葶苈子黄酮对血小板激活因子的拮抗作用

葶苈子黄酮对血小板激活因子的拮抗作用 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月?1539? 用机制也还有待进一步研究. References: [1]YuYM.EffectofRhodobryum.roseumLimpronhemor— helologyofAMIindogs口].ChinJIntegrTraditChinWest Med(中国中西医结合杂志),1993,13(11):672. E2]LeiXL,ZhangRP,DongXF,eta1.Protectiveeffectof YunnanfolkmedicineRhodobryumroseumonexperimental myocardialischemiaofratEJ].ChinTraditHerbDrugs(中 草药),2O01,32(12):1103—1106. E3]MaY.ThecurativeeffectofRhodobryumroseumon101 CHDpatientsEJ].ShaanxiJTraditChinMed(陕西中医), l989,l0(6):256. E4]HeJC,LiuX,AnYR,eta1.Studiesontheanti— arrhythmiaeffectofXinjiangEJ].ChinJTraditMedSci Technol(中国中医药科技),2003,10(1):40. E5]PanKY,HuJY,ZhangM.ProtectiveeffectofFried GlycyrrhizaeDecoctiononmicearrhythmiacausedby chloroform口].ForumTraditChinMed(国医论坛),2000, 15(4):42. [6]ChenTJ,YangJY,ZhuL,eta1.TheeffectofRenqing Mangjuecapsuleagainstanoxiaandarrhythmia_J]? PharmacolClinChinMaterMed(中药药理与临床),2003, l9(2):40—41. E7]PanY,ZhangX,ShangWB.EffectofJulyoctionofFructus CorniOfficinalisandextractionatdifferentlocationson breathingtimeofmiceafterJulyollationEJ].JNanjingUniv TraditChiMed:NatSci(南京中医药大学:自然科学 版),2002,l8(4):226—227. E8]WangB,LiuP,ShenYM,eta1.Studiesonthechemical constituentsfromRhodobryumroseum(Hedw)LimprEJ]. ChinJChinMaterMed(中国中药杂志),2005,30(12): 895—897. 葶苈子黄酮对血小板激活因子的拮抗作用 吴伟,金鸣,李金荣,董宁宁 (北京市心肺血管疾病研究所一首都医科大学附属北京安贞医院,北京100029) 摘要:目的研究葶苈子黄酮对血小板激活因子(PAF)诱导的家兔中性粒细胞(PMN) 和洗涤家兔血小板 (WRP)的聚集及黏附作用的影响.方法比浊法观察PAF诱导的PMN(或WRP)聚 集;PAF诱导已着色PMN (或WRP)黏附,比色法测定此PMN(或WRP)破膜后溶液吸光度,表示其黏附活性. 结果葶苈子黄酮可明显 抑制PAF诱导的PMN和WRP聚集及黏附活性的升高(P<0.05).结论葶苈子黄 酮具有拮抗PAF的作用. 关键词:葶苈子黄酮;血小板激活因子(PAF);中性粒细胞 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:0253—2670(2006)10—1539—03 AntagonisticeffectofflavonefromLepidiumapetalumagainst plateletactivatingfactor WUWei,JINMing,LIJin-rong,DONGNing—ning (BeijingInstituteofHeartLungandBloodVesselDiseases—BeijingAnzhenHospital AffiliatedtoCapitalUniversityofMedicalScience,Beijing100029,China) Keywords:theflavonefromLepidiumapetalumWilld.;plateletactivatingfactor(PAF);neut rocyte 葶苈子作为常用的止咳平喘药已经使用了上千 年,其主要功效为泻肺,平喘,利水,消肿.血小板激 活因子(plateletactivatingfactor,PAF)是一活性 很强的炎症介质,它由多种细胞合成,并作用于多种 细胞膜的受体.据文献报道__1],PAF可诱导血小板, 嗜中性粒细胞活化,增进嗜酸性粒细胞的游走活性, 使血管通透性增加,支气管收缩,在迟发型和即发型 哮喘的呼吸道炎症反应等病理生理过程中起了重要 的介导作用.为了探讨葶苈子止咳平喘的作用机制, 本实验观察了葶苈子黄酮影响PAF诱导的家兔中 性粒细胞(PMN)及洗涤的家兔血小板(WRP)聚 集和黏附的作用. 