高泌乳素血症

高泌乳素血症 多巴胺受体D1家族  D1或D1A受体是Weinshank等人(1990)用PCR技术克隆出来,关于D1受体克隆的转录启动位置(translationalstartsites)还不十分清楚,在人的D1受体基因上有两个蛋氨酸,而在大鼠D1基因上有三个蛋氨酸,蛋氨酸通常被认为是由基因转录为蛋白的启动点,D1受体基因全长约为446个氨基酸残基,在人和大鼠的D1受体中有91%的氨基酸序列相同,D1受体基因位于第五号染色体。　D1受体基因没有内含子(intron),由于1991年Grandy和Weinshank等又克隆出新的D1(D1B或D5)受体,上述传统的D1受体又被称为D1A受体,D1A的主要结构特点有〔9〕:1 具有7个跨膜区域,N-端位于细胞外,C端投射于细胞内,胞内外各有三个环链;2 有两个N-连接的糖基化位点(N-linkedglycosylation),一个在N端,另一个在受体的胞外环链上;3 有一个小的第三胞内环链和较长的C端,符合与GS蛋白结合可激活腺苷酸环化酶的受体特征;4 在胞内C端上有一个用于软脂酰转移(siteforpalmitoylation)的半保留半胱氨酸,在C端还有丝氨酸和苏氨酸残基,可能是用来进行磷酸化反应。Gerfen等人利用Northernblot和原位杂交的组织化学 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 研究了D1A受体mRNA在组织中的分布,发现D1A受体在尾核、纹状体及嗅球中表达最高,而在大脑皮层、边缘系统、下丘脑中表达则较低。在尾核、纹状体核团里大约有50%中等大小的神经元被D1A受体基因所标记。D1A受体异常与很多疾病有关系,在精神分裂症患者多巴胺系统功能研究中,发现患者一些脑区如伏隔核和边缘系统等部位D1含量高于正常对照组,另一些研究得出相反的结论,这些研究结果不一致,可能与D1受体DNA的多态性有关〔4〕。Ohara1993年用PCR技术证明,D1受体DNA至少有三种多态性,140位上碱基A被G置换;290位上碱基A被G取代,但并未改变它所编码氨基酸即亮氨酸的结构;3222位碱基在A由C置换,编码的氨基酸亦未发生改变。关于多巴胺D1B或D5在其后有详叙。 多巴胺受体D2家族 D2(或D2S/D2L)受体1988年Bunzow等人利用β-肾上腺素能基因作为探针克隆出D2受体,它含有415个氨基酸残基,是一种糖蛋白,在三个N端均连接有糖基化位点,与D1家族相反,D2受体的C端相当小,而第三胞内环链则相当大,小C端和大的胞内环链结构是许多可抑制腺苷酸环化酶活性受体的共同结构特征。大鼠的D2受体有96%氨基酸与人相同,人D2受体基因位于第11号染色体长臂2区2带～2区3带(q22～q23),它至少包含有8个外显子,长度为50kb,而且有一个大的内含子,长度大于25kb,内含子具有一些特殊的作用,把假定的启动子区和蛋白编码区分开。Eidne等人在1989年还发现〔6〕,在人、大鼠、牛及小鼠的组织中存在着两种D2异构体,即肽链上镶着29个氨基酸残基,在D2受体第3胞内环链,大约于第5跨膜区的30个残基位点处发生这种剪接改变(splicevaria-tion)导致异构体差异,D2两种异构体分别命名为短D2受体(D2S)和长D2受体(D2L),后者比前者多29个氨基酸残基。 应用PCR技术的相关基因多态性研究:(1)编码区基因多态性:目前检测到的人类DRD2基因错义突变有三种可以导致所编码的受体蛋白中氨基酸序列发生转变,包括:Va196→Ala、Pro310→Ser、Ser311→Cys。Cravchik(1996)认为,DRD2的胞内第三环上Pro310与Ser311的置换,在DRD2激动时阻滞CAMP合成的效应上,比常见的DRD2中Cys311和Ser310的置换所造成的上述阻滞效应低,其内在机制为变构的DRD2在激活Gi蛋白的效能上发生了改变。