脑源性神经营养因子对苯丙氨酸诱导的Cdc42、Rac1和RhoA蛋白表达的影响

临床儿科杂志 第 27卷第 ll期 2009年 ll月 Clin Pediatr Vol.27 No.11 Nou . 2009 苯丙酮尿症（phenyiketonuria， pKU）是一种较 常见的遗传代谢性疾病， 苯丙氨酸及其代谢产物 在体内蓄积是苯丙酮尿症患者脑损伤的原因。 本 病严重影响神经系统的发育和儿童的认知功能， 可引起智力低下、 小头畸形、 癫广间和行为问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 。 这 些症状可能与神经元的丢失， 白质病变， 树突和 树突棘的数量减少有关 [l-3]。 基于患者脑组织主要 病理特点是神经突起的数量和形态异常， 因此， 调控神经突起生长发育的信号通路的异常可能是 pKU 脑损伤导致智力低下的原因之一 。 Rho GTpases（主要包括 Cdc42， Racl 和 RhoA）是肌动 蛋白细胞骨架的重要调节子。 它作为细胞内 “分 子开关” 对神经元的发生、 存活、 迁移、 神经突 起的生长和导向、 突触的形成和可塑性等方面均 发挥重要的作用[4]。 脑源性神经营养因子（brain-derived neurotro - 基金项目： 国家自然科学基金资助项目（No.30340082） 通信作者： 顾学范 电子信箱： guxuefan@oniine.sh.cn 脑源性神经营养因子对苯丙氨酸诱导的Cdc42、Racl和RhoA 蛋白表达的影响 张拥军 l 袁小兵 2 顾学范 l l.上海交通大学医学院附属新华医院 上海市儿科医学研究所 （上海 200092）； 2.中国科学院神经科学研究所 （上海 20003l） 摘要： 目的 观察脑源性神经营养因子（BDNF）对苯丙氨酸诱导的神经元树突的生长及其 Cdc42、 Racl 和 RhoA蛋白表达的影响。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 胎鼠大脑皮层神经元培养 3 d 后， 加人 0.9 mmoi / L 苯丙氨酸或同时加人 l00 ng / mi BDNF 诱导， 兔疫组化标记神经元突起并计数， Western biotting 检测 Cdc42、 Racl和 RhoA蛋白表达。 结果 神经 元在苯丙氨酸诱导 2 d后， 苯丙氨酸减少了神经元树突数（P < 0.0l）， 而同时加人 BDNF 可改善苯丙氨酸诱导的神 经元树突的减少（P < 0.0l）。 并且 BDNF 抑制苯丙氨酸诱导的 Cdc42、 Racl 和 RhoA 蛋白表达下调。 结论 BDNF 可能通过影响 Cdc42、 Racl和 RhoA表达改善苯丙氨酸所致的神经元损伤。 BDNF 对治疗苯丙酮尿症脑损伤可能具 有潜在的应用价宜。 羌键词： 苯丙氨酸； 脑源性神经营养因子； 神经元树突； Rho GTpases 中圄分类号： @95-3 文献标志码： A 文章编号： l000-3606（2009）ll-l074-05 Brain-derived neurotrophic factors inhibit phenylalanine-induced down-regulation of Cdc42， Racl ， and RhoA protein expression in cultured cortical neurons ZHANC Yong-jun1， YUAN Xiao-bing2， CU Xue-fan1 （1.Xin- hua Hospital， Shanghai iaotong Uniuersity School of Medicine， Shanghai Institute for Pediatric Research， Shanghai 200092， China； 2.Institute of Neuroscience， Chinese Academy of Sciences， Shanghai 200031， China） Abstrct： Objectives To expiore whether phenyiaianine affect Cdc42， Racl， and RhoA expression and disturb dendritic deveiopment. To determine the effects of brain-derived neurotrophic factor （BDNF） on this process. Methods Neurons were cuitivated up to 