1材料 1.1动物:新西兰家兔,雄性,体重2.0,3.0kg, 北京富豪实验动物养殖中心,为一级合格动物,合格 证号:SCXK(京2000—0019). 1.2药品与试剂:葶苈子黄酮(质量分数为 72.8O%)为北京中医药大学中药生药系赵海誉将 北葶苈子(独行菜,LepidiumapetalumWilld.)药 材研碎后,以7O%乙醇热回流提取,大孔树脂除杂 收稿日期:2006—03—02 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371776) 作者简介:吴伟(1972一),男,助理研究员.Tel:(010)64456481E— mail:tailless@tom.com ?1540?中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月 质后获得,用二甲亚砜(DMSO)配成溶液, 于一18C保存.PAF,明胶(Sigma公司)-;银杏总 内酯由中国药科大学娄凤昌教授提供,含总内酯 81.4,其中含银杏内酯A39.6,含银杏内酯B 39.9,含银杏内酯C2.0,用DMSO配制成适 宜浓度,于一18C保存;牛血清白蛋白(上海丽珠 东风生物技术有限公司);4一(2一羟乙基)一1一哌嗪乙烷 磺酸(中国科学院上海生化物理研究所),其余试剂 均为国产分析纯. 1.3仪器:Chrono--Log型血小板聚集仪(美中互 利公司);UV755B分光光度计(上海分析仪器总厂). 2方法. 2.1家兔PMN制备:参照文献方法],省略加细 胞松弛素B步骤,最后用HBSS液调细胞数为合适 的浓度,即为PMN悬液. 2.2葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔PMN聚集实 验:参照文献方法[2],PAF浓度为9.6×10mol/ L,PMN计数为8.7×108/L. 2.3葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔PMN黏附实 验:参照文献方法[2],其中PBS一无水乙醇改为5O 无水乙醇水溶液,37?破膜30min改为室温放置 30min;PAF浓度为3.8×10_.mol/L,PMN计数 为3.4×108/L. 2.4家兔WRP制备:参照金鸣方法[3],最后用 TTBSA液调血小板为合适的浓度,即为WRP 悬液. 2.5葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔WRP聚集实 验:参照2.2方法,用WRP代替PMN,PAF浓度 为9.6×10.mol/L,WRP计数为7.8×101o/i. 2.6葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔WRP聚集实 验:参照2.3方法,用WRP代替PMN,PAF浓度 为3.8×10,mol/L,WRP计数为2.3×101o/L. 2.7统计学方法:数据结果以x+s表示,采用方差 分析Q检验,使用统计软件SPSS8.0进行统计学 处理. 3结果 3.1葶苈子黄酮抑制PAF诱导的PMN聚集作 用:表1数据表明,葶苈子黄酮对PAF诱导的 PMN聚集有抑制作用,并且这种作用随药物质量 浓度升高有增强的趋势. 3.2葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔PMN黏附作 用:表2结果显示,葶苈子黄酮对PAF诱导的 PMN黏附具有抑制作用,并且这种作用随药物质 量浓度升高有增强的趋势. 表1葶苈子黄酮抑制PAF诱导的PMN聚集作用 (?s,,l一3) Table1AntagonisticeffectofflavonefromL.apetalum againstPMNaggregationinducedbyPAF (;?s,n一3) 组别p/(g?L一)PMN聚集率/%PMN聚集抑制率/oA 与PAF+DMSO组比较:,P<0.01…P<0.001 P<0.01…P<0.001usPAF+DMSOgroup 表2葶苈子黄酮抑制PAF诱导的PMN黏附作用 (?S,n一3) Table2AntagonisticeffectofflavonefromL.apetalum againstPMNadhesioninducedbyPAF (;?s,n一3) 组别o/(g-L一)ASTOPMN黏附抑制率/ 与DMSO组比较:??P<0.001 与PAF+DMSO组比较:…P<0.001 ???P<0.001usDMSOgroup …P<0.001usPAF+DMSOgroup 3.3葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔WRP聚集的 作用:表3数据表明,葶苈子黄酮对PAF诱导的 WRP聚集有抑制作用,并且这种作用随药物质量 浓度升高有增强趋势. 表3葶苈子黄酮抑制PAF诱导的WRP聚集的作用 (;?S,n一3) Table3AntagonisticeffectofflavonefromL.apetalum againstWRPaggregationinducedbyPAF (;?S,n一3) 与PAF+DMSO组比较:P<0.05,P<0.01 P<0.05一P<0.01usPAF+DMSOgroup 3.4葶苈子黄酮抑制PAF诱导家兔WRP黏附的 作用:表4结果显示,葶苈子黄酮对PAF诱导的 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月?1541? WRP黏附具抑制作用,并且这种作用随药物质量 浓度升高有增强的趋势. 