应用肠杆菌科诊断噬菌体快速诊断志贺氏菌

应用肠杆菌科诊断噬菌体快速诊断志贺氏菌 ( )六六六各异构体检测结果 mg/ kg 表 2 α γ β δ 名称 份数 X % X % X % X % 范围 范围 范围 范围 0 - 0 . 0014 0 . 0006 10 0 - 0 . 0023 0 . 0014 30 70 0 - 0 . 0046 0 . 0007 20 0 0 0 红茶 茉莉花茶 10 0 - 0 . 0043 0 . 0016 60 0 . 0008 - 0 . 0018 0 . 0012 100 0 - 0 . 0030 0 . 0003 10 0 - 0 . 961 0 . 0096 10 绿茶 10 0 - 0 . 0035 0 . 0019 80 0 . 0005 - 0 . 0014 0 . 0009 100 0 0 0 0 0 0 ( )DD T 各异构体检测结果 mg/ kg 表 3 PP’ - DD E O P - DD T PP’ - DDD PP’ - DD T 名称 份数 X % X % X % X % 范围 范围 范围 范围 0 - 0 . 0072 0 . 0015 40 0 0 0 . 0001 10 0 . 0001 10 10 0 0 - 0 . 0006 0 - 0 . 0011 红茶 茉莉花茶 0 . 0042 - 0 . 0143 0 . 0065 0 . 0001 10 0 . 0041 80 10 0 . 0018 - 0 . 0103 0 . 0060 100 100 0 - 0 . 0008 0 - 0 . 0070 0 0 0 0 0 0 绿茶 10 0 . 0072 - 0 . 0209 0 . 0118 100 0 0 0 ( )年茶叶中六六六 、DD T 检测结果 mg/ kg 1982 表 4 由表 4 可见 ,我省 1982 年对 125 份绿茶及 63 份红茶的 测定结果 ,与本次检测结果加以对照 ,有机氯农药的残留的 DD T 六六六 名称 份数 确降低了很多 ,但很缓慢 。我国于 1976 年已明确规定禁止 X X 范围 范围 生产使用六六六 ,DD T 农药 ,至今已二十多年了 ,现还有残 63 0 - 0 . 656 0 . 023 0 . 030 - 0 . 550 0 . 200 红茶 绿茶125 0 - 0 . 128 0 . 037 0 . 023 - 0 . 662 0 . 200 留 。可想而知它具有高度的稳定性 。 六六六 、DD T 是脂溶性极强的物质 ,当人们食用残留农 2 . 2 讨论 药的食品 ,就可在体内蓄积 ,从而引起肝 、肾 、神经系统和生 从表 1 可知 30 份茶叶六六六 、DD T 检测结果均符合国 殖系统的伤害 。从本次测定结果来看 , 我省农药残留量均 家卫生 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。国家农药残留量的标准限量 ?0 . 2mg/ kg 。茉 低于外省 ,尤其是 DD T 。但为了保障人民群众的身体健康 , 莉花茶 、绿茶 、红茶 、六 六 六 残 留 量 均 值 分 别 为 0 . 0127mg/ 还必须加强管理 ,从而使茶叶中的有害物质降到最低点 。 kg 、0 . 0029mg/ kg 、0 . 0028mg/ kg 。DD T 残 留 量 检 测 结 果 茉 莉花茶 、绿茶 、红茶其均值分别为 0 . 0163mg/ kg 、0 . 0117mg/ 参考文献 1 . 卫生部 食 品 卫 生 检 验 方 法 理 化 部 分 , 北 京 : 中 国 标 准 出 版 社 , kg 、0 . 0017mg/ kg 。 1986 :69 α 从表 2 可知三种茶叶六六六各异构体占总量的比例2 . 王东凌等 ,福建省茶叶有机氯残留量调查 ,福建省预防医学杂志 , γ βδδ - 六六六 >- 六六六 >- 六六六 >- 六六六 ,红茶-( ) 1993 :2 4:32 δβ 六六六未检出 ,绿茶.- 六六六均未检出 。3 . 赵道辉等 ,茉莉花茶中 DD T 残留测定及超标原因 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 ,环境与卫 由表 3 得知 DD T 各异构体占总量的比例是 PP’ - DD E ( ) 生杂志 1998 年 9:15 > O P - DD T > PP’ - DD T > PP’ - DDD。