Arinami(1994)提出DRD2基因的Ser-311-Cys错义突变与精神分裂症相关。在Chen进行的DRD2TaqA限制性长度多态性(Pro310Ser)研究中,发现女性患者TD的发生与该等位基因的基因型、基因频率相关〔7〕。在Cravchik的后续研究中,证实与DRD2基因Ser311Cys多态性相关的受体蛋白结构及机能的改变,是神经阻滞剂效应及副反应产生的遗传学机制,同时也与精神分裂症的幻觉、妄想症状的产生相关〔8〕。在Seretti进行的104例精神分裂症患者DRD2基因Ser311CyS错义突变的研究中,将等位基因的频率与精神分裂症的症状单位进行相关分析,发现Ser311Cys突变与解体症状相关,年龄、性别因素对这种相关性无影响,提出对DRD2基因的多态性分析应深入到疾病的症状水平,这对今后研究的具体方法学方面提供了建设性意见〔9〕。 在Harano的对照研究中,精神分裂症组DRD2基因的Ser311Cys的等位基因频率为0.057,对照组为0.04,两组间差异无显著性,较既往研究中提供的频率数据高,进行年龄分层分析后结果仍相同,Harano认为DRD2基因的Ser311Cys突变与精神分裂症患者间无相关性,但在对精神分裂症患者进行基因多态性分析时,仍需考虑DRD2基因的上述突变的综合作用〔10〕。Goldman在对459例美国东南部印第安人的DRD2基因错义突变[Ser311Cys]的研究中,同样显示该突变与精神分裂症间无相关性〔11〕。造成DRD2的Ser311Cys基因多态性与精神分裂症相关性研究结果不尽一致的可能原因为:人种差异,年龄、性别差异,症状特征差异, 样本 保单样本pdf木马病毒样本下载上虞风机样本下载直线导轨样本下载电脑病毒样本下载 量的差异。(2)启动区基因多态性:Arinami最近对日本人群DRD2基因进行了测序,发现启动子区有一个常见突变:-141Cdel/ins(-141位点的碱基C缺失与插入),在正常人群中-141Cdel的频率为0.22,该突变与精神分裂症显著相关,在日本人群中OR值为0.6(P<0.001)〔12〕。在Jonsson对瑞士精分症患者DRD2基因141Cdel/ins多态性与精神分裂症相关性的研究中,OR值为0.49(p<0.05),证实了这种多态性影响着精神分裂症患者DRD2基因编码区的转录、翻译、表达,表达产物DRD2相应的各种变化进一步影响着精神分裂症的易感性〔13〕。目前的研究结果未发现此基因多态性与抗精神病药物的反应间有任何相关性〔14〕。Breen在此基础上对英国白种人的同类研究中,OR值为1.41(p=0.02),相关性结果相反。他推论,不同人种的人群中,错义突变的连锁不平衡是产生这种相反结果的可能原因〔15〕。这提示,不同种族的精神分裂症患者群体中,DRD2基因启动区的-141Cdel/ins多态性是不同的。Arinami在研究中发现,DRD2基因启动区的-141Cdel/ins可以影响培养的Y-79、293细胞中虫萤光素酶的活性。他认为该突变是一种重要的功能突变,可诱导DRD2基因编码区表达水平的改变,并假定DRD2基因-141DC使DRD2表达水平降低20—40%〔13〕。在诸多关于DRD2基因启动区突变的研究中,精神分裂症患者群体的-141DC频率较正常对照组低,这与精神分裂症患者部份中枢DRD2密度增高的解剖学特征、多巴胺功能亢进的神经生化特征一致,这也提示-141DC是精神分裂症的保护因素之一。假定关于启动区-141Cdel/ins的研究结果是正确的,那么对于部份关于DRD2基因编码区的阴性研究结果就不好解释。