3 days and then treated with 0.9 mmoi / L phenyiaianine or l00 ng / mi BDNF. Dendritic number were determined by morphoiogic anaiysis. Cdc42， Racl， and RhoA protein expression were examined by Western biotting anaiysis. Results The number of dendrites in cuitured neurons reduced two days after being treated with pheny- iaianine， whiie BDNF couid rescue this change （P < 0.0l）， furthermore， BDNF was found to inhibit phenyiaianine- induced down-reguiation of Cdc42， Racl， and RhoA protein expression （P < 0.0l）. Conclusions Our study indicated that the protective effect of BDNF against phenyiaianine -induced neuronai injury is probabiy mediated by expression of Cdc42， Racl， and RhoA. It suggested a potentiai neuroprotective action of BDNF in prevention and treatment of brain injury in the patients with phenyiketonuria. Key words： phenyiaianine； brain-derived neurotrophic factor； dendrite； Rho GTpases ·论 著· l074宜 宜 临床儿科杂志 第 27卷第 11期 2009年 11月 Clin Pediatr Vol.27 No.11 NoU. 2009 phic factor， BDNF）是一种在脑内广泛表达的神经 营养因子， 具有明显的刺激神经胞体发育、 突起 生长， 加强突触联系、 调节突起的可塑性和功能， 调节长时程增强（Iong term potentiation， LTP）等作 用， 在认知的发育中起重要作用[5， 6]。 我们己发现， BDNF 抑制苯丙氨酸诱导的神经元凋亡 [7]， 为了解 BDNF能否改善苯丙氨酸所致的神经元树突的异常 及 BDNF是否通过调节 Rho GTPases表达来发挥作 用， 本研究利用体外培养神经元为模型， 加人苯 丙氨酸模拟体内高苯丙氨酸血症环境， 观察 BDNF 对苯丙氨酸诱导的神经元树突的生长及其对 Ccc42、 Rac1和 RhoA蛋白表达的影响。 ! 材料和方法 1.1 胎鼠大脑皮层神经元培养 孕 14 c SD 大鼠购自中国科学院上海实验动物 中乙， 动物的使用按照上海生命科学院动物研究 委员会规章。 大鼠麻醉后（100 mg / kg 苯巴比妥钠） 具体操作见文献[8]。 神经元培养基包含 NeurobasaI （Invitrogen）、 2% B27（Invitrogen）、 0.5 mmoI / L 谷 胺酷胺（Invitrogen）。 神经元接种在 PoIy-D-Iysine 包 被的培养皿上， 37C、 5%CO2培养箱中培养。 1.2 苯丙氨酸诱导 神经元培养 3 c 后， 将培养皿随机分为 3 组， 分别为苯丙氨酸（phe）组： 加人 0.9 mmoI / L 苯丙 氨酸（根据一般 PKU者脑脊液苯丙氨酸的浓度及前 期研究结果确定）， 模拟体内高苯丙氨酸血症环 境； BDNF 加苯丙氨酸组： 加人 0.9 mmoI / L 苯丙 氨酸同时加人 100 ng / mI BDNF； 正常对照组： 加 人等体积的 PBS。 每组 2 ~ 4 个培养皿， 诱导 2 c 后收集细胞， 固定， 进行形态学观察， 共收集 3 批。 神经元培养 3 c 后， 将培养皿随机分为对照 组、 苯丙氨酸诱导 18 h组（加人 0.9 mmoI / L苯丙氨 酸）、 加 BDNF 18 h组（加人 0.9 mmoI / L 苯丙氨酸 同时加人 100 ng / mI BDNF）、 苯丙氨酸诱导 30 h 组、 加 BDNF 30 h组。 每组 2 ~ 3 个培养皿， 共收 集 3批。 