五倍子及五倍子单宁的研究进展

458 乔彩云，李建科* ( 陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062) 摘 要:五倍子是我国的特产物，其主要有效成分———五倍子单宁，近年来已成为天然产物领域的研究热点之一。研 究证明，五倍子单宁具有明显的防龋齿、抑菌杀菌、杀精、抑制突变、清除自由基和抗氧化等生物活性。本文综述了五 倍子资源分布、五倍子单宁组成和生物活性、临床应用以及五倍子单宁的提取纯化方法研究进展。 关键词:五倍子，五倍子单宁，生物活性，临床应用 Research progress in Galla chinensis and gallic tannins QIAO Cai－yun，LI Jian－ke* (College of Food Engineering and Nutritional Science，Shaanxi Normal University，Xi’an 710062，China) Abstract:Galla chinensis is China ＇s special product and gallic tannins as the major bioactive components have become a hot research in the field of natural products. Studies have showed that gallic tannins have obvious biological activities，such as anti－ caries，antimicrobial sterilization，spermicidal，inhibiting mutations，free radical scavenging and antioxidant，etc. This paper reviewed the distribution of Galla chinensi，the composition and biological activity of gallic tannins，clinical applications，and the methods of extraction and purification. Key words:Galla chinensis;gallic tannins;biological activity;clinical applications 中图分类号:TS201.2 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2011)07－0458－05 收稿日期:2010－07－15 * 通讯联系人 作者简介:乔彩云(1986－) ，女，在读硕士研究生，研究方向:营养与食 品卫生学。 五倍子(Galla chinensis) 别名倍子、百虫仓、百药 煎、麸木、木麸子、文蛤等，为瘿绵蚜科(Pemphigidae) 的一些蚜虫寄生在漆树科盐肤木属植物盐肤木 (Rhus chinensis Mill)、青麸杨(R.potanini Maxim.) 或 红麸杨(R.punjabensis Stew.Var. Sinica Rehd. Et Wils) 等的叶或叶柄上而形成的囊状虫瘿，以叶上虫瘿( 又 称角倍、肚倍、花倍、药倍) 入药。其主要有效成分五 倍子单宁又称五倍子鞣质，由 7～9 个分子没食子酸 和 1 分子葡萄糖缩合而成，含量约为 60%～70%，甚 至高达 80%;另外尚有没食子酸2%～4%，脂肪、树脂 以及蜡质等。五倍子单宁经提纯、合成等方法可制 取近百种精细化工产品，广泛应用在医药、化工、染 料、食品、感光材料及微电子工业中，现已成为世界 各国的研究热点。本文综述了近年来五倍子及其单 宁的主要研究进展。 