胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方法比较

胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方法比较 胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方 法比较 福建医药杂志2011年8月第33卷第4期FujianMedJ,August2011,Vo1.33,No.4 胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方法比较 福建省立医院病理科(福州350004)俞训彬唐秀如陈小岩 【关键词】幽门螺杆菌;染色;方法 【中图分类号1R446.5【文献标识码】B【文章编号】1002—2600(2011)04—0097 —02 幽门螺杆菌(HP)感染与多种疾病有关,尤 其是消化系统疾病,包括良性病变,癌前病变和恶 性病变,因此,HP感染的诊断和治疗显得尤为重 要.组织学诊断HP的优点是可以同时进行胃黏膜 的病理学诊断且特异性较高.随着内镜技术在基层 医院的广泛应用,组织学诊断HP逐渐成为常规项 目.本文对HP检测常用的4种特殊染色方法—— 革兰氏细菌染色法,改良Giemsa染色法,硼酸亚 甲蓝法,HP—Stain法进行比较,寻找到适合基层医 院病理科应用的方法. 1对象与方法 1.1对象:本研究对胃黏膜活检标本采用快速尿 素酶试验(rapidureasetest,RUT)和组织学检查 (w—S银染法)联合检测HP,并作为诊断HP感染 的金 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 口],2项指标检测均阳性及均阴性的各40 例胃黏膜活检标本人选本试验. ?97? 1.2方法:组织标本按常规作石蜡切片,每例蜡 块连续切片,厚度为4m,分别贴片做革兰氏细 菌染色,改良Giemsa染色和硼酸亚甲蓝法,HP— Stain法检测HP_2],高倍镜检(×40)下观察. HP—Stain法检测诊断试剂购自福州泰普生物科学有 限公司(批号:40101028).其他试剂均自行配置. 1.3统计学分析:计数资料比较采用检验,P d0.05为差异有统计学意义. 2结果 革兰氏细菌染色法对HP感染呈紫红色;改良 Giemsa染色法对HP感染呈蓝色,细胞核呈蓝色, 细胞浆及黏液呈红色;硼酸亚甲蓝法对HP感染呈 蓝色;HP—Stain法对HP感染呈紫蓝色,细胞核呈 蓝色,细胞浆呈红色.4种特殊染色方法对HP感 染检测的敏感性及特异性的差异无统计学意义(P <0.05,表1). 表1种特殊染色法检测HP结果比较(例) 敏感度/ 特异度/ 3讨论 w—S银染是最早运用于检测HP的特殊染色方 法,是组织切片染色效果最好的一种,为侵入性取 材方式下诊断HP感染的"金标准",故在本次试 验中与胃黏膜活检标本RUT联合作为诊断HP感 染金标准.w—S银染银染颗粒沉淀在细菌上,与组 织对比明显,观察较容易,照片效果好;但该法视 野中有时沉积的银化合物多,混入其中的细菌不好 观察,尤其对发生L型改变的细菌更难区分;还存 在操作耗时(>1h),试剂昂贵(一次性染液)并 要现配,需要水浴,对染色技术要求较高(试剂不 稳定时可严重影响实验结果)等不足.(1)革兰氏 细菌染色法简单,只需4种染料,价廉且检验速度 快(40rain),染色结束后不用组织脱水即可观察, 且细菌形态明显,可以判断细菌的形态,染色性, 易区分发生L型改变的细菌.该法的缺点是组织往 往被染成红色,所以较难区分混入组织内的HP. (2)改良Giemsa染色法简便,检验速度快(30 min),价廉(配制试剂一次可染片大于1000张), (下转第180页) ? 18O?福建医药杂志2011年8月第33卷第4期FujianMedJ,August2011,Vo1.33,No.4 于立即型接触性皮肤反应,可表现为速发性皮肤发红及风团 表现,还可表现为暂时性红斑样及湿疹样反应.