素和头孢菌素类及左氧氟沙星的敏感率均高达100％，未检测到耐青霉素、头孢菌素类抗生素GAS菌株。 2、5株侵袭性感染GAS菌株对抗菌药的敏感性试验结果 5株侵袭性GAS菌株对大环内酯类抗生素如红霉素、克拉霉素以及克林霉素的耐药率均高达100％，对新一代的大环内酯类药如阿奇霉素的耐药率也高达80％；对四环素耐药+中介为80％；而对于青霉素、头孢呋辛和左氧氟沙星的敏感率仍为100％。 3、95株健康儿童携带GAS菌株对抗菌药的敏感性试验结果 95株健康儿童携带GAS菌株对大环内酯类抗生素的耐药率在94.74％-96.84％；对四环素耐药+中介为86.31％；对青霉素、头孢呋辛和左氧氟沙星的敏感率均高达100％。 （三）emm基因分型结果 1、83株非侵袭性感染GAS菌株的emm基因分型结果：83株非侵袭性感染GAS菌株中，最常见的型别为emm12.0，为52株，占62.65％；其次是emm1.0，为11株，占13.25％；再次是emm22.0，为8株，占9.64％；emm6.5和emm12.43均为2株，占2.41％；而emm63.0、emmSTG485.0、emmST1815.0、emm3.1、emm80.0. emm86.1、emm75.0和emm102.2均为1株，仅占1.20％。 2、5株侵袭性感染GAS菌株的emm基因分型结果：5株侵袭性感染GAS菌株中3株为emm12.0；1株为emm1.0；1株无法分型。 3、84株健康儿童携带GAS菌株的emm基因分型结果：84株健康儿童携带GAS菌株中，最常见的型别为emm12.0，为54株，占64.29％；其次是emm22.0，为13株，占15.48％；再次是emm6.0，为6株，占7.14％；emm1.0和emm4.0均为5株，占5.95％；而emm12.21为1株，仅占1.19％。 （四）来源于各病种的GAS与emm基因分型的对应关系结果检测扁桃体炎GAS菌株75株，以emm12.0所占比例最大为62.67％，然后依次是emm1.0（12.00％），emm22.0（10.67％）等。脓疱疮GAS菌株1株，为emm75。猩红热GAS菌株7株，其中5株为emm12.0，2株为emm1.0。败血症GAS菌株2株为emm12.0和emm1.0；腹股沟脓肿GAS菌株2株为emm12.0和无法分型；肺炎GAS菌株1株为emm12.0。
结论： （1）重庆地区儿童GAS菌株对大环内酯类抗生素表现出严重的耐药，而对青霉素和头孢菌素仍然保持高度敏感，故临床推荐首选青霉素和头孢菌素类（头孢Ⅰ、Ⅱ代）抗生素治疗GAS疾病。
（2）重庆地区儿童感染性GAS菌株emm基因以emm12.0为主导型，其次为emm1.0、emm22.0等；健康儿童携带GAS菌株emm基因也以emm12.0为主导型，其次为emm22.0、emm6.0、emm1.0和emm4.0等。为此可进一步为疫苗的研究提供依据。
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