ICAM—1和E—selectin在急性胆管炎肝损害中的作用

ICAM—1和E—selectin在急性胆管炎肝损害中的作用 ICAM—1和E—selectin在急性胆管炎肝损 害中的作用 垂墨我宫工M—f中 302 文一;.; ICAM—l 重度医学2000年7月第29卷第4期 和E—seiectin在急性胆管炎肝损害中的作用 7,) 第三军医大学大坪医院普外科(400042)莲显趣\/ 第三军医大学西南医院肝胆中心韩本主7 摘要目的挥计ICAM一1和E—selectim在惠性胆管吏肝掘害中的作用.方法应用组织学方法观察ICAM一1和E— selectin对肝组织PMN浸润覆其肝损害作用的影响.结果急性胆管吏时PMN在肝窭覆肝细胞周围大量聚集.大鼠肝细胞变性坏 死.动物12小时存活率忸为566%.抗[CAN一1覆E一5e】酬_兀单抗预处理使肝蛆织P州数量明显减少.肝坏死面积减少.动物存 活率提高.结果I(M一1和E—selectin在胆道感染时肝组织PMN浸润覆其肝损害过程中发挥重要作用. 关键词胆道感染中性粗细胞肝损害 EffctsofICAM一1andE—selectln0nHepaticDamageinSevereCholangitis 如增Xia.,lt~"-I-~ngBe~di.咖ofGenerMS舯.f加Hospita1.Thdflc,mUnhersity,g400042 AbstractAlmH&Methods:TheeffectsICAM-10ridE—selecfn0nt3vNaccumulationinliverandhepaticdamagewereinvest_瞎ated. Rcaults:It啪foundthatPM',Iacct~ulatedinhepaticsinusoidsondarotlndhepatocytes,necrosisd*hehepa tccytesmokplace.andonly666% draBsm~,'ived12hoursafterinfectionPretreatmentdantiICAM一1andE—selectinmAbdecreasedthen~tberdinhepaticsinusoidand rarhepatsocytes.decreasednecrosisofthehepatccytes.andtrepr~'edsurvivalmteoftheinfee tedl~tesConclusion:The瞄uItss~gestthatICAM 一 1andE—selectinplayarttmportm-ltmleinacct~nulationandhepaticdamageinacutecholar~ius Keywords:~,~naolangitis;Polyrc*:cphonuclearcell;Hepaticdamage 本文观察了细胞牯附分子ICAM一1和E—selectin对急性 胆管炎大鼠循环中性粒细胞(Pol~xnorphoauciear.PM)在肝脏聚 集及其肝损害作用的影响,旨在阐明ICAM一1和E—selectth在 急性胆管毙肝损害发生发展中的作用. 1材料与方法 l,1动脉模型及分组Wislar大鼠.傩重200,250克.随机分 为三组:(1)急性胆昔毙组动物乙醚吸人麻醉,无菌条件下开 腹,分离胆总管,结扎远端.近端注入03ml大肠杆茁液1× 10.关腹.(2)ICAN一1单抗预处理组于胆管注射大肠杆菌 液前30分钟静脉注射抗大鼠ICbM—l单抗3Hg,(R,美 国).(3)E一~lectin单抗预处理组于胆管注射大肠扦苗液前 30分钟静脉注射抗大鼠E—seleetin单抗3嗍/(意大利Ro~si 教授惠赠).每组6只动物,于术后12小时取材. 12组织学观察大鼠麻醉后开胸.经左心室一主动脉插管 灌注生理盐水.然后灌注4%多聚甲醛.30分钟取出肝组织, 4%多聚甲醛继续固定.常规方法制作光镜切片,HE染色.观察 肝组织基本病理改变并制作电镜切片,透射电镜观察肝脏超 檄结构变化. 13肝组织计数??每张片随机取10个高倍视野(× 4110),在视野充满组织条件下计数肝窦及肝细胞周围的P~ 较大血管内的PMq不计算. 1.4肝组织坏死面积在光镜下视野充满肝组纲条件下. 每张切片随机观察5个低倍视野(x100),用计算机图像分析 系统分别测定坏死及正常肝组织的面积.计算坏死面积的百分 率. 2结果 21动物存活率急性胆管炎大鼠12小时存活率为66.6%. K【一l及E一[ectir~单抗预处理组均为100%,相差显着(P <005)0 22肝脏组织学改变 221大体观察急性胆臂炎大鼠梗阻近端胆管扩张.肝充 血肿胀.胆管中克满黄白色脓性胆汁,肝表面可见多发性粟粒 脓肿.抗IC,Nvl一1及E—seleetin单抗预处理大鼠病变明显减 轻.肝表面未见脓肿形成. 222光镜观察急性胆管炎组可见肝小叶问胆管扩张,腔 内充满坏死组织碎片,肝细胞索排列紊乱,肝窦扩张.肝细胞普 遍浊肿.肝细胞片状坏死.抗[CAM一1及E—selectin单抗预处 理组肝损伤明显减轻,肝细胞肿胀,排列紊乱程度较轻.