这有几种推测:由于病例对照研究这种研究方式的局限性导致上述结果属假阳性或假阴性的结果;不同的研究结果都是正确的,结果差异是由于不同的研究中人种的遗传背景因素不同造成的。后一种理解更为可取,因而关于精神分裂症患者DRD2基因启动区、编码区的多因素研究仍需深入。 迄今为止,运用多种学科方法及技术手段进行的DRD2的研究仍在进行当中。另一方面,在引入PCR技术进行的多态性研究中,发现关于DRD2基因的Pro310Ser多态性可能与女性精神分裂症患者的TD相关;关于DRD2基因Ser311Cys多态性与精神分裂症相关研究的结果不尽一致;而近年来关于DRD2基因启动区多态性-141Cdel/ins的同类研究结果,提示这种多态性与精神分裂症密切相关。在不同种族的人群中,DRD2基因的启动区与编码区连锁不平衡,可能导致-141DC对不同种族的精神分裂症患者起不同的效应。 D2在脑内表达最高的区域是尾状核、豆核、伏隔核、嗅球,在黑质以及伏隔区内的多巴胺能神经胞体内也发现有D2受体mRNA,提示D2受体有另外的突触前作用,也有人对D2受体mRNA的细胞分布进行了研究,在纹状体内大约有60%中等大小的细胞可以表达受体mRNA,抗体免疫组化方法也发现有50%中等大小的细胞表达D2受体蛋白〔9〕,Gerfeu和LeMoine均证实,大多数表达D2受体mRNA很高的细胞为脑啡呔神经元,在纹状体中,多在大细胞上表达,且多数为胆碱能中间神经元。D2S和D2L在脑区和组织中表达水平基本相同,没有明显的生理学差异,但Montmayeur等人1991年研究发现D2S对耦合腺苷酸环化酶有更强的抑制效应,对钙通道的抑制作用也明显强于D2L,有关这两种异构体功能差别还有待于进一步实验证实〔8〕抗精神病药氯氮平也大多是作用于D2受体(部分作用于D4受体)而发挥效益,但也有一些研究者(Joyce,1988)得出相反结论,未用抗精神病药患者D2受体增高并不明显,用抗精神病药后D2受体则明显高于对照组。 SchererJ(1994)认为,当纹状体与前额叶皮层DRD2阻滞比率(ST/FC)小于1.2时EPS容易发生。Broich进一步研究发现,应用Simpson-Angus-量表评估时,EPS的严重程度与ST/FC比率间呈线性相关〔4〕。Schroder利用SPECT研究发现,对阻滞剂效应好的患者基底节与前额叶皮层DRD2阻滞的比值(BG/FC)低,而效应差的患者其BG/FC值高,后者更容易出现EPS症状。由此推测,DRD2阻滞剂对精神分裂症患者多巴胺径路有诱导上调作用,这种作用与EPS的发生也可能相关〔5〕。神经阻滞剂对结节漏斗系统的DRD2阻滞可诱导高泌乳素血症,这是DRD2所介导的主要生理机能之一。而Kleinberg应用利醅酮(4-10mg/day)及安慰剂进行的双盲对照研究中发现(精神分裂症患者例数为841),利醅酮诱导的血清泌乳素水平增高与泌乳素相关的不良反应如:性功能障碍、男子溢乳等之间无显著相关性〔6〕。上述药物效应、不良反应与DRD2相关性研究结果重复性不高,与不同研究中药物干预的维持时间,药物所属类别(典型或非典型),疾病分类与效应评价 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 的不同相关。有关DRD2与药物剂量间的各种量效关系尚需进一步研究论证。 D3受体 Sokoloff等人1990年克隆出D2家族中的第二类受体,即D3多巴胺受体,它的氨基酸序列很象D2受体,有相对较大的胞内环链和较短的C端,在N端连接有糖基化位点,在第3胞内环链上有环化腺苷酸磷酸化位点及在C端有保留性半胱氨酸残基位点。 人的D3受体基因位于第3号染色体上,与大鼠相比,人的D3受体在第3胞内环链上少了46个残基,为含有400个残基的糖蛋白,与大鼠的D3受体有88%的总体相似性,两者在跨膜区氨基酸序例有97%的一致性。