1 五倍子资源概况 五倍子是我国的特产物，目前已报道的有十多 个品种，1985 年出版的《中华人民共和国药典》列出 其主要有角倍和肚倍两类。角倍，又名菱倍、花倍， 呈不规则囊状，有若干瘤状突起或角状分枝，干后呈 黄棕色，有灰白色绒毛，壁厚约 1～2mm。破折面角质 样，味涩而有收敛性。鲜倍含水量 55.3%，干倍平均 含单宁量 63.5%。肚倍，又名独角倍，呈纺锤状囊 形，没有突起或分枝，绒毛较少，壁厚 1～3mm，折断面 角质样，较角倍光亮。角倍的产量最大，市场上较为 常见;肚倍的产量小，但质量最佳。 五倍子分布于北纬 20～40°、东经 95～130°范围 的中国、朝鲜、日本及中南半岛，以中国的五倍子产 量最多、质量最好，在国际上被誉称为“中国五倍子” 和“中国五倍子单宁”。从清朝开始，五倍子就成为 中国传统出口商品之一。在中国境内，五倍子产地 分布在四川、贵州、云南、湖北、湖南、陕西、安徽、河 南、河北、山东、江西、福建、浙江、甘肃、山西、江苏、 广西、广东及台湾等省( 区) ，而以四川盆地的盆周山 地、贵州北部、湖北西北部、陕西南部和云南东北部 为主要产区，其五倍子产量占全国总产量的 90% 以上。 2 五倍子单宁的组成及生物活性 2.1 五倍子单宁的化学组成及构效关系 我国五倍子单宁属于水解类单宁［1］，在五倍子中 含量高达 60%～80%，是由没食子酸、双倍酸与葡萄 糖结合以甙或酯的形式形成的复杂混合物，其结构 式如下: 五倍子单宁在酸的催化下完全水解时，生成的 葡萄糖与没食子酸比例为 1∶(7～9) ;并且分子中随着 没食子酰基个数的增加，鞣性也迅速增加。葡萄糖 有两个端基异构体(α－和 β－) 同时存在，呈酯或半缩 醛形式。有关研究者对其生源途径进行深入研究发 现［2－3］，1，2，3，4，6－五－O－没食子酰基－β－D－葡萄糖 (β－PGG) 是可水解单宁在植物体内合成的共同中间 459 图 1 五倍子单宁的分子结构 体。日本学者西冈五夫等用制备液相色谱从五倍子 中分离得到了 8 个鞣质单体，通过波谱解析等方法 鉴定了它们的结构，分别命名为 1β，2，3，4，6－五－ O －没食子酰－β－D－葡萄糖、2－O－二没食子酰－1β，3， 4，6－四－O－没食子酰－β－D－葡萄糖、3－O－二没食子 酰－1β，2，4，6 －四－ O－没食子酰－ β－ D－葡萄糖、 4－O－二没食子酰－1β，2，3，6－四－O－没食子酰－β－D －葡萄糖、2，3－二－O－二没食子酰－1β，4，6－三－O－ 没食子酰－β－D－葡萄糖、3－O－三没食子酰－1β，2，4， 6－四－O－没食子酰－β－D－葡萄糖、2，4－二－O－二没 食子酰－1β，4，6－三－O－没食子酰－β－D－葡萄糖、3， 4－二－O－二没食子酰－1β，3，6－三－O－没食子酰－β－ D －葡萄糖［4］。 由于五倍子单宁是由大量“酚核”串联形成的， 所以具有 3 个明显且普遍的特性: a.与金属离子形成复合物 Fe3 +，Ca2 +，Cr6 +， Cu2 +本身是很好的路易斯酸，可接受 π 电子，具有氧 化还原活性。当五倍子单宁与这些金属离子络合 时，常常发生氧化还原反应，使这些高价的金属离子 还原成 Fe2 +、Ca +、Cr3 +、Cu +，自身氧化成醌。Gust［5］ 用穆斯堡尔光谱仪详尽研究了单宁与 Fe3 +的络合， 其结果表明单宁以一个离子态的氧负离子及一个酚 羟基与铁络合，或以两个离子态的氧负离子与铁络 合，形成二价或一价的正络离子。酸性状态时，形成 一配基络合物，pH4～6 时形成二配基络合物，碱性状 态时才可形成三配基络合物［6－7］。 图 2 单宁－Fe3 +络合物结构示意图 b.抗氧化和捕获自由基的能力 苯环上的酚羟 基，尤其邻位酚羟基( 邻苯二酚、邻苯三酚) 是优良的 氢或中子的给予体，是抗氧化活性基团。该类抗氧 化剂在清除烷氧自由基的过程中主要是通过脱氢反 应产生较稳定的苯氧自由基来终止链式反应，所产 生的苯氧自由基的稳定性与其清除自由基的活性密 切相关。