与其他食物 过敏一样,芒果过敏不仅会出现皮肤和黏膜症状,也会出现 消化道和呼吸道症状,严重时甚至会出现休克等系统症 状[2;也有食芒果致急性肾衰,重度贫血的报道[3].芒果的 抗原成分为单(或二)羟基苯,为一种大多数带有C15或 C17烷基侧链的酚类,儿茶酚,间苯二酚或水杨酸的烷基衍 生物.这种烷基儿茶酚类化学物在漆酚类中也存在,因此, 它们之间可有交叉反应的发生[1].本组中13例已知对漆过 敏者芒果皮炎的症状,体征就相对较重,治疗时间亦相对较 长.另有实验证实,芒果与乳汁,鳄梨,蒿属花粉,芹菜, 胡萝卜提起液等也存在交叉反应.此外,不完全成熟芒果还 含有醛酸,主要为乙醛酸(HOC-COOH),是带有一个醛基 的有机酸,对皮肤黏膜有一定的致敏及刺激作用.还有实验 证实,在加工过程中芒果抗原非常稳定,不管是进行酶分 解,捣碎处理还是加热杀菌,都未发现抗原性有任何损失. 因此,传统的芒果处理并不能完全减少这些产品中的抗原潜 能_2].除对芒果果实过敏外,也有对芒果花粉和种子过敏的 报道. 本组中有4例多次进食间隔发病而非每次进食后均发 病,还有1O例过去曾多次食用芒果无反应而本次发病,这 些现象以接触性皮炎难以解释.是否与不同品种及不同成熟 程度的芒果所含抗原成分及其含量,浓度差别有关?是否是 受诱发处于致敏状态的致敏肥大细胞和致敏嗜碱粒细胞因个 体在数月内不接触相同的变应原而使致敏状态逐渐消失?这 些都尚待进一步的研究证实. 另有报道认为[4],芒果皮炎是光敏性皮炎的一种,鲜芒 果及多种食物如菠菜,油菜,紫云英,马兰头,荠菜,无花 果等都含有光敏性物质,在紫外线的作用下能转化成另一种 光化学产物,光化学产物再与皮肤内的蛋白质相结合形成抗 原,抗原能使机体产生过敏反应,发生目光性皮炎的症状. 总的来说,目前认为芒果皮炎还是属于过敏反应的可能 性最大,在使用抗组胺药及降低过敏反应的药物如糖皮质激 素等加上一些外用药对症治疗后,能达到有效治疗的目的. 根据明确的进食及接触芒果史,皮疹发生的特征性部位和特 点,即口周,面颊,耳廓弥漫性水肿性红斑,上有密集针尖 大小丘疹,丘疱疹,自觉有麻木感,刺痒感,灼热感等,诊 断芒果皮炎并不难.有必要引起注意的是,对于儿童口周皮 炎,面部皮炎的患者,在芒果上市或芒果花开的季节,应想 到芒果及其花粉过敏的可能. 参考文献 [1]赵辨.谈《芒果皮炎》[J].临床皮肤科杂志,1995,24 (2):116. [2]张红云,宋娟娟,刘志刚,等.芒果果实中泛变应原profi|in的 克隆,表达及免疫学活性鉴定口].中华微生物学和免疫学杂 志,2007,27(2);111-I15. E3]张正英.食芒果致急性肾衰,重度贫血1例报道EJ3.中国医 师杂志,2002,4(6):711. E43曹来安.光鲜芒果与日光性皮炎[J].大众健康,2004 (10):49. (上接第97页) 其缺点是易褪色,不能长期保存.(3)硼酸亚甲蓝 法染液配制方法简单,染色步骤少,检验时间短 (10min),染色后无需经分化剂分化,每次可染切 片数量多;试剂价格低廉,不受温度的影响,染液 性质稳定,可长期使用;菌体显色清晰.(4)HP— Stain法是一种市售试剂,无需配制,方法简单,染 色步骤少,操作时间短(10min),但价格偏贵, 基层医院病理科开展有困难. 综合利弊,硼酸亚甲蓝法染色法在试剂配制, 操作时间,对技术要求及性价比等方面具有一定优 势,推荐基层医院病理科应用. 参考文献 [1]田效忠,刘谢勤,潘宜,等.幽门螺杆菌粪便抗原免疫快检卡 的临床应用价值[J].中国医师进修杂志,2010,33(16): 55—57. [2]周正仁.医学微生物学[M].第6版.北京:人民卫生出版 社,2003:I10. E33凌亚伟,崔英,陈英杰.姬姆萨染色改良法在胃幽门螺杆菌检 查中的应用及其价值EJ2.昆明医学院.2007,28(2): 125—125.' E43谭伟艳,黄艳,范新娟.硼酸美蓝染色法检测幽门螺杆菌200 例分析[J].广州医药,2008,39(5):57—58. [5]袁淑娟,马恒辉.介绍一种胃幽门螺杆菌快速染色法[J].哈 尔滨医药,2004,24(5):34.