HBME_1_Galectin_3和CD44v6在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的表

HBME_1_Galectin_3和CD44v6在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf HBME-1、Galectin-3和CD44v6在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的表达任俊奇1，迪 丽努尔?阿西木2，尼加提?热合木11(新疆医科大学基础医学院，乌鲁木齐8300542(新 疆维吾尔自治区人民医院，乌鲁木齐830054收稿日期:2010-02-02作者简介:任俊 奇，硕士研究生，研究方向为甲状腺病理，电子信箱:renghissina.com;尼加提?热 合木(通信作者)，教授，?芯糠较蛭 鬃聪佟?橄佟?傲邢俨?恚 缱有畔洌簄 ijatyiliyahoo.com.cn摘要探讨间皮瘤相关抗体-1(HBME-1)、半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)及粘附分子CD44v6在甲状腺滤泡癌(FollicularThyroidCarcinoma，FTC) 与不典型腺瘤(AtypicalThyroidAdenoma，ATA)中的表达差异，寻找有助于二者 临床病理诊断的肿瘤标记物及探索其部分发病机制，拟解决在甲状腺临床病理中对 良、恶性难以确定的滤泡性肿瘤的准确判定及对其预后的预示作用。采用免疫组化 SP三步法检测37例FTC及18例ATA中HBME-1、Galectin-3和CD44v6的表达，以10 例嗜酸性腺瘤(OncocyticThyroidAdenoma，OTA)、8例普通滤泡性腺瘤 (FollicularThyroidAdenoma，FTA)、7例甲状腺乳头状癌 PTC)及5例尸检正常甲状腺组织作为对照。结果显(PapillaryThyroidCarcinoma， 示，HBME-1、Galectin-3及CD44v6在FTC中的阳性表达率分别为70.3、64.9和62.2， 在ATA中阳性表达率分别为66.7、61.1和61.1，三者在FTC与ATA中的表达差异均无 统计学意义(χ2分别为0.074、0.094、0.245，P值分别为0.786、0.759、0.620，P值 均,0.05);在10例OTA中的表达均为100;8例FTA中的表达分别为3/8例、6/8例及 7例PTC的表达分别为7/7例、6/7例及7/7例;5例正常尸检甲状腺组织均无表4/8例; 达。由此得出结论:HBME-1、Galectin-3和CD44v6对FTC与ATA的临床病理鉴别诊 断无统计学意义，但提示三者可能在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤的发病机制及进展 过程中起着某种共同作用。由于此3种标记物已被证实在诸多肿瘤的发生、发展过程 中起着重要作用，故在实际甲状腺临床病理诊断中对表达此3种标记物的良、恶性难 以确定的病例可能提示其恶性程度增高，尽管不足以诊断为癌，但仍应加强随访。 有关FTC与ATA的临床病理诊断与鉴别诊断及二者的发病机制尚有待于进一步的探 索和研究。关键词甲状腺滤泡癌;甲状腺不典型腺瘤;HBME-1;Galectin-3;CD44v6; 免疫组织化学中图分类号R736.1，R392.11文献标识码A文章编号1000-7857(2010) 07-0037-04ExpressionofHBME-1Galectin-3andCD44v6inFollicularThyroidCarcinomaandAtypicalAdenomaRENJunqi1AXIMUDilinuer2REHEMUNijat11(CollegeofBasicMed icalScienceXinjiangMedicalUniversityUrumqi830054China2(XinjiangUighurAutonom