用 Western bIot检测各组蛋白表达量。 1.3 兔疫组化 放有载玻片的细胞培养皿用 4%多聚甲醛固 定， PBS 清洗 10 min， 共 3 次， 0.1% Triton 穿孔， PBS 清洗， 10%羊血清封闭 1 h， 一抗在 4C 孵育 12 h， PBS 清洗， 二抗室温孵育 1 h， PBS 清洗， 固定干燥封片， 荧光显微镜观察。 1.4 树突生长分析 神经元以 4% 多聚甲醛固定后， 孵育一抗 （Rabbit抗 MAP2 多克隆抗体和 Mouse 抗 Tau1 单克 隆抗体， Chemicon InternationaI）， 双标二抗 [Goat Anti-mouse IgG（H + L）， 波长 488 nm， 绿光。 Goat Anti-rabbit Ig G （H + L） ， 波长 546 nm， 红光 ， Jackson ImmunoResearch] 。 神经元用荧光显微镜 （40 倍）观察， 树突在 546 nm 激发波长下为红色， 轴突在 488 nm 激发波长下为绿色。 从胞体发出的 为初级树突， 树突分枝由初级树突发出 。 使用 NeuroIucica 6.0软件计数神经元树突及分枝的数量。 1.5 Western bIot检测蛋白的表达 用 Iysis buffer裂解细胞， 所得到的裂解产物在 冰面静置 30 min 后以 4C离乙（12 800 X g）25 min， 小乙收取上清液。 裂解液加人 Ioacing buffer 95C 变性 5 min， 根据蛋白定量或 Actin 调整蛋白上样 量。 用 15%的 SDS-PAGE 电泳分离， 然后电转到 PVDF 膜上， 膜在 4C bIock buffer 封闭 18 ~ 24 h 后 ， 用 1 1 500 ~ 1 1 1 000 的 Ccc42、 Rac1 和 RhoA 的抗体 4C孵育 24 ~ 30 h， 用 washing buffer 充分洗膜后， 用 1 1 10 000 的二抗室温孵育 1 h， 洗膜后， ECL显色， 用 X光片压片并冲洗。 1.6 统计学分析 用 Imageguant 5.2 软件对胶片条带进行密度分 析。 将 Ccc42、 Rac1 和 RhoA 表达量的蛋白条带扫 描后分析条带的灰度， 然后各自与 Actin 灰度的比 值即代表相对表达量。 用 SPSS 10.0 软件分析， 实 验数据以平均数 : 标准差（x : S）表示， 组间比较 用单因素方差分析， 以 P < 0.05 为差异有统计学 意义。 " 结果 2.1 BDNF改善苯丙氨酸诱导的神经元树突减少 用 MAP2 和 Tau1 双标法分别标记神经元的树 突和轴突， 以区分树突和轴突。 观察加药后 2 c 各 组的树突及分枝的数量。 结果显示， !对照组平 均每个神经元初级树突数（5.011 : 1.772）个， 苯丙 氨酸组为（4.199 : 1.671）个， BDNF 加苯丙氨酸组 为（6.336 : 2.196）个。 3 组比较差异有统计学意义 （F = 46.94， P < 0.01）， 其中苯丙氨酸组低于对照 组（P < 0.01）， 而 BDNF + 苯丙氨酸组分别高于对 照组和苯丙氨酸组（P < 0.01）。 "对照组平均每个 神经元树突分枝数（1.973 : 1.562）个， 苯丙氨酸组 为 （ 1.199 : 1.091） 个 ， BDNF + 苯丙氨酸组为 1075· · 临床儿科杂志 第 27卷第 11期 2009年 11月 Clin Pediatr Vol.27 No.11 Nou . 2009 与对照组比较： 1）P < 0.01， 2）P < 0.05； 与 18 h 组比 较： 3）P < 0.05； 与 30 h组比较： 4）P < 0.05 圄 2 吝组 Cdc42蛋白表达 1）与对照组比较， P < 0.05； 2）与 30 h组比较， P < 0.05 圄 3 吝组 Racl和 RhoA蛋白表达 圄 l 吝组神经元树突 （3.91 1 2.698）个， 3组比较差异有统计学意义（F = 78.18， P < 0.01）。 其中苯丙氨酸组低于对照组（P < 0.01）， 而 BDNF 加苯丙氨酸组分别高于对照组和 苯丙氨酸组（P < 0.01）。 见图 1。 2.2 BDNF 对苯丙氨酸诱导的 Cdc42、 Rac1 和 RhOA 蛋白表达的影响 苯丙氨酸下调 Cdc42 的表达， 而 BDNF 抑制 苯丙氨酸诱导的 Cdc42 的蛋白改变（P < 0.01）。 