天门冬氨酸氨基转移酶液体试剂盒
天门冬氨酸氨基转移酶液体试剂盒—上海申能
天门冬氨酸氨基转移酶液体试剂盒 (IFCC推荐方法)
Aspartate Aminotransferase (AST)
含/不含磷酸吡哆醛
本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆天门冬氨酸氨基转移酶催化活力。
【订货信息】 (如磷酸吡哆醛100 ,l +“试剂1”10 ml)
货 号 试剂盒规格 混合试剂稳定性:2,8?保存可稳定6天
141 2607020 2 试剂1 4×50ml,试剂2 2×25ml 15,25?保存可稳定24小时
141 2607060 1 试剂1 5×80ml,试剂2 5×20ml 以样品起始的反应(不用磷酸吡哆醛) 141 2607170 1 试剂1 6×64ml,试剂2 6×16ml 混合“试剂1”4份+“试剂2”1份 141 2600100 1 试剂1 2×80ml,试剂2 2×20ml (例如“试剂1”20 ml +“试剂2”5 ml)成为单试剂(R)。
单试剂稳定性:2,8?保存可稳定4周 [1,2]25?保存可稳定5天 【摘要】 15,
丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT),天门冬氨单试剂必须避光保存~ 酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)。它们是氨基转
移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给,-未提供的实验所需物品 酮酸的反应。 Diasys公司的磷酸吡哆醛试剂(用于含磷酸吡哆醛的测定)。 ALT是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水9 g/L氯化钠溶液
平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝组织损害等都有关。因一般的实验室仪器设备 此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌
损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率< 1预示中【标本】
度的肝损伤;比率> 1和严重肝病有关,常见慢性肝病。 血清、肝素或EDTA血浆。
3天内的活性损失:2,8?保存:< 8 %
【方法】 15,25?保存:< 10 % 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 标本稳定性:-20?保存至少可稳定3个月。
不可使用已被污染的标本。
【原理】
【测定程序】 AST L-天门冬氨酸+ ,-酮戊二酸 草酰乙酸+ L-谷氨酸 若需要自动生化分析仪应用参数,请随时和公司联系。
测定条件 MDH(苹果酸脱氢酶) + +草酰乙酸+ NADH +HL-苹果酸+ NAD + HO 波长 340 nm,Hg 365 nm,Hg 334 nm 2
比色杯光径 1.0 cm 【试剂】 温度 37?
在测定时各组分和浓度 分析类型 连续监测法 试剂1(R1): 检测 扣除杯空白 Tris缓冲液pH 7.8 80 mmol/L
L-天门冬氨酸 240 mmol/L 操作步骤
MDH(苹果酸脱氢酶) , 600 U/L R1(试剂1)
LDH(乳酸脱氢酶) , 600 U/L R2(试剂2)
R(混合单试剂)
试剂2(R2): S(TruCal U复合校准品) ,-酮戊二酸 12 mmol/L 样品 血清或血浆
NADH 0.18 mmol/L 以底物起始的反应
延迟时间 读数时间 孵育时间 磷酸吡哆醛试剂: 5 min 1 min 2,3 min Good’s 缓冲液 pH 9.6 0.7 mmol/L
磷酸吡哆醛 0.09 mmol/L
?仪器记录吸光度变化ΔA/min
试剂稳定性与贮存
试剂避光保存于2,8?,若无污染,可稳定至失效期。试剂?加R2: 250 ,l 不可冰冻。
?S、蒸馏水或样品: 100 ,l
?R1: 1000 ,l 注意事项
1. 试剂中含叠氮钠(0.95 g/L)为防腐剂。不可入口~避免
接触皮肤及粘膜。 以样品起始的反应
2. 应采取必要的预防措施使用试剂。 本程序不使用磷酸吡哆醛~
废液处理 延迟时间 读数时间 参照各地方法规
要求
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。 1 min 2,3 min
试剂准备
以底物起始的反应 ?仪器记录吸光度变化ΔA/min。 试剂为即用式。 ?S、蒸馏水或样品: 100 ,l 若进行含磷酸吡哆醛的检测,可在100份试剂1中加1份磷酸?R: 1000 ,l
吡哆醛,混匀。
沈阳金
标准
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天门冬氨酸氨基转移酶液体试剂盒—上海申能
方法学比较
【计算】 不含磷酸吡哆醛
以TruCal U复合校准品AST校准值校准仪器后,在病人结果本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。 时对78个样品进行AST活力检测,将检测结果作方法学比较,不使用校准品进行AST活力检测,可以直接使用ΔA/min均值其统计结果如下:y=0.98x-0.51 U/L;r = 0.999。 乘以计算因子得到结果,但是这样所得结果的可靠性不如使用含磷酸吡哆醛