ousRegionGeneralHospitalUrumqi830054ChinaAbstactThispaperstudiestheimmunohistochemicalexpressionsofHBME-1Galectin-3andCD44v6inFollicularThyroidCarcinomaFTCandAtypicalThyroidAdenomaATAinordertofindoutusefulmarkersfortheirclinicopathologicaldiagnosisandpathogenesis.SPimmunohistochemicaltechniquewasappliedtodetecttheexpressionsofHBME-1Galectin-3andCD44v6in37FTCand18ATA.10casesofoncocyticthyroidadenomaOTA8casesofgeneralfollicularadenomaFTAand7casesofpapillarthyroidcarcinomaPTCwereconsideredtogetherwith5casesofnormalthyroidfromautopsyasthecontrolgroup.ResultsshowthattheexpressionsofHBME-1Galectin-3andCD44v6were70.364.962.2inFTC66.761.161.1inATArespectively.ThesethreemarkersdonothavedifferenceofstatisticalsignificanceinFTCandATAχ2andPvalueswere0.074and0.7860.094and科技导报2010，28(7) 370引言不典型腺瘤(ATA)是指具有以下特征的滤泡性肿瘤:即富于细胞、核异 型或不寻常的组织学形态(例如梭形细胞巢)，而充分取材中不见血管和包膜侵犯1。 长期以来，对甲状腺滤泡癌(FTC)与ATA的诊断及鉴别诊断一直是临床病理界最为棘手的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 之一。目前二者唯一可靠的诊断依据即包膜侵犯、血管侵袭及远处转移，而在一些实际工作中诊断为良性腺瘤或不典型腺瘤者却有发生远处转移的情况。在临床病理实际工作中也因取材及切片等客观因素、难以抗拒的局限性和病理医师个人诊断上的主观倾向性，而对FTC和ATA造成漏诊或过诊。肿瘤的发生及发展是一个连续性的事件，不同肿瘤的发生机制亦不完全一致，为此在其功能行使方面必然存在其相应载体蛋白等物质的表达差异性。本研究通过免疫组织化学技术对间皮瘤相关抗体-1(HBME-1)、半乳糖凝集素-3(Galectin-3)及粘附分子CD44v6在FTC与ATA中表达差异性的研究，以探讨和寻求其对FTC与ATA的诊断及鉴别诊断的意义及其在二者中的部分发病机制。1材料与方法1.1材料收集新疆维吾尔自治区人民医院及新疆医科大学第一附属医院1980年1月至2009年3月病理科手术活检标本存档蜡块，所有选入标准均参照2006年版江昌新等主译“世界卫生组织肿瘤分类及诊断标准系列”之《分泌器官肿瘤病理学和遗传学》诊断标准1，选入标本包括FTC37例、 )，女性38人(69.1);年龄13,75岁，平均43.5岁。另ATA18例。男性17人(30.9 选嗜酸性腺瘤(OTA)10例、普通滤泡性腺瘤(FTA)8例、甲状腺乳头状癌(PTC)7例及尸检正常甲状腺5例作为对照。单克隆HBME-1购自美国Thermo公司，Galectin-3和CD44v6均购自北京中衫公司。工作浓度:HBME-1为1:40，Galectin-3为1:90，CD44v6为1:30。1.2方法所有标本均经10中性福尔马林固定，常规组织处理， 连续切片，多聚赖氨酸处理过载玻片捞片，放入50?温箱过夜。石蜡包埋，4μm厚 采用SP三步法进行HBME-1、Galectin-3和CD44v6染色，DAB显色，苏木精复染，50?温水反蓝10min。HBME-1、Galectin-3和CD44v6分别以间皮瘤、胃癌及扁桃体作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。结果判断:HBME-1以细胞膜及滤泡腔缘棕黄色着色为阳性，CD44v6以细胞膜棕黄色着色为阳性，Galectin-3以胞浆、胞膜及胞核棕黄色着色为阳性。