椎间盘破裂对前角运动神经元及神经节细胞影响的研究

椎间盘破裂对前角运动神经元及神经节细胞影响的研究 椎间盘破裂对前角运动神经元及神经节细 胞影响的研究 V 椎间盘破裂对前角运动神经元及 神经节细胞影响的研究 常楚吕刚屠冠军李长有 伸_耍l目的观察椎间盘破裂后相应节段前角运动神经元及神经节细胞超擞结构与功醣状 态的变化.方法家兔30只.在腰(L)6,7间盘纤维环上钻孔.使髓按与硬膜外腔相通.以酶组织化 学,醇电镜技术.于术后不同时闻分别对各组前角运动神经元及神经节细胞内乙酰胆碱脂酶 (AchE),酸性磷酸酶(AcP)进行动态观察.结果实验组前角运动神经元内乙酰胆碱脂酶古量运 新藏步(613?O83,524?0.49,4.53?059);酸性磷酸酶含量逐渐增多(5.54? 0.44,6.57? 0.65,824?051);神经节细胞内酸性磷酸酶也呈增高拌改变(5.36?025,706士I31,902? 0.93).结论在冲经根结构明显改变之前,神经细胞内细胞器已控生变化,其功髓状态也将不同. 【关键调l椎间盘;脊神经根 EffectofrupturedintetvertebraldiscoBthemotetneuf0njnanteriorhorn蛐dganstiencell CHANG吼",L[』Gang.丁【,Guaniun,etatDepartmentD,Orthopaedics,FirstHospitalD,China MedicalUn~r3er$ity.enyang110001.China fAbct】ObjectiveToobservethechange~inl山M3tru就ureaadcdlnl~rfunctiondthecorfe — spomtingmo~oTneumnsinameriorhornandgan81~oncellsahnaprared~ntexvea'tebra3.di sc.Metlmds Hole~infibr0usanuIusbetweenlumber6and7weremadein30rabbtodevelopa00essbetwee nthe plllpousnucleusandepiduralcavity.Enzymehistocheraicaiandenzymeelec+:ma+m~cros copi~cecbB琦 wefeusedtoobservethechangesinacetylcholinemeraseandacidphospharaseinll~iOtOl'rle t~nsofanteri— onhomandganglioncellsofcorresponding~flectedspinal[t~iveroots.Resultscetylcholines terase?n— tentinthemotorG~lli'O/l$ofanteriorhornwas~duailydecrea5edby6.13?0.83,524? 0.49a工ld 4.53?0.59.whiletheacidphosphatasecontentguyincreasedby5.54?0.44.6.57?065, 824?05lAc讨phosphotasecontentintheganglioncells哪alsoincreasedby5.36? 0.25,7.064- 1.31.9..2?093gradually.Condusionlntracelorgansandtheirfunctionstateh且 vechangedbe— foreobviouschangeoccurredinthestruetttre.f5pinalIlerve.r?c IKeywords1lnterver~ebraldisk:Spinalroot 在研究中人们发现髓核组织可以通过生物化学机 制损伤神经根.但其结构与功能改变不一致.神经根结 构变化无法满意地解释神经根传导功能的急剧下降. 为此.我们采用酶组织化学,酶电镜技术,对相应节段 前角运动神经元,神经节细胞中的乙酰胆碱脂酶 (AchE),酸性磷酸酶(ACP)进行动态观察.以 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 结 构与功能变化的关系,现将结果报道如下. 材料与方法 1.动物模型的制作及取材:取成年家兔30只.体 重2.0,2.5kg.随机分成实验组,对照组,每组叉分术 后1,3,7d组各5只.以氯氨酮(20mg/kg体重)经耳 缘静脉麻醉后正中切开,咬除左侧攫(L)椎板下半及 椎板的上半.显露L神经根.实验组以直径为1.5 基金项目:卫生部科学研究基金资助项目(982171) 作者单位110001沆阳.中国医科大学第一临涑学院骨科 ? 249? ? 实验研究? ITIITI的粗针头在k.7问盘纤维环上钻一十四孔.