五倍子单宁与 VE、VC 具有协同的抗氧化作 用，这种协同效应一般认为是它能与促进氧化反应 的金属离子络合使之钝化，也可认为单宁与 VE 和 VC 之间可以互相再生［8］。据文献报道，五倍子单宁中的 1β，2，3，4，6－五－O－没食子酰 －β－D－葡萄糖具有很 强的抗脂质过氧化活性，且构效关系表明这种抗肝 毒素的活性与没食子酰基上的三个邻位羟基息息相 关，这种羟基越多，其活性越强。 c.与其它大分子的结合能力 五倍子单宁可以 与蛋白质、生物碱、多糖结合，这种结合本质上属于 面－面亲和作用，主要表现为两个分子间的疏水基团 相互亲和，如单宁分子的苯环疏水基可以与蛋白质 分子的苯环、杂环、碳氢链等疏水基团发生疏水结 合，在蛋白质等电点沉淀最多［9］。Asquith［10］认为分 子量较大、结构开放松散、富含脯氨酸或其它疏水性 氨基酸的蛋白质与多酚类的亲和力比较大。从而说 明在单宁－蛋白质反应中疏水键也是一种重要的形 式。同时，单宁分子的酚羟基及酰基可分别与蛋白 质分子肽键上的胺基、硫基、酰基，以氢键结合加强 其结合作用。对五倍子单宁这类水解单宁而言，其 与大分子结合的效率大多与没食子酰基的数目成正 比，因为没食子酰基同时起到提供氢键和疏水键的 作用。进一步研究发现，单宁和蛋白质结合其实是 一典型的分子识别过程，所以还应考虑多酚供体和 蛋白质受体的分子组成、结构、构型及它们的协同作 用。现代研究表明，收敛性是单宁多种生理活性的 基础，且单宁与大分子复合反应间所对应的稳定常 数关系都可用单宁的收敛性来表征。Miyamoto［11］曾 对单宁结构与抗肿瘤作用间的关系进行了分析，发 现含酰基最多的结构所具有的抗肿瘤活性也最强， 而单宁的收敛作用也主要取决于自身所含的酰基数 量。同时，酰基还可提供氢键和疏水键，从而表明五 倍子单宁的活性与其收敛作用密切相关。 2.2 防龋齿 现代龋病病因学研究认为牙菌斑是龋病发生的 始动因子。当牙菌斑内致龋菌比例异常增高，而非 致龋菌比例异常减少时，牙菌斑就可由非致龋性菌 斑向致龋性菌斑转化。最重要的致龋菌有变形链球 菌、茸毛链球菌、粘性放线菌、乳杆菌，因此抑制和杀 灭致龋菌对预防龋齿具有相当重要的作用。 王少虎等［12］采用纸片扩散法、液体二倍稀释法 测定了五倍子水、醇提取物对变形链球菌 Ingbritt株、 茸毛链球菌 6715 株、粘性放线菌 ATCC19246 株的抑 制情况，结果显示，在体外五倍子水、醇提取物对变 形链球菌 Ingbritt株、茸毛链球菌 6715 株的抑制作用 较为明显，对粘性放线菌 ATCC19246 株没有抑菌作 用，且从抑菌圈大小看出五倍子水、醇提取物对变形 链球菌 Ingbritt 株的抑制作用要强于茸毛链球菌 6715 株。刘昭慧等［13］在体外对釉质脱矿中同样发 现，五倍子还具有抑制牙釉质脱矿的作用，且随着浓 度的增加，抑制作用相应加强，当与 1mg /mL 氟协同 作用时，比单纯使用氟抑制脱矿作用更强。张安生 等［14］用不同浓度的五倍子水提取物对釉质表面进行 处理，采用人工脱矿液脱矿，结果显示，当浓度达到 460 30mg /mL以上时，即可达到抑制釉质脱矿的最佳效 果。王静等［15］在研究五倍子对人牙周膜细胞的保护 作用时发现，五倍子水提物对内毒素(LPS) 抑制人牙 周膜细胞(PDLC) 活性和碱性磷酸酶(ALP) 活性、超 微结构损伤、牙骨质片表面附着减少具有拮抗作用， 并且该作用与五倍子水提取物浓度有一定的量效关 系，随五倍子水提物浓度的增加而增加，到 10μg /mL 时达到峰值，从而说明五倍子水提物对 PDLC具有一 定的保护作用。 2.3 抑菌作用 李仲兴等［16］采用新的中药抑菌实验方法对五倍 子乙醇提取物进行 140 株肠球菌的最低抑菌浓度进 行了测定，结果显示，其对 93 株粪肠球菌、40 株尿肠 球菌和 7 株其它肠球菌的 MIC90分别为 0.315、0.63、 0.63mg /mL，从而说明五倍子乙醇提取物对 140 株肠 球菌具有较强的抑菌力。