校准品。计算ALT 活力的计算因子见下表: 本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时
ΔA/min×因子 = AST活力 [U/L] 对80个样品进行AST活力检测,将检测结果作方法学比较,
底物起始的反应(37?) 样品起始的反应(37?) 其统计结果如下:y=0.97x-0.79 U/L;r = 0.995。 340 nm 2143 1745 [4]334 nm 2184 1780 【参考范围】
365 nm 3971 3235 不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛
女性 < 31 U/L 10,35 U/L 【校准品和控制品】 男性 < 37 U/L 10,50 U/L 建议使用DiaSys公司提供的TruCal U复合校准品对自动分析(注:各实验室应有自己的参考范围。) 仪进行校准。
每批样品检测时,建议使用DiaSys公司提供的TruLab N和P【参考文献】
控制品进行内部质量控制。 1. Thomas L. Alanine aminotransferase(ALT), Aspartate
aminotransferase(AST). In: Thomas L, editor. Clinical 货号 规格 stLaboratory Diagnostics. 1 ed. Frankfurt: TH-Books TruCal U(校准品) 5 9100 99 10 063 20×3 ml Verlagsgesellschaft; 1998.p.55-65. TruLab N(控制品,正常) 5 9000 99 10 062 20×5 ml
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis 5 9000 99 10 061 6×5 ml
CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical TruLab P(控制品,高) 5 9050 99 10 062 20×5 ml rdChemistry. 3 ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 5 9050 99 10 061 6×5 ml 1999. P.617-721. 3. Bergmeyer HU, Horder M, Rej R. International 【性能特性】 Federation of Clinical Chemistry (IFCC) Scientific 病人结果可报告范围 Committee, Analytical section: approved 本法对AST活力检测的最大ΔA/min在340、334 nm为0.16,recommendation (1985) on IFCC methods for the 在365 nm为0.08 。当样品测定值超过上限时,应将样品用9 measurement of catalytic concentration of enzymes. g/L氯化钠溶液作1+ 9稀释,重新测定,结果乘以10。 Part 3. IFCC method for alanine aminotransferase(L-alanine: 2-oxoglutarate 特异性/干扰 aminotransferase, EC 2.6.1.2). J Clin Chem Clin 当样品中抗坏血酸浓度, 1704 ,mol/L ,胆红素浓度, 684 Biochem 1986; 24:481-95. ,mol/L,甘油三酯浓度 , 22.6 mmol/L时没有观察到干扰。 4. Lorentz K, Rohle G, Siekmann L. Einfuhrung der neuen 红细胞内富含AST,因此溶血血清检测结果明显偏高。 Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentrationen bei 37?. DG 灵敏度/检测限 Klinische Chemie Mitteilungen 1995;26:190-2. 本试剂的检测限为2 U/L。 精密度 不含磷酸吡哆醛 批内精密度 s CV x n=20 (U/L) (U/L) (%) 样品1 25.1 0.82 3.25 样品2 51.3 1.57 3.06 样品3 116 0.90 0.77 天间精密度 s CV x n=20 (U/L) (U/L) (%)
样品1 25.7 1.13 4.40
样品2 48.6 0.67 1.38
样品3 115 0.80 0.69
含磷酸吡哆醛 批内精密度 s CV x
n=20 (U/L) (U/L) (%)
样品1 43.6 1.10 2.51
样品2 74.5 1.79 2.41
样品3 174 3.18 1.83
天间精密度 s CV x
n=20 (U/L) (U/L) (%)
样品1 44.0 1.59 3.61
样品2 77.0 3.05 3.97
样品3 187 3.37 1.80
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