D3受体mRNA在脑区的表达比D2受体mRNA要低得多,且区域局限,D3受体表达主要是在以A〔10〕细胞核团接受多巴胺能传入的端脑、伏隔核、Calleja氏岛,及其它边缘系统,如嗅球、海马、乳头体以及下丘脑,D3受体mRNA也在纹状体和大脑皮层的某些区域有少量表达。 D3受体也存在着异构体,Fishburn1993年利用PCR技术从嗅球克隆出小鼠的D3受体基因,发现有两个不同的剪接体,二者之间的主要差别在于第3胞内环链是否存在着63位碱基(相当于21个氨基酸)构成的片端,被分别称为长式D3受体和短式D3受体,对小鼠脑区PCR技术显示,D〔3S〕和D〔3L〕在脑组织分布的位置几乎是相同的。D3受体也具有内含子,通过选择性接续试验(altenativesplicing)发现了D3受体的二个同构物,认为它们都是小分子结构。一个缺少第2外显子,由于终止密码子出现过早,所以它是一个只有二个膜穿透部位和100个氨基酸的小蛋白分子。第二个同构物的主要特征是第2细胞外绳索的大部分和第5膜穿透部位的一部分缺失,是由428个氨基酸所组成的蛋白分子。 Fishburn在1993年的研究报告中认为,对D3受体的克隆研究发现了缺少63个碱基,在细胞内第3绳索上缺少21个氨基酸的D3受体同构物,因此,认为D3受体与D2受体一样,也可有D3L和D3S二个亚型。两者的生物学意义尚不清楚。D3受体归属第3染色体,位于3q13.3位置上。在脑内的D3受体mRNA和D2受体相比只是少量存在,主要分布于嗅结节、乳头体内侧核、小脑第10叶,也分布于伏核、隔区、海马黑质、腹侧被盖部,少量分布于纹状体和大脑皮质等部位。有趣的是D2受体较多的尾状核和壳核几乎不存在D3受体,应用D3受体选择性激动剂quinpirole和标识物7—OH—DPAT,通过放射自显影法(autoradiography)也使这一结果得到确认。 D3受体与G结合蛋白的相互作用没有被实验所证实,也不清楚与腺苷酶环化酶为代表的细胞内第2信使系统之间的关系。一些研究结果都是阴性的。D3受体基因与精神分裂症的关连,有过有意义的报告。基因多型的研究表明,D3受体有3种限制片断长多型(RFLF),其中有二个在内含子上发生变异,剩下的一个BalIRFLP在D3受体细胞外的末端,由丝氨酸向甘氨酸变异。较新的研究认为,BalIRFLP的纯合子(丝氨酸型、甘氨酸型)与杂合子相比,前者精神分裂症的发病率要高。但其与受体机能及细胞外的多巴胺结合状态的关系尚不清楚,因此,还有很大的探讨余地。 此外,1994年的Linkage实验报告了D3受体基因多型与精神分裂症相关呈阴性结果。Socolotf的试验也证实D3受体至少有一部分很可能是多巴胺神经元的自身受体,D2受体是黑质多巴胺神经元的自身受体,但其分布于几乎近于黑质致密质的整体,而D3只限于致密体的外侧。由于这个部位的多巴胺神经元向丘体、杏仁核等部位投射,所以,既使同是自身受体,D2和D3受所控制和调节的神经元是不同的。在药理学研究上,D3受体对D2受体的抗精神病药物都具有一定的结合力,虽然在药物上D2/D3的选择比值会有所不同,但D2要小得多。 D3受体较多存在于伏核、隔区等大脑边缘系统,因此,和认知及情绪等与精神分裂症关系密切的脑机能不无联系;而且,在纹状体和下垂体分布极少或几乎不存在,在药物副作用问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 上似乎较D2受体有力。研究表明,典型的抗精神病药物如halopelidol对D2结合力高, 而其中的其它一些药物如sulpiride、amisul-pride、carpipramine、pipotiazine、pimozide、nemonapride等药物相对地对D3受体的结合力增高,而且,在临床上这些药物对阴性症状都有某种程度的疗效,提示D3受体选择性高的拮抗剂,很可能对阴性症状起作用。 