姜蕾等［17］在研究五倍子对 3 种鱼类常见致病菌的体外抑菌和急性毒性实验时， 发现五倍子煎煮液对温和气单胞菌、爱德华氏菌、柱 状屈挠杆菌的最小抑菌浓度分别为 6.250、3.125、 0.781mg /mL，最小杀菌浓度分别为 12.500、12.500、 3.125mg /mL，且五倍子对鲤鱼的 48h 半致死浓度为 1.1015g /kg，安全浓度为 0.1102g /kg。同时，还有研 究表明，五倍子煎剂对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球 菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、 甲型链球菌、乙型链球菌均有抑菌作用，其中对金黄 色葡萄球菌抑菌作用最强。 2.4 杀精作用 彭建平等［18］在研究五倍子鞣酸的体外杀精作用 时，按照 WHO 标准方法，对 20 例人精液进行实验， 并与目前最常用的阴道杀精剂壬苯醇醚－9(NP－9) 进行了比较，发现 NP－9 栓在 20s 时对人精子的最低 有效杀精浓度为 0.5～1.0mg /mL，与文献［19］报道相符; 虽然鞣酸的杀精效力稍低于 NP－9，但抑菌杀菌实验 揭示，鞣酸在极低的浓度下可以有效抑制并杀死大 肠杆菌及金黄色葡萄球菌，而在此低浓度的抑菌杀 菌范围内，NP－9 对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌无 效。从而说明，五倍子鞣酸有望成为一种新型的预 防性传播性疾病的阴道杀精剂。 2.5 抑制突变 谢道刚等［20］在研究五倍子单宁抑制突变的作用 时，发现五倍子提取物在 75～600μg /mL 浓度范围内 对黄曲霉毒素 B1 诱导 V79 细胞染色体畸变和细胞 突变有明显的抑制作用，且随剂量的增加，细胞突变 和染色体畸变明显减少，呈现出一定的量效关系。 2.6 清除自由基和抗氧化作用 五倍子中单宁以及没食子酸等成分具有较多邻 位酚羟基的结构，通过作为氢供体释放出氢与环境 中的自由基结合，终止自由基引发的链锁反应，从而 阻止氧化过程的继续传递和进行，因此在生物体内 具有较强的清除氧自由基的作用，从而产生了抗氧 化的作用。 最近的研究已发现，五倍子单宁对细胞的抗氧 化作用十分明显。于敏等［21］采用电子自旋共振 (ESR) 和自旋捕集技术研究了不同浓度的五倍子 水、醇提取物对 DPPH 自由基的清除作用，结果显示 五倍子两种提取物均具有良好的清除 DPPH 自由基 的作用，在实验条件下，五倍子水、醇提取物清除 DPPH自由基的 IC50分别为 0.4147、0.8586mg /L，从而 证明了五倍子中多酚类物质具有较强的抗氧化活 性。孔琪［22］在体外模拟胃液的条件下研究发现，五 倍子鞣质具有显著地清除 NO －2 的作用，对阻断亚硝 胺合成也有一定的作用，其对 NDMA 合成的最大阻 断率和 NaNO2 的最大清除率分别为 67.32% 和 97.32%，故五倍子是一种前景非常看好的抗衰老中 药。但是，关于五倍子的抗氧化作用还有许多方面 有待于进一步深入研究。 2.7 毒性 豚鼠以 20g /kg体重口服煎剂时未见异常; 若进 行皮下注射，则会发生局部腐烂、坏死，动物表现为 焦躁不安、行动迟钝、呼吸急促、食欲变差等症状， 24h后死亡。小鼠腹腔注射 0.25mL 的 100%五倍子 煎剂后，均在 12h以内死亡，但如果将用量减少为原 来的 1 /10，小鼠则未见异常。其可能的原因是五倍 子单宁进入机体后被分解为倍酸和焦倍酸，从而引 起某些肝细胞的坏死，但关于它的作用机理及还未 见文献报道。同时，有关五倍子单宁的急性毒性实 验目前也未见报道，然而这是以后研究五倍子安全 性的必经之路。 