红 茶 O P - DD T ( )1999 - 02 - 02 收稿 未检出 。绿茶 O P - DD T 、PP’ - DDD 、PP’ - DD T 三种异构体 均未检出 。 应用肠杆菌科诊断噬菌体快速诊断志贺氏菌 ( )山东省郯城县卫生防疫站 276100 张丽生 孙旭 徐艳丽 () , 其发病率居法定志贺氏菌属细菌引起的肠道传染病 效期内使用 。3志贺氏菌属诊断血清 ,卫生部兰州生物制 ( ) 传染病之首 ,严重危害人们的身体健康 。常规检测方法较 品 研究所生产 ,在有效期内使用 。4培养基 : SS 琼脂 , 普 ) ( 复杂 ,费时 、费力 ,不能及时指导腹泻病的临床治疗 。应 用 通琼脂 ,双糖铁琼脂和 M IU 动力 ,靛基质 ,尿素为山东省 肠杆菌科诊断噬菌检测志贺氏菌属细菌 , 能有效地缩短鉴 卫生防疫站服务中心制备的半成品 , 各种生化培养基按文 定时间 ,节省人力 、物力 ,同时结合常规鉴定 ,能及时 、准确 1 献制备 。 地检测志贺氏菌属细菌 。 ( ) 1 . 2 方法 1将粪便接种 SS 平板 ,37?C 培养 18 —24 小 1 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与方法时 ,挑取氧化酶阴性菌落接种双糖铁斜面 ,培养后作革兰氏 () 1 . 1 材料 1菌株 :240 株疑似志贺氏菌为本站从腹泻病 ( ) 染色 ,如所测特性符合志贺氏菌属 , 即做血清学分型 。2 ( ) 人及健康查体人员粪便中分离 。2 肠杆菌科诊断噬菌体 2 3 ( 分型菌株 按 文 献作 志 贺 氏 菌 属“sh ”噬 菌 体 10R TD , 由江西省卫生防疫站制备 ,试验方法按其说明 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 进行 ,在有 ) 1 R TD裂解试验 , 并同时检测菌株的生化特性 : 葡萄糖 , 乳 () , HS ,V P ,苯丙氨酸 ,靛基质 ,尿素 ,赖氨酸 ,乌氨酸 ,克氏糖 其中一株 2a裂解模式与已知模式不符 ,1 株 4a 虽与已知 2 ( ) 模式相同 ,但 1 R TD 不裂解 。 柠檬酸盐 ,醋酸钠 ,葡萄糖铵 ,粘液酸和动力 。3志贺氏菌 属“sh”裂解的菌株 ,如生化特性符合志贺氏菌属 ,且葡萄糖 2 . 5 216 株志贺氏菌的裂解模式 。表 2 。由表 2 可见 ,216 1 1 铵阴性 ,再按文献测定裂解模式 ,sh 不裂解或生化特性不 株志贺氏菌分布于 5 个裂解模式 ,与文献相一致 。 符合志贺氏菌属 ,则作进一步鉴定 。 2 216 株志贺氏菌的裂解模式 表 2 结果 噬菌体 2 . 1 240 株菌为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌 , SS 琼脂上 裂解模式 血清型 株数 生长良好 ,双糖铁上反应为 HS 阴性 , 乳糖阴性 , 发酵葡萄 E 2 0 —1 C sh E CE 4Ent 糖产酸未见产气现象 。 1 1a 2 - - + + + + - 2 . 2 240 株疑似志贺氏菌可分别与志贺氏菌属中 15 个型 1b 37 - - + + + + - 3 2a 22 - - + + + + - () 亚型的血清凝集 , sh 噬菌体 10R TD 裂解的 216 株 ,同时 2b 5 - - + + + + - 被 1 R TD 裂解的有 202 株 。 4a 38 - - + + + + - 2 . 3 sh 不裂解菌株均因生化特性不符而排除志贺氏菌 ,表 4b 2 - - + + + + - 1 。 X 15 - - + + + + - 表 1 sh 不裂解或生化特性不符合志贺氏菌株 Y 17 - - + + + + - 2 7 - - + + + - - 1a 8 - - + + + - - 4a c5 2 - - + + + - - 志贺氏菌 分型血清 株数 主要生化特性 3 15 - - + + - - - A2 凝集 1 - - + + - - - 4a V P + 产气 + 动力 + 柠檬酸盐 + 1a 1 3 - - + + - - - c16 产气 + 动力 + 柠檬酸盐 + V P + 赖氨酸 + 5 4a 3 - - + + - + - 4 1b 产气 + 动力 + 柠檬酸盐 + V P + 1 产气 + 2a 3 - - + + - + - 乳糖 + V P + 动力 + 靛基质 + E、E裂解 + 3 4 产气 + V P + 动力 + 柠檬酸盐 + 2b 2 - - + + - + - 3 2a 产气 + 3a 7 - - + + - + - 乳糖 + 动力 + 靛基质 + 、E裂解 +E B 4 4 产气 + 6乳糖 + 动力 + 靛基质 + E、E裂解 + 4a 3 - - + + - + - 4 产气 + 1 X Ent 裂解 + V P + 动力 + 柠檬酸盐 + 产气 + 5 A3 3 - - + - - - - C 2 1赖氨酸 + V P + 动力 + 柠檬酸盐 + B6 21 - - + - - - - C 1 2 C14 1 - - + - - - - 葡萄糖铵 + 醋酸钠 + E 裂解 C3 4 2 . 6 36 株志贺氏多价血清阴性菌的生化反应与噬菌体裂 2 . 4 sh 裂解菌株中 ,2 株因生化特性不符而排队志贺氏菌 , () 解模式 表 3。 36 株志贺氏菌血清阴性生化反应与噬体模式 表 3 噬菌体裂解 株数 主要生化特性 结论 3 1 R TD 10R TD 其他 5 - - 产气 + V P + 柠檬酸盐 + 动力 + 裂解 Ent 阴沟肠杆菌 E 、E裂解 11 - - 大肠埃希氏菌低活性 葡萄糖胺 + 醋酸钠 +4 E 、E裂解 5 - - 产气 + 乳糖 + 动力 + 靛基质 +大肠埃希氏菌 4 1 - - 产气 + V P + 柠檬酸盐 + 动力 +产气肠杆菌 赖氨酸 + 14 产气 + HS + 赖氨酸 + 靛基质 - - - 0 —1 裂解 沙门氏菌2 表 4 噬菌体裂解模式 噬菌体裂解模式 反应模式 菌型 3C E CE E4 Ent sh 0 —1 CL ( )1 - - CL CL CL - 福氏 1 —5 , 鲍氏 11 ( ) 2 - - CL CL CL - - 福氏 1 ,4 痢疾 2 鲍氏 5 。7 ,11 。16 ,17 宋内氏 13 - - CL CL - - - 宋内氏 1 ,痢疾 2 ,福氏 4 ,鲍氏 5 ,16 CL CL CL 4 - - - - 宋内氏 ?,福氏 3 ) ( 5 - - CL - 福氏 6 ,鲍氏 1 —4 偶数型 6 —18 16 除外痢疾 3 —12- - - 6 - - CL - CL - - 鲍氏 9 ,15 7 - - CL - ) ( - - CL 痢疾 1 , 宋内氏 ? 8 CL - CL - - - - 鲍氏 13 3 ( ) ( ) ( ) 注 : 1CL 为融合性裂解 , - 为不裂解 ; 2内为罕见结果 ; 3 包括 10R TD 和 1 R TD 两种浓度 ;A1 ,1b ,C13 和 C16 有 1 R TD 不裂解株 。 均裂解 ,其裂解模式与下表某裂式相同时 ,可判定出菌型 。3 讨论 本文应用肠杆菌科诊断噬菌体对 240 株疑似志贺氏菌 用上述方法快速检测志贺氏菌 , 减少了大量的生化试 进行了检测 ,同时进行了常规生化鉴定 ,结果表明 : sh 噬菌 验接种量 ,省时 ,省力 ,结果可靠 ,适用于各类实验室应用 , 3 体具 有 高 度 属 的 特 异 性 , 10R TD 属 内 裂 解 率 为 100 % , 特别是卫生防疫部门作卫生从业人员健康查体 , 能快速准 确的完成大量的菌株鉴定工作 ,适合大批粪便标本的检测 。 1 R TD 为 99 . 9 % 。因此 ,建议在志贺氏菌的常规鉴定中 ,用 参 考 文 献肠杆菌科诊断噬菌体代替烦琐复杂的生化试验 ,通常在 48 1 . 何晓青主编 ,卫生防疫细菌检验 , 南昌 : 新华出版社 , 1988 ; 701 — 小时左右就可得到鉴定结果 。其方法为 : 先将 SS 平板上的 730 可疑 菌 落 接 种 在 双 糖 管 上 , 同 时 做 一 支 M IU , 37?C 培 养 2 . 何晓青等 , 应用肠杆菌科四个属的诊断噬菌体快速诊断沙门氏 18 —24 小时 ,观察结果 ,做革兰氏染色 ,符合者作肠杆菌科( ) 菌 ,微生物学报 ,1984 ;24 3:282 —289 诊断 噬 菌 体 裂 解 试 验 , 37?C 培 养 6 小 时 , 观 察 结 果 。凡 ( )1998 - 09 - 15 收稿 2 2 sh10R TD 不裂解者排除志贺氏菌 。凡 sh10R TD 和 1 R TD 血中硫氰酸盐测定 —吡啶 、巴比妥酸分光光度法 ( )桂国友 安庆市职业病防治所 246001 对血中 硫 氰 酸 盐 进 行 测 定 主 要 有 色 谱 法 和 分 光 光 度硫氰酸盐标准曲线的制备3 . 