表4葶苈子黄酮抑制PAF诱导的WRP黏附的作用 (?,n一3) Table4Antagonisticeffectofflavonefrom,.apetalum againstWRPadhesioninducedbyPAF (?,n一3) 组别P/(g?L)A57onmWRP黏附抑制率/ 与DMSO组比较:??P<O.001 与PAF+DMSO组比较:一尸<0.01…P<0.001 ???P<o.001VSDMSOgroup —P<o.Ol…P<o.001VSPAF+DMSOgroup 4讨论 气道活检和支气管肺泡灌洗液检查发现哮喘病 人气道黏膜和分泌液中有大量的嗜酸性粒细胞,中 性粒细胞,血小板等炎性细胞渗出.经研究发现气道 炎症即是引起气道高反应性从而导致气道平滑肌敏 感和痉挛的主要原因,也可直接导致气道通气障 碍_4].故气道炎症与哮喘存在着密切关系.CourtE] 报道支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液中PAF明 显高于正常对照组及其他肺病组.PAF是支气管哮 喘中重要的炎性介质之一,它可通过增高气道反应 性,使支气管痉挛,形成气道黏液栓,加剧气道炎症 反应_6等多种途径引发哮喘. 葶苈子为十字花科植物独行菜Lepidium apetalumwilld(北葶苈)和播娘蒿Descurainia sophia(L?)WebbexPrantl(南葶苈)的成熟种 子,味苦辛,性寒.常以煎剂单剂或加味用于肺气壅 塞,痰饮喘咳,水肿胀满等症状,临床上用于治疗慢 性肺源性心脏病合并心力衰竭和急慢性支气管炎, 肺部感染,哮喘等呼吸系统疾病.本研究发现,葶 苈子黄酮具有抑制PAF诱导的家兔PMN和WRP 聚集,黏附作用,提示葶苈子黄酮的抗PAF作用可 能是葶苈子止咳平喘的作用机制之一. PAF的生物学效应是通过特异性膜受体转导 的,在血小板,中性粒细胞,内皮细胞,巨噬细胞等细 胞膜上均有PAF受体存在.PAF的作用可被PAF 受体拮抗剂所抑制.本室研究发现,羟基红花黄色素 A具有抗PAF诱导的家兔PMN和WRP聚集作 用,并具有抑制PAF受体结合作用,为一种新型 的PAF受体拮抗剂.葶苈子黄酮与羟基红花黄色 素A均具有黄酮类结构,说明PAF受体拮抗作用 可能是其抗PAF诱导的家兔PMN和WRP聚集, 黏附作用的机制,此推测还有待于用受体结合实验 研究进一步证实. References: [1]GongtengYL.ClinicalapplicationofPAFantagonist[J]. WorldPharm:丁E?(国外医药一合成药,生化药,制剂分 册),1993,13(3):159—163. [23WuW,LiJR,ChenWM,ela1.Inhibitoryeffectofsome flavonolsfromCarthamustinctoriousagainstpolymorpho— nuclearleucocyteaggregation,adhesioninducedbyplatelet activatingfactor[J].ChinPharmJ(中国药学杂志),2002, 37(10):743—746. [3]JinM,WuW,ChenWM,ela1.Inhibitionofsaffloryellow againstthebindingofplateletactivatingfactortoitsreceptor invitro[J].ChinPharmJ(中国药学杂志),2001,36(3): 167—169. [43LiMH,YinKS,ZhuSL.Asthmology(哮喘病学)[M]. Beijing:PeopleSMedicalPublishingHouse,1998. [5]CourtEN,DadbyPG,HendrichDJ,ela1.PAFinBAL fromasthmaticpatients[J].BrJClinPharmal,1987,24: 258—261. [6]LuJQ,GuZK.PAFandasthma[J].AcadJJiangsu Univ:MedSci(江苏大学:医学版),2003,13(3):266— 269. [7]LiGY,SuTX.Treatmentofcongestiveheartfailureand applicationofSemenLepidiiandSemenDescurainiae[J].J PractTraditChinIntMed(实用中医内科杂志),1995,9 (3):l8一l9. [8]ZangBX,JinM,SiN,ela1.Antagonisticeffectofhyde— oxysaffloryellowAontheplateletactivatingfactorreceptor [J].ActaPharmSin(药学),2002,37(9):696—699. 《中草药》杂志被评为"第四届中国百种杰出学术期刊" 2005年12月,中国科学技术信息研究所公布了"第四届中国百种杰出学术期刊"名单,《中草药》杂志获 此殊荣——"第四届中国百种杰出学术期刊".这个名单是按照期刊指标评价体系对重要指标(影响因子,总 被引频次,他引总引比,基金论文比和即年指标)进行打分的结果,并在近几年来召开了20余场专家研讨会, 对评价指标不断进行推敲和改进而评出的. 摘引自中国科学技术信息研究所《2004年度中国科技论文统计与分析年度研究报告》