黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学

黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学 黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学 W 华西 C 药 j 学 ' 杂 P 志 S2006.21《2):.,8169IOLJUD-ltJ:6 黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学 周王月,蒋学华 (四川大学华西药学院,四川成都610041) 摘耍:目的研究黄藤索在大鼠胃肠道中的吸收机理.方法采用I-IPIE检测黄藤素在大鼠的在体肠循环.结果黄藤素 在全肠段均有吸收,但吸收都较差,在胃,小肠和结肠的每小时吸收百分率分别为7.95%,2.47%,2.40%,在20—200Pg?ml-1 浓度范围内小肠吸收量与浓度呈线性关系.K值基本不变,吸收 机制 综治信访维稳工作机制反恐怖工作机制企业员工晋升机制公司员工晋升机制员工晋升机制图 为被动转运.结论黄藤素的制剂研究与临床应用均应 考虑其吸收特征. 关键词:黄藤素;吸收特性;在体循环实验;动力学;高效液相色谱法 中田分类号:R965文献标识码:A文章编号:1006一OlO3(2oo6)o2—0168—02 TheabsorptionkineticsofPalmatineinstomachandintestinesofrat ZHOUYue,JNGXue—hua (WestChinaSchoolofPharmacy,SichuanUniversity,Chengdu610041,Ch/na) Ala~traet:o丑 lEcI1,,EToresearchtheabsorptioncharactersofPalmatineinvariousintestinalsegmentsofmrs.ME]【1日【o璐absorp- tionkineticswa$investigatedbytheinsituperfusionmethodinmrsanddeterminedbyHPLC.REsIJI【sPalmatinewasabsorbedbadlyat allselgnentsofintesfineinmrs.皿 IeabsorptionpercentageinorIehour(P%)atstomach,intestineandcolonwel'e7.95%,2.47%and 2.40%,respectively.WhentheconcentrationofPerfusionsolutionwa$ch~-cdfrom20to200Pg?ml,.theuptakeofPalmatineinintestine increased.皿 1eabsorptionraleeor~tantkeptatthe8ltlllelevelandPalmatinewasabsorbedmainlyviapassivetlamportmechanism.oaI=lI- S10N111eabsorptioncharactersofPalmatinewouldbeconsideredinthepreparationresearchandtheclinicalapplication. Keywords:Palmatine;Absorptioncharacters;s/tupeffusionexperiment;Kinetics;眦 (llUlllb~g.'R965D10cIm岫哪tcode:AArttdeID:l006—0l03(2oo6)02—0168—02 黄藤素(Palmatine)又名掌叶防己碱,巴马亭等, 是从防己科植物黄藤的茎部提取得到的生物碱,具 有清热解毒的作用.临床用于治疗妇科炎症,菌痢, 肠炎,呼吸道及泌尿道感染,外科感染,眼结膜炎等 症….现采用大鼠在体循环灌流的方法,对黄藤素 在胃肠道的吸收部位和吸收动力学进行研究,为剂 型 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 提供生物药剂学依据. 1实验部分 1.1仪器,试药与动物 高效液相色谱仪(包括Lc一6A泵,s一8010检 测器,AnaStar色谱工作站,日本岛津);小型三用水 箱(北京医疗设备厂);HL一2恒流泵(上海青浦沪西 仪器厂);TU一1800紫外可见分光光度计(北京普析 通用仪器有限责任公司).黄藤索原料药(云南玉溪 万方天然药物有限公司);K—R缓冲液.大白鼠(四 川大学动物中心)170220g. 1.2循环液中酚红的含量测定方法 用K—R缓冲液配制浓度为l0,20,30,40,50,6o . rnl-1的酚红液,分别测定其吸光度,以吸光度对 ,正攻读药剂学专业的硕士学位. 作者简介:周胡,女 *通讯作者(Corr~pondentauthor) 浓度进行线性回归,得回归方程为:A=0.0157C+ 0.oo7(r=0.9999).高(60ttg?ml),中(30? rnl),低(10g?rnl-1)浓度的平均回收率分别为 100.00%,98.47%,100.13%(=5),精密度分别为 1.19%,0.35%,0.24%(=5). 1.3循环液中黄藤素的含量测定 1.3.1色谱条件DiamonsilODScl8色谱柱(2o舢× 4.6mm,5);流动相为乙腈一水(55:45,3.4 g.LNaI-I2P04和1.7g?L,SDS,H3P04调pH3.0); 流速1.0ml?min;柱温35;测定波长341啪. 1.3.2方法可行性考察分别取空白循环液,黄藤 02.55.07.502.55.0 t/rain 圈1黄藤素空白溶液(A),对照品溶液(B)和供试溶液(c)的lilLe 色谱圈 Fig1HPLCchraomtOgmlmofbhmksolution(A),lmlrmtlr~rder. eIlce鲫出旺雠solution(B)anti柚I珥soluttml(C) 第2期.