D3受体可能参与调节多巴胺能系统对思维和情绪的控制,因而可利用多巴胺能拮抗剂作相关的抗精神病治疗,很多实验均发现D3受体基因表达同时接受典型和非典型精神病药的影响,而D1家族仅受典型抗精神病药的影响。特定细胞D3受体对DA和quinpirole等内源受体激动剂的亲和性要比D2受体高,但典型抗精神病药如氟派啶醇等对D2受体拮抗亲和性要比D3受体高20倍,而非典型抗精神病药如舒必利对两者亲和性则几乎相等。 D4受体 1991年VanTol等人利用大鼠D2受体cDNA作为探针筛选人神经细胞瘤cDNA基因库时,克隆出D4受体〔11,14〕,人D4受体由387个氨基酸组成,具有7个跨膜区域,D4受体与多巴胺D2家族的D2和D3受体氨基酸相似性分别为41%和39%,而在跨膜区域则均达到56%,在D4受体上N端有一个糖基化位点,在第3胞内环链上有一个cAMP依赖的磷酸化位点。 D4受体基因位于人第11号染色体,含有4个内含子,整个基因全长编码区被分布在第1、3和6跨膜区及第3胞内环链上的内含子所割断,这些内含子位置与多巴胺D2家族另外两个受体基因的内含子位置相当。D4受体基因因48bp重复序列数目不同而具有多种等位基因类型,现已确定有重复序列数目为2、3、4、5、6、7等六种等位基因,进一步的序列分析表明至少有20种以上等位基因存在,D4受体基因多态性可能与精神分裂症的发病有关,具体联系需要进一步研究论证。 1991年VanTol等人利用人D4受体cDNA片断和受体第5外显子作为探针,在Northern杂交时发现D4受体表达最高的脑区是前额叶皮层、中脑、杏仁核和延脑,在纹状体和嗅球表达较低,在大鼠实验中,则发现在脑前区皮层和下丘脑含有较高的D4受体mRNA。氯氮平治疗时较少出现锥体外系副反应,与D4在中枢神经系统这种特异性分布有关〔12〕。D4受体的功能和D2、D3受体相似,和D2受体相比,D4受体表现对多巴胺能拮抗剂和激动剂有较低的亲和性,但非典型抗精神病药氯氮平及其同类药Octoclothpin等对D4亲和力要比对D2强10倍多,实验中发现,当注射氯氮平进行抗精神病治疗时,其亲和常数和血中所测的氯氮平浓度相接近。氯氮平的解离常数在D4为9nM;在D2为56～130nM;在D3为180nM〔15〕。而其中的其它一些药物如sulpiride、amisul-pride、carpipramine、pipotiazine、pimozide、nemonapride等药物相对地对D3受体的结合力增高,而且,在临床上这些药物对阴性症状都有某种程度的疗效,提示D3受体选择性高的拮抗剂,很可能对阴性症状起作用。 D4受体构造与D2和D3受体相似,都具有一个较短的细胞内第3绳索。D4受体与D2和D3受体分别具有41%和39%的相同性,在膜穿透部位达56%的相同性,N—末端有一个糖锁结合部。另外,还发现D4受体的配体选择与D2受体类似,并属于G蛋白相关受体类型,GTP结合蛋白的感受性影响激动剂与D4受体结合,但相关的细胞内传导机制尚不清楚。1992年VanTol的研究又证实,D4受体在细胞内的第3绳索,以48个碱基对为一单位形成重复接续,这种重复有2、4和7次不同,因此,认为D4受体至少可以有D4、2、D4、4和D4、7三个亚型,而且,对氯氮平在特定条件下的亲和性(affinity)不同而受人关注。Lichter等人又在1993年的研究中发现,这种重复可达10次。认为由氨基酸的不同排列,可以存在18种D4受体亚型。D4受体与D2受体同属第11染色体,在11P15位置上。在药理学上,Seeman已经证实,不典型抗精神病药物氯氮平(clozapine)对D4受体选择性高,而且不易引起锥体外路症状,对以阴性症状为主的病人具有疗效。