苯 丙氨酸诱导 18、 30 h 后 Cdc42 的蛋白表达分别是 对照组的 0.473 1 0.111、 0.454 1 0.054 （P 均 < 0.01）， 而加用 BDNF 18 和 30 h 组 Cdc42 的蛋白 表达分别是对照组的 0.691 1 0.170 和 0.838 1 0.162， 减轻了下调幅度（P均 < 0.05）。 见图 2。 苯丙氨酸诱导 18、 30 h 后 Rac1 的蛋白表达分 别是对照组的 0.519 1 0.252、 0.421 1 0.340（P均 < 0.05）， 而加用 BDNF 18 h 和 30 h 组 Rac1 的蛋白 表达 分别是对照组的 0.803 1 0.325、 0.657 1 0.403。 但加用 BDNF 18 h 组和苯丙氨酸诱导 18 h 组、 加用 BDNF 30 h 组和苯丙氨酸诱导 30 h 组之 间相比差异无统计学意义。 见图 3。 苯丙氨酸诱导 18、 30 h 后 RhOA 的蛋白表达 分别是对照组的 0.572 1 0.242（P < 0.05）、 0.489 1 0.22 8（P < 0.05） ， 而加用 BDNF 18 和 30 h 组 RhOA 的蛋白表达分别是对照组的 0.832 1 0.349、 0.833 1 0.301。 加用 BDNF 18 h 组和苯丙氨酸诱导 18 h 组之间差异无统计学意义， 加用 BDNF 30 h 组比苯丙氨酸诱导 30 h 组 RhOA 的蛋白表达上调 （P < 0.05）。 见图 3。 3 讨论 己发现苯丙酮尿症患者的大脑树突形态异常。 RObain等[9]报道在苯丙酮尿症大鼠模型中， 小脑浦 肯野细胞的树突分枝减少。 COrderO 等 [10]发现， 相 似的变化也出现在大脑椎体神经元中。 Lacey[11] 报 道， 在大脑椎体细胞的第五层有畸形树突棘。 Williams 等 [12]描述， PKU 患者的皮层椎体细胞中 树突棘减少。 研究者还发现， PKU 大鼠的大脑皮 层中突触发生减少 [13]。 对一个未经治疗的 PKU 患 者尸体进行解剖， 发现有神经元丢失、 神经细胞 形态变小、 浦肯野细胞分枝减少等大脑病理改变[14]。 最近的研究表明， 在苯丙氨酸诱导的皮层神经元 1076· · 临床儿科杂志 第 27卷第 11期 2009年 11月 Clin Pediatr Vol.27 No.11 NoU. 2009 中突触密度减少， 而树突的形态未见改变 [3]。 在我 们神经元培养模型中， 苯丙氨酸诱导树突减少， 进一步可能造成突触的减少。 然而， 也有一些不 一致报道， 例如在高苯丙氨酸大鼠模型中， 海马 神经元树突棘密度升高[15]。 这样的差异可能是由于 采用了不同的计量方法， 或是神经元在不同发育 阶段而致。 但我们可以得出结论， 苯丙氨酸干扰 了树突的发育。 Rho GTPase（Cdc42。 Rac1 和 RhoA）是肌动蛋 白细胞骨架动力的重要调节子， 和神经系统的发 育密切相关 [16， 17]。 它们的变化可能影响了 PKU 患 者神经元的发育， 从而导致轴突。 树突。 突触异 常。 到目前为止， 人们对于 Rho GTPase 在神经系 统的发育。 可塑性和功能中作用的认知是支离破碎 的， 有时甚至是自相矛盾的。 Rho GTPase 在大脑 皮层的整个发育过程中都行使功能， 在神经轴突和 树突的生长阶段也保持了一定的水平， Rac1 在神 经突起生长的早期表达上调， 而 RhoA 则在突起生 长晚期或在突触发生时表达上调。 此外， 树突的 数目多少也依赖于 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 的表达水 平 [17-19]。 ThreadgiII 等[18]发现， 负显性 Rac 和 Cdc42 在体外培养的大脑皮层神经元中表达会显著减少 初级分枝的数量。 而 RhoA 可抑制树突的生长 [20]。 也有报道， RhoA 能加速树突和轴突的生长 [18]。 因 此， RhoA 在神经元发育的不同阶段或在不同的培 养条件下， 作用可能不同。 本研究发现， 苯丙氨 酸诱导神经元 18 h后， Cdc42。 Rac1和 RhoA的蛋 白表达都呈下调， 提示苯丙氨酸抑制 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 表达， 进而可能影响了神经元树突的发 育。 这可能是苯丙氨酸干扰神经突起生长的分子 机制之一， 但本研究并没有直接的证据来 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 这 一点。 神经元树突的生长是一个连续的过程， 包括 突起的发起。 