评分判定参照immuno-ractivescore半定量法2:?染色强度计分:无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;?阳性分布范围计分:,5为阴性，5,25为1分，26,50为2分，51,75为3分，,75为4分。以上两项结果相乘:0分记为阴性(,)，1,2分记为弱阳性(，)，3,6分记为中等阳性(，，)，,6分记为强阳性(，，，)。1.3统计学处理应用SPSS统计软件包13.0对实验数据进行统计分析处理，某标记物在两组中的表达差异性用χ2检验，两两标记物之间的相关性用Spearman秩和相关检验分析，两组之间某指标有统计学意义判断其在各组间表达程度的高低可通过观察平均秩次大小，α0.05。2结果2.1HBME-1、Galectin-3及CD44v6在甲状腺组织中的表达HBME-1主要呈棕黄色表达于肿瘤细胞膜及滤泡腺腔缘;Galectin-3主要呈棕黄色表达于胞浆，亦可见于胞膜及胞核;CD44v6主要呈局灶性网格状胞膜表达，亦可呈弥漫性表达。HBME-1、Galectin-3及CD44v6在FTC中的阳性表达率分别为70.3、64.9和62.2，在ATA中的阳性表达率分别为66.7和61.1和61.1。在OTA中均为100阳性表达，在FTA中阳性表达率分别为37.5、75和50，在PTC中阳性表达率分别为100、85.71和100，在5例尸检正常甲状腺组织中均为阴性表达。此三者标记物在FTC与ATA中的表达差异均无统计学意义(χ2分别为0.074、0.094、0.245，P值分别为0.786、0.759、0.620，P值均,0.05)(表1)。2.2HBME-1、Galectin-3及CD44v6在FTC中表达相关性HBME-1与Galectin-3在FTC中的表达呈正相关(P0.002，r0.512)(表2);HBME-1与CD44v6 在FTC中的表达呈正相关(P0.000，r0.590)(表3);Galectin-3与CD44v6在FTC中的表达呈正相关(P0.029，r0.360)(表4)。2.3HBME-1、Galectin-3及CD44v6在ATA中表达相关性HBME-1与Galectin-3在ATA中的表达呈正相关(P0.087，r0.403);HBME-1与CD44v6在FTC中的表达无相关性(P0.732);Galectin-3与CD44v6在ATA中的表达呈正向关(P0.001，r0.766)。 0.7590.245and0.62respectively.InthecontrolgrouptheexpressionsofHBME-1Galectin-3an dCD44v6wereallpositiveinOTA3/86/84/8inFTA7/76/77/7inPTCandnegativein5normalthy roid.ItisconcludedthatthereisnostatisticalsignificanceofHBME-1Galectin-3andCD44v6int hediagnosisanddifferentialdiagnosisofFTCandATAanditshouldpaymoreattentiontofollow upthesethreemarkers.MorestudiesarerequiredonthediagnosisanddifferentialdiagnosisofFT CandATA.KeywordsfollicularcarcinomaatypicaladenomaHBME-1Galectin-3CD44v6im munohistochemistry38科技导报2010，28(7)表1HBME-1、Galectin-3和CD44v6在甲状腺组织中的表达Table1ExpressionsofHBME-1Galectin-3andCD44v6inthyroid3讨论FTC与FTA的鉴别诊断在于确定是否有肯定的包膜侵犯、血管侵袭及远处转移，但在实际工作中，由于取材、切片等客观因素及病理医师个人诊断的主观偏差而时常对二者的诊断产生分歧，甚至一些世界权威的甲状腺病理学家之间亦是如此。