RhD阴性孕妇产生IgM+IgG型抗D及IgG型抗C抗体的研究
RhD阴性孕妇产生IgM,IgG型抗D及IgG
型抗C抗体的研究
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94?MedicalLaboratoryScienceandClinics.2011IVo122,No.3医学检验与临床2011年第22卷第3期
doi:10.3969/i.iSSI1.1673—5013.201J.03.046
RhD阴性孕妇产生IgM+IgG型抗D及IgG型抗C抗体的研究
许建鸿沈云青徐群房平2
1(山东省血液中心,山东济南250014)
2(山东省千佛山医院输血科,山东济南250014)
RhD抗原阴性人群在中国汉族人中的比例约为0.3—0.
5%.远低于高加索人种的15%的比例,因此由于D抗原不合
所引起的输血免疫和妊娠免疫经常发生.在有一次或多次
生育史的阴性孕产妇中检出抗D抗体的比例较高,属于
新生儿溶血病的高危人群.最近我们检测出了一例Rh
阴性孕妇体内存在IgM十IsG型抗D和I型抗c抗体,并导
致死胎,现
报告
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研究如下.
1材料与方法
1.1病例来源患者,女,37岁.现怀孕第三胎8个月,经检
查为死胎.该妇女第一胎为女孩.健康现已l4岁.第二胎8
个月出现死胎.患者还有过2次流产史.由医院送检血型
参比实验室,要求做血型血清学检查.静脉采集其夫妇5毫
升自凝全血.1毫升抗凝全血.
1.2试剂
1.2.1抗A,抗B,抗A+B及抗D分型血清:抗A,抗B,抗A
+B试剂购自长春博德公司.抗D购自荷兰Sanquin公司,美
国Immueor公司,德国Biotest公司和上海输血技术生物公司.
1.2.2ABO反定型细胞,0.2M2一Me应用液:购自上海输血
技术生物公司.
1.2.3抗人球蛋白试剂,筛选细胞,谱细胞试剂:购自荷兰
Sanquin公司.筛选细胞批号为8000128648.谱细胞批号
8(K10126316
1.3方法
1.3.1RhD抗原的血清学鉴定:取试管1支.分别加入抗D
血清2滴和被检标本的3—5%红细胞悬液1滴.1000g离心
l5秒.观察结果,凝集为RhD阳性.不凝集为RhD阴性.对
RhD阴性结果,将上述试管置于37oc水浴箱30分钟,取出后
用0.9%生理盐水洗涤3次.末次控干后加入抗人球蛋白血
清2滴,1000g离心15秒.观察结果,凝集为RhD阳性,不凝
集为RhD阴性.
1.3.2RhCcEc抗原的血清学鉴定:采用盐水法鉴定孕产妇
及其丈夫的RhC,c,E,e四种抗原.取试管4夏,分别加入抗
C,c,E,e血清各1滴和被检标本的3—5%红细胞悬液1滴.
置于37.c水浴箱3O分钟.取出后直接lO00g离心l5秒,观察
结果.
1.3.3不
规则
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抗体筛选及鉴定:采用抗人球蛋白法筛选并
鉴定孕妇血清中的不规则抗体.取试管3支,分别加入被检
标本的血清2滴和3个O型筛选细胞悬液各1滴,置37?水
浴箱30分钟,取出后用0.9%生理盐水洗涤3次,末次控干
后加入抗人球蛋白血清2滴,1000g离心15秒.观察结果,凝
集为不规则抗体阳性.不凝集为阴性.对不规则抗体阳性标
本,采用同样方法用谱细胞进行抗体特异性鉴定不规则抗
体效价用倍比稀释法测定.
血型血清学检查结果
1ABO血型鉴定:该孕妇及其丈夫血型均为A型,
2Rh血型系统血型鉴定:该孕妇为RhD阴性.其丈夫为
RhD阳性.Rh表现型:孕妇为eedEe,其丈夫为CCDee.
3孕妇不规则抗体筛查:结果为阳性,见表1.
4孕妇不规则抗体鉴定:经谱细胞鉴定.该孕妇血清中
含IgM+IsG型抗D抗体及IgG型抗C抗体.结果见表2.