延长， 分枝的伸缩， 树突棘的形成， 它受内在遗传程序和外界分子的调节。 神经生长 因子通过调控基因转录。 信号传递， 对神经突起 生长进行精细调节。 BDNF属于神经生长因子家族 成员， 能促进轴突。 树突的生长分枝。 调节树突 棘形成及突触的重塑。 联系和功能等， 这些与空 间记忆的形成。 维持以及记忆相关的智力发育密 切相关[21]。 Cai等[22]发现， BDNF通过 cAMP依赖机 制， 废除髓磷脂。 髓鞘脂相关球蛋白（MAG）对轴 突的抑制作用， 促进轴突生长。 BDNF可通过 ERK 通路， 保护新生大脑缺氧缺血损害， 并对 LTP 和 认知功能均有保护作用 [23， 24]。 BDNF 也能支持胆碱 能神经元的生存和上调这些细胞胆碱乙酷转移酶 的表达[25]。 在体外培养海马神经元中 BDNF 调节脆 性 X 智力低下蛋白（FMRP）mRNA 的表达 [26]。 有报 道， 和 BDNF为同一家族的神经生长因子 3能保护 毒素 B（Rho GTPases 抑制剂）所致的神经细胞轴突 长度和数量的减少 [27]， 说明 BDNF 和 Rho GTPases 在认知发育中存在某种联系。 本研究发现苯丙氨酸使神经元树突及分枝的 数目减少， 但如加人高浓度（100 ng / mI）BDNF 经 较长时间培养后， 显著增加了树突的数量， 甚至 多于对照组。 BDNF 促进突起生长的机制是复杂 的， 考虑 BDNF改善苯丙氨酸作用的机制一方面可 能是 BDNF有多种机制促进神经突起生长， 和苯丙 氨酸作用有不同的途径； 另一方面在我们研究中发 现， BDNF一定程度上调了苯丙氨酸诱导的 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 的蛋白表达， 而 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 是影响神经元树突发育的关键信号蛋白， 说 明 BDNF可能通过影响它们的表达， 保护高苯丙氨 酸所致的神经元损伤。 总之， 我们的结果显示， 苯丙氨酸诱导神经 元树突减少。 苯丙氨酸下调 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 蛋白表达， 这可能是苯丙氨酸干扰神经突起生长 的分子机制之一。 另外证明了 BDNF改善苯丙氨酸 诱导的神经元树突的减少， 同时抑制苯丙氨酸诱 导的 Cdc42。 Rac1 和 RhoA 蛋白表达下调 ， 提示 BDNF有可能通过影响 Rho GTPases 表达， 保护高 苯丙氨酸所致的神经元损伤， BDNF 对治疗 PKU 脑损伤可能具有潜在的应用价值。 !"#$% 「1」 HuttenIocher PR. 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Acta 0toIaryngoI，2003，123（1）：20-25. （收稿H期：2009-04-24） 1078· · 脑源性神经营养因子对苯丙氨酸诱导的Cdc42、Rac1和RhoA蛋白表达的影响 作者： 张拥军， 袁小兵， 顾学范， ZHANG Yong-jun， YUAN Xiao-bing， GU Xue-fan 作者单位： 张拥军,顾学范,ZHANG Yong-jun,GU Xue-fan(上海交通大学医学院附属新华医院,上海市儿科医学研究所,上海 ,200092)， 袁小兵,YUAN Xiao-bing(中国科学院神经科学研究所,上海,200031) 刊名： 临床儿科杂志 英文刊名： JOURNAL OF CLINICAL PEDIATRICS 年，卷(期)： 2009,27(11) 参考文献(27条) 1.Hall A Rho GTPases and the actin cytoskeleton[外文期刊] 1998(5350) 2.Lacey DJ Hippocampal dendritic abnormalities in a rat model of phenylketonuria 1984(05) 3.Kornguth S;Gilbert-Barness E;Langer E GolgiKopsch silver study of the brain of a patient with untreated phenylketonuria,seizures and cortical blindness 1992(04) 4.Robain O;Wen GY;Wisniewski HM Purkinje cell dendritic development in experimental phenylketonuria.A quantitative analysis 1981(02) 5.Zhang Y;Gu X;Yuan X Phenylalanine activates the mitochondria-mediated apoptosis through the RhoA/Rhoassociated kinase pathway in cortical neurons 2007(05) 6.