周,等.黄藤素在大鼠胃肠道中的吸收动力学 素对照液及供试液进样,在"1.3.1"项色谱条件下测 定.由图l可知,黄藤素对照液的,R=7.14min,供 试液的主峰保留时间与对照液一致,空白液在此条 件下无干扰. 1.3.3 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线的制备精密称取黄藤素原料药 约50Hlg,置50rnl量瓶中,加蒸馏水适量超声溶解 定容,配成约lnlg?rn1的贮备液.分别精密吸取一 定量贮备液,加蒸馏水制成含黄藤素5.o3,l0.06, . 25.15,50.30,100.60,150.90,201.20,251.50腭rnl的溶液,进样20l.以峰面积对浓度进行线性 回归,回归方程为:Y=6.469×lO0c一7.229×lO3 (r=0.9999),表明黄藤素在5.03251.50?ml 范围内,线性关系良好.高(251.50/.tg?ml),中 (100.60/.tg?m1.1),低(5.o3腭?rrIl)浓度的平均回 收率分别为98.24%,100.14%,102.02%(几=5);日 内精密度为2.23%,2.08%,2.56%(几=5);日间精 密度为3.65%,1.19%,0.44%(几=5). 1.4胃灌注液中黄藤素的测定 分别精密吸取适量贮备液,加人工胃液制成含 黄藤素l0.o4,25.10,50.20,100.40,150.60,200.80 腭?rnl的溶液.按"1.3"项下方法测定.以峰面积 对浓度进行线性回归,其回归方程为:Y=6.905× 100C+5.876×100)(r=0.9999).高(200.80腭? rnl),中(100.40/-,.g?ml),低(10.o4g?rnl)浓度 的平均回收率分别为99.9o%,101.30%,95.66% (几=5);日内精密度为1.o2%,0.68%,0.85%(几= 5);日问精密度为1.34%,1.57%,2.20%(几=5). 1.5黄藤素的吸收机理[2] 1.5.1供试液的配制取一定量贮备液,分别用空 白循环溶液配成低,中,高浓度分别为2o,70,200? rnl一的小肠循环溶液.取一定量贮备液,用人工胃 液配成70g?ml的胃灌注液. 1.5.2大鼠在体小肠吸收实验取大鼠15只(实 验前禁食12h,自由饮水),随机均分为3组,ip戊巴 比妥钠40nag?kg,,麻醉后固定.切开腹部,在实验 肠管两端各切-4,口,在上端小口处插入玻璃管并 结扎.用注射器将37~C的生理盐水缓缓注入肠管, 洗去肠管 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 物至净.然后在实验肠管下端小口处 插入玻璃管并结扎.取5ornl用K—R缓冲液配制的 供试药液(含酚红20mg?L),以5ml?min-1流速循 环10min后,将流速调节为2.5ml?min一1o从0—2h, 每隔15min取两份0.5rnl样品,补加酚红溶液2IIll. 由酚红浓度的改变校正小肠中黄藤素的剩余药量. 1.5.3大鼠在体胃吸收实验照"1.5.2"项的方 法,从"取大鼠l5只……"至"切开腹部"的方法.暴 露胃,将贲门结扎,用玻璃管插入幽门并结扎.用人 工胃液将胃腔洗净,注射器内吸取胃试液6rnl,注射 到胃内又抽回到注射器,重复几次,使混合均匀,将 4rrIl混合均匀的药液,注入胃内.注射器内留下的 药液浓度为药物初始浓度,2h后抽出胃内药液的浓 度为药物终浓度,根据黄藤素初始浓度和终浓度之 差计算其吸收. 1.6结果 1.6.1溶液的稳定性考察取高,中,低3种浓度 的小肠循环液,置37?水浴中,分别于0,0.5,1.0, 1.5,2.0h取样,测定峰面积.结果表明:2h内黄藤 素在肠循环液中稳定(RSD=0.18%),在人工胃液 中也稳定(RSD=0.47%). 1.6.2胃肠道的吸附,代谢和摄取的考察剪取大 鼠小肠,剖开洗净,置中浓度的小肠循环液中.37? 孵育2h,测定孵育前后黄藤素的浓度,孵育后的剩 余百分比为96.78%(几=3).剪取大鼠胃,剖开洗 净,置胃灌注液中,实验方法同"1.5.2"项,孵育后的 剩余百分比为100.00%(几=3).可认为大鼠胃肠 壁对黄藤素无显着物理吸附,代谢和摄取. 1.6.3数据处理大鼠在体胃吸收2h后,每小时 吸收药物的平均百分率为7.95%土1.77%(几=4), 药物在胃中吸收较少.大鼠在体循环2h后,以剩 余药量的对数对取样时问作图,求得药物吸收速率 常数,吸收半衰期,.和每小时吸收百分率 (P/%),见表l. 衰i小肠与结肠的吸收参数(?s.,l=5) Table1.s.Usorpacmlmrmnmersofintestineandcok~n(x士s.,l--s) 由表1可知,给予不同剂量的黄藤素,Ka值几 乎不随浓度的变化而变化,说明黄藤素在大鼠小肠 的转运机制为被动扩散.药物浓度在肠道各部位的 下降与循环时问呈线性关系,表明吸收动力学为一 级吸收.结肠的吸收速率常数与小肠接近. 2讨论 实验结果显示,黄藤素在整个肠道的吸收均较 差,在胃的强酸性环境下,比肠道吸收多.如果黄藤 素制成口服制剂,应考察吸收促进剂对其的作用,以 提高其在胃肠道的吸收. 参考文献: [1]张慧.I'~LC—nJU法测定血清中黄藤素的含量[J].药学, 2O0O,36(7):518—520. [2]李高,方超.药物肠道吸收的生物学研究方法[J].中国药学杂 志.2O02,37(1O):726—729. 收稿日期:2005—08