5抗体效价测定:采用倍比稀释法测定该孕妇血清幸
IgM型抗D效价为1:8,IN型抗D效价为1:512.I型抗C
效价为1:16,见表3,4.
2讨论
Rh阴性孕妇是否会发生RhD同种免疫受多种因素的影
响.首先,孕妇的RhD同种免疫往往发生于第二胎以后.运
是因为在生育第一胎时,胎儿血渗入母体的量较多,造厥母
体初次免疫,在怀孕下一胎时.再次渗入母体的胎儿细胞
上的D抗原会刺激母体免疫系统的回忆反应.从而产生抗D
抗体.本病例第一胎健康存活.第二,三胎出现死胎.另有两
次流产.均与其体内产生了免疫性抗D及抗c抗体誓芏
次,胎母如果同时伴有ABO血型不和,可使母仁莜瓦免
疫的可能性降低,因为怀孕期间透过胎盘漏人母体血液循环
的ABO异型胎儿红细胞会迅速被ABO系统的IgM抗体和卒
体结台,在肝脏被单核吞噬细胞系统清除.而肝脏不象脾脏
易发生免疫应答,因此产生抗体的可能性要小些.本病例
夫妇均为A型,印证了RhD同种免疫易发生于ABO血型相
合者,不易发生于ABO血型不合者的观点.另外.决定产生
抗D抗体的另一重要因素是抗原的数量.当母体有过特别明
显的胎母出血.新生儿才会发生溶血病.如果在孕期或分娩
时胎母出血的量较低,则母体被D抗原免疫的可能隹就
小.红细胞上抗原的不同表型也会影响免疫强度.R2r兰
的胎儿红细胞比其他表型更易刺激母体产生RhD抗体.因为
R2表型所表达的D抗原数量更多l2J.
本病例虽为RhD阴性,但生育第一胎前后并未做系统的
产前血型及抗体检测,未能及时监测抗体的水平及变化.兰
育第一胎以后72小时以内未给以产妇抗D免疫球蛋白的兰
射以预防下一胎发生Rli新生儿溶血病.从而导致较严重的
RhD新生儿溶血病引发死胎的发生.RhD阴性妇女妊娠后
的第一次检测应包括:妊娠史,输血史,ABO和Rl1血型,抗体
医学检验与临床2011年第22卷第3期MedicalLaboratoryScienceandClinics.2011,Vo122,No.3?95?
筛选.如果抗体筛选阴性,建议在妊娠28—32周之间至少
再做一次常规检查(这期间未接受过抗一D免疫球蛋白或其
他免疫球蛋白的治疗)J.分娩时,应采集脐带血做ABO,Rh
定型.并做直接抗人球蛋白实验.同时
分析
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产妇的抗凝血,判
断胎母出血的情况,来决定是否注射或注射多少剂量的抗一
D免疫球蛋白.如果抗D抗体筛选阳性,应测定抗体的效
价,并在妊娠过程中持续监测抗体水平及其变化.配偶也要
检查相关的血型抗原.测定抗体的动态变化比仅仅测定抗
体绝对水平更加重要.对于检测到抗D抗体的妇女,在妊娠
3O周之前,应每月检测一次;30—36周.每两周检测一次;36
周以后.每周检测一次l4J.检测实验室应建立抗体滴度标
准,当低于该标准时不考虑胎儿水肿,当大于该标准时,需密
切观察
目前国内妇产科医生较少使用预防性抗一D免疫球蛋
白来防止RhD阴性妇女发生P&D同种免疫,而这种预防措
施在国外已经作为必不可少的预防PdaD同种免疫发生的手
段_7].本病例之所以产生抗D抗体,是因为在既往孕产史中
未得到适当治疗,因而产生了两次死胎,两次流产的严重后
果.这表明在我国对Rh新生儿溶血病缺乏足够的重视和治
疗手段.事实上,RhD阴性孕产妇产前的血型及抗体检测为
治疗RIl新生儿溶血病提供了可靠的依据.妊娠期存在严重
Rh同种免疫的孕妇,可采用胎儿脐静脉输血,孕妇血浆置换
以及注射免疫球蛋白进行治疗b].产后治疗可采用光疗法
和为婴儿换全血的治疗
方案
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