张拥军;袁小兵;顾学范 脑源性神经生长因子抑制苯丙氨酸诱导的神经元凋亡[期刊论文]-临床儿科杂志 2008(12) 7.Yamada K;Mizuno M;Nabeshima T Role for brainderived neurotrophic factor in learning and memory[外文期刊] 2002(07) 8.Horch HW;Kruttgen A;Portbury SD Destabilization of cortical dendrites and spines by BDNF[外文期刊] 1999(02) 9.Etienne-Manneville S;Hall A Rho GTPases in cell biology 2002(6916) 10.Horster F;Schwab MA;Saucr SW Phenylalanine reduces synaptie density in mixed cortical cultures from mice 2006(4) 11.Ramakers GJ Rho proteins and the cellular mechanisms of mental retardation 2000(05) 12.Threadgill R;Bobb K;Ghosh A Regulation of dendritic growth and remodeling by Rho,Rac,and Cdc42 1997(03) 13.Luo L Rho GTPases in neuronal morphogenesis[外文期刊] 2000(03) 14.Brors D;Aletsee C;Dazert S Clostridium difficile toxin B,an inhibitor of the small GTPases Rho,Rac and Cdc42,influences spiral ganglion neurite outgrowth 2003(01) 15.Castren M;Lampinen KE;Miettinen R BDNF regulates the expression of fragile X mental retardation protein mRNA in the hippocampus 2002(01) 16.Morse JK;Wigand SJ;Adderson K Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) prevents the degeneration of medial septal cholinergic neurons following fimbria transection 1993(10) 17.Kiprianova I;Sandkuhler J;Schwab S Brainderived neurotrophic factor improves long term potentiation and conguitive functions after transient forebrain ischemia in the rat[外文期刊] 1999(02) 18.Han BH;Hohzman DM BDNF protects the neonatal brain from hypoxic-ischemic injury in vivo via the ERK pathway 2000(15) 19.Cai D;Shen Y;De Bellard M Prior exposure to neurotrophins blocks inhibition of axonal regeneration by MAG and myelin via a cAMP-dependent mechanism[外文期刊] 1999(01) 20.Ji Y;Pang PT;Feng L Cyclic AMP controls BDNF-induced TrkB phosphorylation and