1 3 . 2 收集非接触氰化物健康人的血清 ,混合备用 ,取 7 只 法 。其关键在于对样品进行分离处理 。据有关文献报导 , 10ml 试管按表 1 配制标准色列 。 1有水蒸汽蒸馏法 ,二氧化碳吹出法以及空气吹出法 ,三氯 2乙酸沉淀蛋白法 等 。以上方法中 ,蒸馏法和吹出法虽可 表 1 硫氰酸盐标准管的配制 获得较好的分离效果 ,但不利于大批样品分析 。职业性健 0 1 2 3 4 5 6 管号 康监护监测中 ,仍以蛋白沉淀剂分离蛋白较为快速 ,便捷 。 0 0 0 . 1 0 . 4 0 . 8 1 . 6 2 . 0 标准应用液 ,ml 2 为此笔者结合吡啶 —巴比妥酸分光光度法对儿种蛋白沉 0 . 4 0 . 4 0 . 4 0 . 4 0 . 4 0 . 4 混合血清 ,ml4 淀剂进行选择试验 ,确立了使用硫酸锌作为蛋白沉淀剂对0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 氢氧化钠溶液 ,ml 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 0 . 2 硫酸锌溶液 ,ml 蒸0 . 2 样品进行前处理的方法 。本法适用于对成批样品进行快 速 馏水 ,ml 3 . 6 3 . 2 3 . 1 2 . 8 2 . 4 1 . 6 1 . 2 分析 。 - 0 0 . 4 1 . 6 3 . 2 6 . 4 8 . 0 0 SCN 含量 ,ug 1 原理 3 . 3 将各管分别混匀 ,以 3500r/ min 离心 5min ,取上清液 在血清中按比例加入氢氧化钠和硫酸锌溶液后 ,离心 1ml 分别加入 10ml 具塞比色管中进行分析 。 沉淀 ,取出一定体积上清液在微酸性条件下 ,血中硫氰酸盐 ( ) 3 . 4 分别加入 2ml 缓冲液 3 ,5,混匀 ,加入 0 . 2ml 氯胺丁 和氯胺丁反应生成氯化氰 。它使吡啶环裂开 ,产生戊烯二 溶液 ,立即盖塞 , 混匀 , 放臵 37?C 恒温水浴 5min ,加入 2ml 醛 。戊烯二醛与巴比妥酸作用 ,生成紫红色染料 ,其色度与 ( 吡啶 —巴比妥酸溶液 , 混匀 , 于室温 室温低于 25?C 时 , 臵 硫氰酸盐含量成正比 ,在波长 580 纳米处比色定量 。 ) 于 25?C 恒温水浴中放臵 20min ,混匀 。于波长 580mm 处 , 2 仪器与试剂 () 用 10mm 比色杯 ,以试剂空白 0 号管为参比 ,测量吸光度 。 —仪器2 . 1 721 型分光光度 计 ; 恒 温 水 浴 箱 , ?1 ?; 离 心 3 . 5 从 2,6 号管的吸光度减去 1 号管的吸光度 ,以 SCN 机 ,等 。 含量为横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,绘制标准曲线 。 2 . 2 试 剂 3 . 6 样品测定 吸取 0 . 4ml 新鲜血清于 10ml 试管中 。加 10g/ L 氢 氧 化 钠 溶 液 , 50g/ L 硫 酸 锌 溶 液 , ( ( ) )入氢氧化钠溶液 3 、10 . 2ml ,混匀 ,加入硫酸锌溶液 3 、2 100g/ L 三 氯 乙 酸 溶 液 。1 + 3 盐 酸 溶 液 。磷 酸 盐 缓 冲 液 0 . 2ml ,再加蒸馏水 3 、2ml 。按 4 、3 条操作 ,测吸光度 ,从标 ( ) P H = 7?溶解 2 . 79 克磷酸二氢钾和 4 . 14 克磷酸氢二钠于 准曲线上查出硫氰酸盐的含量 。 ( 少量水中 ,并稀释至 1 升 。10g/ L 氯胺丁溶液 。临用前配 4 计算) 制。吡啶 —巴比妥酸溶液 溶解 0 . 18 克巴比妥酸于 3ml 4 . 1 按下式计算血中硫氰酸盐的浓度 ( ( ) 吡啶及 10ml 盐酸溶液 3 、4中 ,用水稀释至 100ml 。临用 x = C ×1000 ) 前配制。硫氰酸盐标准溶液 溶解 0 . 1673 克已烘干的优 试中 : x —血中硫氰酸盐的浓度 ,ug/ dl ; 级纯硫氰酸钾于少量水中 ,用水稀释至 100ml 。此溶液 1ml C —由标准曲线上查得的硫氰酸盐含量 ,ug ; - 2 = 1mgscw 。将此溶液用水稀释成 4ugscn的标准应用液 。 5 结果与讨论() 当日配制。 25 . 1 蛋白沉淀剂的选择 取含量为 0 . 8ugSCN的标准管 , 3 分析步骤