使髓 核与硬膜外腔相通,对照组将神经根拉至椎管中 央.显露k,7间盘.但不切开,10s后将神经根复 位.各组动物于取材日期重新麻醉.切开晦睦暴露心 脏.经左心尖插入针头.灌注入古质量分数为1%肝素 的生理盐水,剪开右心耳,灌出液呈无色后.再用0.1 rnol/L二甲砷酸缓冲液配制的古质量分数为2%多聚 甲醛和含质量分数为0.25%戊二醛混合液囊疽固定l h.取节段脊髓和神经节,4?下同种圃定液续固定 1h,漂洗后以备标本制作. 2.ACP组织化学染色:标本用恒冷箱切片机 OUNG.CM.1800)制成1Om冰冻切片.采用Go. moris铅法配制孵育液.置冰冻切片于孵育l蕞中.室温 反应1h,充分水洗,古质量分数为2%硫化胺里色l rain,水洗后甘油明胶封片. 3.AchE组织化学染色:同法制成10lain冰冻切 片.配制孵育液.置冰冻切片于孵育液中.室温反应1 h.水洗后甘油明胶封片. 4.电镜酶细胞化学:用振动切片机(美国Caser公 司)将标本切成厚40,50m非冰冻切片,01mol/L 二甲砷酸缓冲液中漂洗.在上述孵育液中分别进行酶 孵育反应,漂冼后用含质量分数为1%锇酸固定(4?, 3Orain),酒精梯度脱水.丙酮置换.Epon812包埋,70 ?聚合12h,AO超薄切片机行超薄切片,醋酸铀单 染.JEM-1200EX80kv透射电镜观察. 5.酶含量1坝4定:采用LUZEX—F型彩色图谱分析 仪,以细胞内呈棕黄色颗粒者为阳性,对术后各时间段 两组前角运动神经元AchE,ACP,神经节细胞ACP含 量进行定量分析,所有数据用SAS软件进行统计学分 析. 结果 1.脊髓前角运动神经元AchE定位,定量分析:对 照组前角运动神经元内AchE强阳性反应产物呈深棕 红色颗粒,分布于细胞质内,术后1,3,7d之间酶呈色 无明显变化.实验组术后3,7d较术后1d酶反应逐渐 减弱,两组AchE含量比较见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1.电镜下前角运动神 经元内AchE位于内质网和高尔基体上.对照组之间 酵反应颗粒无明显变化,实验组术后3,7dAchE反应 颗粒逐渐减少. 表l两组前角运动神经元内AchF含量比较(?) 2.脊髓前角运动神经元ACP定位,定量分析:对 照组ACP阳性反应产物呈棕色颗粒,分布于细胞质 内,各时间段酶反应无明显变化.实验组术后3,7d ACP染色较术后1d逐渐加深.两组ACP含量比较 见表2.电镜下见对照组内ACP位于前角运动神经 元溶酶体内.对照组之间ACP酶反应颗粒无明显变 化,实验组术后3,7dACP阳性颗粒逐渐增多. 表2两组前角运动神经元内ACP含量比较(?) 经节细胞内ACP阳性反应产物呈棕色颗粒,分布于细 胞质内,术后各时间段酶反应差异无显着性.实验组 术后3,7dACP染色逐渐加深.两组ACP含量比较 见表3.电镜下见ACP位于对照组神经节细胞溶酶 体内.对照组之间酶反应颗粒无明显变化,实验组术 后3,7d溶酶体内ACP反应颗粒逐渐增多. 表3两组神经节细胞内ACP含量比较(i?) 讨论 本实验观察到神经元内AchE活性在纤维环切开 3,7d后持续下降.电镜下分布于内质网,高尔基复合 体上的AchE阳性反应颗粒逐渐减少, 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 纤维环切 开不仅使神经根传导功能下降,运动神经元的兴奋性 也将降低.本实验结果显示,神经元内ACP活性在纤 维环切开3,7d后持续增高,酶电镜显示藩酶体内 ACP阳性颗粒在伤后由小变大,逐渐稠密.这种变化 说明溶酶体的作用增强,在维持细胞代谢功能上,AcP 能分解潜在的毒性物质.排除损伤的非功能性胞质成 分,提供有用的降解产物以便再利用,进而对损伤起到 修复作用. 神经节是感觉神经细胞体集中的部位,神经根病 变必将通过感觉神经纤维的传导影响神经节细瞻的功 能.所以,我们可以通过对神经节细胞内ACP的动态 观察来分析感觉神经元在纤维环切开后的功能变化. 实验显示神经节细胞内ACP在纤维环切开后含量逐 渐增多,活性逐渐增强,电镜下可以更明显地看到这种 变化.这说明为修复受损的神经根,有更多的废物需 要排解,细胞的代谢活动增强.实验中见到神经节细 胞ACP变化以小节细胞改变为主,小节细胞是痛觉感 受器,其中含有大量的神经肽等痛觉递质,如P物质 (SP),缩胆囊素(CcK)等…,溶酶体上的抗氯化物酸 性磷酸酶在神经损伤后转化为与sP相似的一种痛觉 递质,神经根损伤后若溶酶体功能过强,势必释放其中 的水解酶,从而加重机体的痛觉反应,这也可能是下腰 痛的原因之一. 参考文献 1FatihaN??T?Rt~tcaztlonsukstane*PandGlk~*-wdat一 3.神经节细胞内ACP定位,定量分析:对照组神品等嘉c (收稿日期自2~0-06-02