dendritic spine formation in mature hippocampal neurons 2005(02) 21.Nakayama AY;Harms MB;Luo L Small GTPases Rac and Rho in the maintenance of dendritic spines and branches in hippocampal pyramidal neurons 2000(14) 22.Bauman ML;Kemper TL Morphologic and histoanatomic observations of the brain in untreated human phenylketonuria 1982(01) 23.Loo YH;Fulton T;Miller K Phenylaectate and brain dysfunction in experimental phenylketonuria:synaptic development 1980(14) 24.Williams RS;Hauser SL;Purpura DP Autism and mental retardation:neuropathologic studies performed in four retarded persons with autistic behavior 1980(12) 25.Lacey DJ Cortical dendritic spine loss in rat pups whose mothers were prenatally injected with phenylacetate ('maternal PKU' model) 1986(1-2) 26.Cordero ME;Trejo M;Colombo M Histological maturation of the neocortex in phenylketonuric rats 1983(02) 27.Huttenlocher PR The neuropathology of phenylketonuria:human and animal studies 2000(z 2) 本文读者也读过(10条) 1. 杨兴隆.王艳.王学峰.任惠.YANG Xing-Long.WANG Yan.WANG Xue-Feng.REN Hui Rnd蛋白与突触可塑性[期刊论文]-中国临床神经科学 2009,17(2) 2. 高建忠.安凤莲.刘彦西.慕怀玉.李军.郑虎林.车震.宋彦彬.GAO Jian-zhong.AN Feng-lian.LIU Yan-xi.MU Huai-yu.LI Jun.ZHANG Hu- lin.CHE Zhen.SONG Yan-bin RhoA在人脑星形细胞瘤中的表达及意义[期刊论文]-现代生物医学进展2008,8(4) 3. 王小亮.马延兵.韩华.WANG Xiao-liang.MA Yan-bing.HAN Hua 重组人BDNF对快速老化模型小鼠及神经元培养的影响[期刊论文]-解剖学 研究2006,28(1) 4. 邹发长 RhoC在大肠腺癌中的表达及临床意义[期刊论文]-中外医疗2009,28(22) 5. 刘洋.徐洪涛.刘楠.王亮.王恩华.LIU Yang.XU Hongtao.LIU Nan.WANG Liang.WANG Enhua 非小细胞肺癌组织中P120ctn与RhoA和Cdc42表 达的相关性及意义[期刊论文]-中国肺癌杂志2005,8(4) 6. 陶燕.陈永昌.TAO Yan.CHEN Yong-chang RhoA蛋白在人胃癌细胞株SGC-7901核内的分布[期刊论文]-江苏大学学报（医学版）2006,16(2) 7. 李晓红.谭华.黄桂英.李作孝 神经肽Y对多发性硬化影响的实验研究[期刊论文]-山东医药2009,49(20) 8. 张勇.江隆昌.胡青钢.刘小卫.熊俊.郑启昌 Cdc42基因在表皮生长因子促进HepG22细胞丝状伪足形成中的作用[期刊论文]-世界华人消化 杂志2010,18(5) 9. 何友权.刘伏元 丙二酰辅酶A轴——缺血性心脏病治疗的新靶点[期刊论文]-安徽医药2011,15(1) 10. 张拥军.袁小兵.顾学范.ZHANG Yong-jun.YUAN Xiao-bing.GU Xue-fan 脑源性神经生长因子抑制苯丙氨酸诱导的神经元凋亡[期刊论文 ]-临床儿科杂志2008,26(12) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_lcekzz200911020.aspx