肝细胞 仅有散在局灶性坏死.见图1,图2. 图l太鼠肝,急性胆管毙组24小时,肝细胞太片状坏死,细胞崩解,有 大量炎细胞浸稠.(}00) 图2大鼠肝,Ic^M一1单抗预处理组24小时,肝窭扩张,肝细胞浊肿. 肝细胞有数在局灶性坏死,炎细胞幔澜较少(1-mX20o) 223电镜观察急性胆管炎组毛细胆管明显扩张.镀缄毛 峨少.肝细胞线粒体肿胀,嵴断裂,减步.内织网扩张.髓鞘样 变,肝细胞表面徽绒毛减少,狭氏间隙增宽.部分肝结构消失. 抗ICAM1及Eselectin单抗预处理组肝窦内皮细胞变性,肝 重庆医学2.000年7月第29卷第4期 细胞变性及结构破坏均显着减轻见圈3,图4. 圈3大鼠肝.急性胆首戎组24小时.肝细胞线粒傩肿胀,空化,嵴断裂 崩解.内织同扩张.肝细胞表面微绒毛减少,棱膜间隙增宽,(Xt0O0O) 图4大鼠肝.]CAM1单抗预蛆24小时.肝细胞变性,胞浆髓鞘样变, 桉膜增宽,染色质边移.fXlOOOO) 23肝窦及肝细胞周围PMN数量变化 急性胆管炎组肝组织PMN数量遗382?81,主要聚集在肝窦 及肝细胞周围,抗[CAM一1及E—selectin单抗预处理组肝窦及 肝细胞周围P3,~N显着低于急性胆管炎组.分别为140?43及 164?52,相差非常显着(P<001).见图5,图6. 图5太鼠肝.急性胆管爽组24小时.肝窦间隙增宽,有较多白细胞浸 润.(HEX400) 圈6太鼠肝,[CAMl单抗预赴理组24小时,肝窦间隙增宽减轻,白 细胞浸润数量减步.(HEX400) 303 24肝组筝!坏死面秽{变化急性胆管炎太鼠肝组织坏死面积 46%.抗ICAM一1及E—selectin单抗预处理大鼠肝 选121? 组织坏死面积显着减少.分别为38?1.6%及42?08%.相 差非常显着(P<001) 3讨论 31ICAM一1,Ese]ectin与肝组织PM'q浸润Fb/LN在抵御病 原微生物的^侵及对各种病理性损害的防御中具有非常重要 的作用但PMN在组织和脏器的大量聚集和过度活化可转丽 造成组织损伤.近年来研究发现PM'q耐组织细胞的损害作用 依赖PMN与微血管内皮细胞的牯附,而这种粘附的分子基础 是PM'q和微血管内皮细胞表面细胞牯附分子的表达变化_d. 在多种细胞因子或化学介质作用下,P咖与血管内皮细胞表 面的一些牯附分子表达增强,使自细胞与微血管壁牯着,贴壁 翻滚,继而与微血管壁牢固牯附,并可穿过血管内皮进人组织 中,引起一系列炎症反应. 本文结果显示胆道感染太鼠肝脏PM'4数量明显增多.主 要聚集在肝窦及肝细胞周围,特别是肝细胞坏死区域大量 P聚集.用抗ICAM1或抗E—selecdn单抗预处理大鼠使 肝窦及肝细胞周围P眦数量显着降低.说明]CAM—I和E— selectin在急性胆管炎时PMN与肝窦内皮细胞牯附及穿越肝窦 内皮细胞在肝细胞周围聚集过程中发挥重要作用. 3.2ICAM一1,E—selectin与急性胆管炎肝损害的关系PMN 在组织和脏器的大量聚集和过度活化,可通过呼吸爆发释放活 性氧,水解蛋白酶及脂类代谢产物,造成脏器的细胞损害 PM'4在微血管的牯着和嵌塞,引起微循环灌流量下降,组织进 一 步缺血缺氧.加重脏器的细胞损害J.PMN与微血管内皮 细胞粘附使血管内皮细胞活化并释放N0,内皮素,II一1,II一 6,PAF等多种介质及细胞因子.内皮素使微血管强烈收缩,脏 器血流量减少.造成组织缺血缺氧损害_]?.II.一1,?.6,PAF 等可直接造成组织损害. 本实验急性胆管炎太鼠肝细胞浊肿,空泡变性,肝细胞排 列紊乱,肝窦扩张.井肝细胞片状坏死.肝细胞线粒体肿胀,断 裂,灶性空化,内质网扩张,胞质髓鞲样变等损害.用抗ICAM 一 1或E—selectin单抗预处理使急性胆管炎大鼠肝细胞损害明 显减轻.肝坏死面积减少.死亡率明显降低.说明肝脏PMN聚 集参与胆道感染肝损害. 参考文献 1Kct~tsuY'Shiratcr4Y,etalRoleofpofymotplrmuclear leukoeyt~ingala~nehepatitismechanismofadherenceto hepaticendodmlialcellHepatology,1994,20:1548 2EssaniNA,Fim.Fa~odA.elCytokine—irIducedup regulationdhepaticimercellualaradhesionmolecule—lmesse~ger fexpre&~icaaanditsroleinduepathophysiologyofmmfne?d._ toxinshockand&cuteliverf&lL?eHepa?10g1995,21:1632 3金伯泉主编细胞和分子免疫学.世界图书出版公司.1994 4llerVK,BumettJC.ela1.Differentialsens~tivity? endothelin?caninearteriesardveitxs.AntJPyslol,1989,257: H1127 5王迪浔主编.病理生理学北京:人民卫生出版社,1994:59