于是，诸如不典型腺瘤、hybrid癌，以至最近被提出的恶性潜能未定可疑包膜侵犯而缺乏乳头状癌核特征的滤泡性甲状腺肿瘤(FT-UMP)等术语，被不同病理学家所采用3。Galectine-3为β-半乳糖连接生物素蛋白家族成员，在细胞与细胞、细胞与细胞外基质间相互作用中起着重要作用，参与细胞增生与凋亡、肿瘤转化及转移等过程4。已证实在甲状腺癌、胃癌、乳腺癌及淋巴瘤等肿瘤中均有Galectine-3表达5。HBME-1为间皮细胞表面微绒毛成分，主要成分为透明质酸，在肿瘤血管形成、肿瘤的生长及转移等中发挥作用。以往研究发现HBME-1在间皮瘤、肺腺癌、胰腺癌及乳腺癌等肿瘤中呈阳性表达，一个偶然机会发现HBME-1在PTC中呈弥漫性强阳表达。Mauro等6报道8例恶性潜能未定可疑包膜侵犯而缺乏乳头状癌核特征的滤泡性甲状腺肿瘤(FT-UMP)中有3例局灶性表达Galectin-3，5例局灶性表达HBME-1，8例中有5例至少表达Galectine-3或HBME-1其中的一种，仅3例中二者均阴性，认为Galectin-3与HBME-1缺乏对FT-UMP与滤泡癌的鉴别诊断作用。Mase等7认为HBME-1表达阳性者，其术后复发风险会增高，良性腺瘤表达阳性者则应加强随访。日本学者Ito等8报道HBME-1在138例FTC中阳性表达率为60.9，155例FTA中为30.3，差异有统计学意义(P,0.0001)，对于FTC与FTA间阳性预测值为64.2，HBME-1不能作为FTC术前细针穿刺病理诊断。国内学者孔庆杨9研究显示，Galectin-3在FTC与ATA中的表达无统计学意义，对FTC与FTA的鉴别诊断不是一个可靠标记物。本研究显示，HBME-1与Galectin-3在37例FTC和18例ATA中的阳性表达率分别为70.3和66.7，64.9和61.1。HBME-1、Galectin-3在FTC与ATA中的表达均无统计学意义(χ2分别为0.074、0.094，P值分别为0.786、0.759，P值均,0.05)。CD44v6是一种细胞表面跨膜糖蛋白粘附分子，介导淋巴细胞归巢，参与细胞与细胞及细胞与细胞外基质间相互作用，与肿瘤的侵袭和转移密切相关。研究发现CD44v6高表达于肺癌、乳腺癌、大肠癌等肿瘤，直接参与肿瘤的浸润及转移10。有关CD44v6与甲状腺癌的关系近来也有陆续报道，但多限制于乳头状癌，而有关其在FTC与ATA中表达差异性研究国内尚未见报道。陈文有等11报道56例FTC中CD44v6阳性表达率为57.0，20例FTA中阳性表达率为20，二者差异有统计学意义(P,0.05)。王修化等12研究显示， 30例滤泡癌中CD44v6阳性表达率为66.7，明显高于正常甲状腺组织。本研究中CD44v6在37例FTC中阳性表达率为62.2，在18例ATA中阳性表达率为61.1，二者表达差异无统计学意义(P0.620)。HBME-1、Galectin-3和CD44v6在FTC和ATA中的表达均无统计学意义，三者均不能作为FTC和ATA鉴别诊断的组别nHBME-1Galectin-3CD44v6，阳性率/，阳性率/，阳性率 /FTCATAOTAFTAPTCNT37181087526121037070.366.7100.037.5100.002411106606 4.961.1100.075.085.7023111047062.261.1100.050.0100.00表2HBME-1和Galectin-3在FTC中表达相关性 Table2ThecorrelationofHBME-1andGalectin-3inFTCHBME-1Galectin-3χ2Pr，-，,213589.7070.0020.512表3HBME-1和CD44v6在FTC中表达相关性 Table3ThecorrelationofHBME-1andCD44v6inFTCHBME-1CD44v6χ2Pr，-，,2125912.8730.0000.590表4Galectin-3和CD44v6在FTC中表达相关性 Table4ThecorrelationofGalectin-3andCD44v6inFTCGalectin-3CD44v6χ2Pr，-，,185684.7860.0290.360科技导报2010，28(7)39有用标记物。分析其原因可能有以下几点:?