泰乐祺科技推出奶及奶制品中黄曲霉素M1全套解决
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黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液,动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定
表
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明黄曲毒素的存在,因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光,G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2),还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M,其中毒性最高的M的代谢物为4-羟基化的产物Bs.
黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC),薄层层析法(TLC)等。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。
高效液相色谱法:
根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家
标准
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乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定
HPLC条件:
色谱柱
C18柱,150*4.6mm,5um
流动相
乙腈-水(25:75)
荧光检测器:
激发波长365nm,发射波长435nm;
流速
1.0ml/min
进样量
20ul
出峰时间
样品取样:真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程,所以必需保证样品收集和取样具有代表性。
样品前处理:分不同样品
牛奶 水浴加热至40 oC;离心用上清液过柱净化;
乳粉和粉状婴幼儿配方食品:称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型):称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,调节PH值至微碱性,高速均质器匀浆,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
干酪:称取适量切细或粉碎,过筛用加纯水溶解,高速均质器匀浆,超声提取后收集上清液,然后用石油醚进行两次萃取,然后用适宜的有机溶液萃取,取若干上清液过柱净化
奶粉样品,用于蒸馏水溶解中,调节PH值至微碱性,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
奶油:称取适量加甲醇水溶解,震荡后分页漏斗取下层溶液,蒸干后溶于水用于过柱净化。
免疫柱净化步骤:完全符合GB/T 18980-2003
┅┅取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上。
┅┅将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。准确移取清澈液注入玻璃注射器;
┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约2-3mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体;
┅┅更换玻璃注射器与亲和柱连接,在注射器中加入10ml水,调节压力使水以约6mL/min流速清洗亲和柱。
┅┅准确加入4mL色谱级乙腈洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测。
注:收集管中的洗脱液即为纯化后的样品,可直接用ELISA,荧光和高效液相等方法检测。
HPLC 检测需要仪器与耗材
产品名称
说明
规格
黄曲霉素M1固体和液体标准品
1ml/1mg 0.5ug/ml, 溶于乙腈
PriboFast 黄曲霉素M1免疫亲和柱
用于 样品前处理柱 分析黄曲霉素
25/50 columns/box
PriboFast泵流操作架(8位)
用于免疫亲和柱样品处理
黄曲霉毒素检测专用玻璃纤维滤纸
110,1.5um(100P)
旋转蒸发仪
酶联免疫检测法:符合国家标准
酶联免疫检测法采用竞争ELISA,在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原,加入样本(或黄曲霉毒素M1标准品溶液)及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素M1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液,读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素M1抗原的含量成负相关。对照标准曲线,即可得出相应残留物黄曲霉毒素M1的含量。
样品处理
牛奶 直接离心取上清液用于检测
奶粉及其他固状奶制品:需要溶解于去离子水中,离心取上清液用于检测
试剂盒检测时间:30分钟+30分钟
交叉反应率:
Aflatoxin M1
100%
Aflatoxin B1
8%
Aflatoxin B2
10%
Aflatoxin G1
7%
Aflatoxin G2
5%
ELISA 方法检测需要:
PriboFast 黄曲霉毒素M1酶联免疫检测试剂盒
96孔(0.1 ppb -8.1ppb)
雷勃半支灭菌移液器(彩色)
量程:0.5-10; 20-200; 5-50;100-1000 ;1000-5000ul
雷勃八道半支灭菌移液器
量程: 5-50ul; 50-300ul
酶标仪(进口畅销型)
进口、国产仪器,在国内市场占有率大,多用途