1993年Seeman和VanTol等人一起,对精神分裂症死后脑的纹状体进行配体结合试验,结果认为在此部位的多巴胺受体中,D4受体数量增加了6倍。象氯氮平是否以纹状体的D4受体为主要作用点尚难以下结论,但纹状体与精神分裂症关系密切,甚至认为该部位是精神分裂症的病巢部位之一。氯氮平虽然对D4受体亲和力较高,但对D1、5—HT及M等受体也具有相等甚至更高的亲和力,因此,对该药做出完整的药效结论还是很困难的。但D4受体的意义是重要的,如果D4受体拮抗剂(antagonist)确实既能治疗阴性症状,而又几乎不产生锥体外路症状的话,那么开发以D4为目标的拮抗剂,将为精神分裂症的治疗带来重大影响,这是一条再好不过的捷径。但是,很可能不那么简单,更深入的研究还需要时间D5受体 D5受体是多巴胺受体亚型中研究进展较迟和较少的一个。几乎在1991年这一年间,对D5受体的研究取得飞跃的发展。首先是Tiberi等人用聚合酶链反应(polymerasechainreac-tion)从大鼠身上克隆出D5受体,由于与D1受体相同性高,因此,当时命名为D1B,而将D1受体称为D1A。同年,其它研究室以人体D1受体的DNA为探针,克隆出以477个氨基酸组成的人体D5受体,与D1受体全体具有50%的相同性,膜穿透部位为80%,在N—末端和第2细胞外绳索上各有一个糖链结合部位。D5受体与Huntington舞蹈病相同,归第5染色体在4P16、3位置上。 在脑内分布上,D5受体的mRNA量要比D1受体低,存在的部位也较局限,如海马、乳头体外侧核、视床的束旁核,而在D1受体存在的纹状体、伏核和嗅结节却较少。对D5受体基因的研究还发现,与D5受体具有95%相同性的二个假性基因(pseudogene),但在大鼠身上并未发现。假性基因在遗传学被认为是进化的产物,因此,推测其可能具有较高级的机能。D1和D5受体在药理学的生物学特性上相似,都能在激动剂作用下使腺苷酸环化酶活化,配体结合实验也表明两者作用相似。尽管对D5受体的研究相对较少,但已知D5受体在对多巴胺的亲和力上,比D1受体高10倍,再加上脑内分布的差异,可以认为D5受体有着异于其它受体的机能,这将推动对D5受体的研究,包括与精神分裂症的相关性研究。 短短的几年间,对多巴胺受体的突破性研究和进展,使研究者有了更多的研究余地,研究不断向纵深发展。本研究虽只概述了多巴胺传统性研究,但近些年来,一些相关的和并行的各类研究,也同样对精神医学,特别是精神分裂症领域产生重大影响,多巴胺神经功能亢进学说仍然是最主要的观点。除对多巴胺受体自身的研究外,对其和兴奋性氨基酸、与5羟色胺等受体的关系的研究也都有相当重大的进展。可以认为在目前的生物学研究领域内,存在二大研究支系,一个是以传统的D2受体为代表的多巴胺及其受体的相关研究支系;一个是以谷氨酸为代表的非多巴胺的相关研究。由于研究手段的不断进步,如以PET、MRI等图像仪的应用,大大增加了研究的力度,一些更大的突破和发现是完全可以期待的。 至今为止，利用先进的分子生物学技术已经克隆和鉴定出五种多巴胺受体,由于它们的结构、生理特性和功能的相似性,很多人建议把D1A和D1B(D1或D5)合称为多巴胺D1家族,把D2、D3、D4合称为多巴胺D2家族,也有人建议把D2、D3、D4受体命名为D2A、D2B、D2C受体亚型,　由于目前这些已经克隆的受体亚型并不能完全解释临床和实验室所观察的多巴胺系统的生理病理特征,是否还存在其它多巴胺受体亚型有待于进一步证实和发现? 过去对多巴胺受体的研究导致了精神药理的治疗性突破，对于多巴胺受体亚型分子生物学的深入研究将导致更加精细的靶受体的的药物治疗或者基因领域的调控，那么就可以更少的药物副作用和更高的临床疗效.