目前对于“不典型腺瘤”这个诊断术语仍是一个很没有把握的诊断，在临床实际工作中，当遇到一些细胞分化不良、细胞丰富及可疑包膜侵犯、血管侵袭病例的滤泡性甲状腺肿瘤，而在补取材及蜡块深切后仍未找到有肯定的FTC诊断依据时，往往将这类病变归为ATA，而实际上很多的ATA可能只是FTC的保守称谓，在足够多的取材和足够多的切片情况下也许就能真正发现包膜侵犯及血管侵袭;?可能真的存在一种介于FTC与FTA之间的交界性肿瘤，也就是现在姑且被许多学者采用的术语“不典型腺瘤”，而在本实验研究中，FTC与所谓的ATA之间HBME-1、 和CD44v6这3种抗原的表达本身就不具差异性，也就是说它们在ATA向Galectin-3 FTC的演进中没有起到重要作用;?当临床工作中遇到表达此3种抗原的FTA时，往往提示其可能有较为潜在的侵袭性，应加强随访。另外，令人感到有趣的是在对照组10例OTA中，此3种标记物均为100的胞浆阳性表达，且强度均在“”以上，其表达的这种特殊性原因不明，可能预示着OTA有着较FTA不良的生物学行为。在FTC与ATA各自的演进中，此3种抗原似乎表现出一定的相关性，本研究显示HBME-1与Galectin-3在FTC中的表达呈正相关(P0.002，r0.512)，HBME-1与CD44v6在FTC中的表达呈正相关(P0.000，r0.590)，Galectin-3与CD44v6在FTC中的表达呈正相关(P0.029，r0.360);HBME-1与Galectin-3在ATA中的表达呈正相关(P0.087，r0.403);HBME-1与CD44v6在FTC中的表达无相关性(P0.732);Galectin-3与CD44v6在ATA中的表达呈正相关(P0.001，r0.766)。总之，有关FTC与ATA的诊断与鉴别诊断仍是目前世界病理界的难点之一，急待进一步的研究。4结论1)本研究结果显示:HBME-1在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的表达差异性无统计学意义(χ2,0.074，P,0.786)，HBME-1对于甲状腺滤泡癌与不典腺瘤的临床病理鉴别诊断没有帮助，但对于良恶性难以确定的滤泡性肿瘤如表达HBME-1，则可能提示其具备更加侵袭性的生物学行为，应加强随访。Galectin-3在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的表达差异性无统计学意义(χ2,0.094，P,0.759)，Galectin-3对于甲状腺滤泡癌与不典腺瘤的临床病理鉴别诊断没有帮助，但对于良恶性难以确定的滤泡性肿瘤如表达Galectin-3，则可能提示其具备更加侵袭性的生物学行为，应加强随访。CD44v6在甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤中的表达差异性无统计学意义(χ2,0.245，P,0.620)， CD44v6对于甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤的临床病理鉴别诊断没有帮助，但对于良恶 性难以确定的滤泡性肿瘤如表达CD44v6，则可能提示其具备更加侵袭性的生物学行 为，应加强随访。2)尽管HBME-1、Galectin-3和CD44v6在甲状腺滤泡癌与不典型 腺瘤中的表达差异性不具统计学意义(P值均,0.05)，对于二者的临床病理鉴别诊 断没有帮助，但在甲状腺临床病理实际工作中，当遇到良恶性难以确定的滤泡性肿 瘤如表达此3种标记物，则可能提示其具有更加侵袭性的生物学行为，应加强随访。 3)甲状腺滤泡癌与不典型腺瘤在发生、发展过程中可能存在某些共同的病理机制， 不典型腺瘤也许理解为滤泡癌的原位癌可能更为合适。4)HBME-1、Galectin-3和 CD44v6在嗜酸性腺瘤中均呈现中至重度胞浆表达，其是否预示着嗜酸性腺瘤具有更 加侵袭性的生物学行为尚难确定，需进一步的探索和研究。参考文献(References) 1江昌新谭郁彬主译.世界卫生组织肿瘤分类及诊断标准系列之内分泌器官肿瘤病理 学和遗传学M.第1版.北京:人民卫生出版社 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