2.8 其他作用 瘢痕疙瘩是皮肤损伤愈合过程中，胶原合成代 谢机能失去正常的约束控制，持续处于亢进状态，以 致胶原纤维过度增生的结果，又称为结缔组织增生 症，在中医上称为蟹足肿或巨痕症，它表现为隆出正 常皮肤，形状不一，色红质硬的良性肿块，是现代医 学的难 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 之一。在创伤修复过程中，成纤维细胞是 主要的修复细胞，它的生物学行为是创伤愈合和瘢 痕形成过程中的决定因素。因此，人们寄希望于通 过抑制成纤维细胞的增殖及胶原合成来控制瘢痕等 药理性纤维化过程［23－24］。任丽虹等［25］研究发现五倍 子能抑制瘢痕疙瘩组织成纤维细胞增加，明显影响 成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原 mRNA 的表达和细胞增 殖，并且加快了细胞的凋亡，从而抑制瘢痕增生。 近年来发现五倍子单宁有很强的抑制艾滋病病 毒 RT活性的作用，很有可能发展成为一种抗艾滋病 的药物［26］。鉴于五倍子应用于临床确有效果，国家 药品监督管理局已于 2000 年 8 月批准了临床研究的 新中药五倍子油及五倍子油软胶囊，可用于治疗多 种疾病。 3 临床应用 五倍子始载于《开宝本草》，其曰:“五倍子味苦、 酸、平、无毒…治瘙痒脓水”。《本草纲目》载五倍子 酸、咸、平、无毒，敛肺降火，化痰饮，止咳嗽、消渴等。 已有文献报道，以五倍子单用或为主在治疗上呼吸 道出血、慢性肾炎、小儿遗尿、糖尿病及合并的并发 症、甲状腺肿、鞘膜积液、蜂窝组织炎、盗汗、脱肛、软 组织损伤、烧烫伤、龋齿痛、慢性化脓性中耳炎、瘢痕 461 疙瘩、外伤出血、痔瘘、阴道炎、宫颈糜烂、女性尖锐 湿疣、子宫脱垂及宫颈癌等疾病中都取得可喜的疗 效。作为传统中药的五倍子积累了大量的药物配 方，这给现代医药工作者提供了借鉴。但是对于这 一在临床应用较广泛的药物在其物质基础和作用机 制方面还有待于进一步的探究，以为新药的开发和 临床应用提供更充分的理论依据。 4 五倍子单宁的提取纯化 4.1 提取方法 单宁的主要制备方法有超临界 CO2 萃取法 ［27］、 水温浸法［28］和超声辅助法［29］等。这三种方法中，超 临界 CO2 流体的临界温度低，操作温度低，能较好地 保证有效成分不发生变化，特别适用于那些对热敏 感性强、容易氧化分解破坏的成分的提取［30］，同时超 临界 CO2 萃取能力强，提取率高，在最佳工艺条件 下，能够将所要提取的成分提取完全，从而大大提高 产品收率和资源的利用率; 水温浸法不但节省能源 而且操作方便，但由于五倍子中含有水溶性的树脂、 蛋白质、淀粉，经水浸泡后发软易烂，高温时更甚，所 以直接用水提取所获得的单宁含量较低，必须选择 合适的影响因子如破碎粒度、溶剂、提取温度、提取 时间等，以保证获得较高的抽出率;超声波提取技术 是利用超声波具有的机械、空化以及热效应，加强胞 内物质的释放、扩散和溶解，从而加速有效成分的浸 出，可以提高其提取效率。 姜萍等［27］在研究中通过对影响萃取的压力、温 度、时间等因素的实验，得出了优选的超临界 CO2 萃 取条件:萃取温度为44℃、压力为 25MPa、夹带剂为 乙酸乙酯，萃取 120min效果最佳，得率为 57.83%，经 测定，萃取得到的单宁酸含量大于 96%，为制备高纯 度单宁酸提供了一条新的途径。姜宁等［29］在超声辅 助提物五倍子单宁酸的研究中发现，在料液比 1∶12， 超声强度高，提取时间为 20min，丙酮浓度为 60% ( 体积比) 的提取条件下可很好地提取五倍子中单宁 酸，采用上述最优方法提取，单宁酸的提取率平均为 93.91%，此法显著优于传统的水提取法，是水提法的 1.9 倍，表明该方法的提取效果较好。 4.2 纯化方法 徐浩等［31］提出颗粒白土与载体活性炭组合柱物 理吸附法提纯工艺，60℃下，以 30mL /min 的流速流 经颗粒白土与活性炭柱吸附处理后，制备样品单宁 纯度≥98%，色值 0.6( 罗维邦总色号) ，主要金属离 子均≤0.5μg /g。黄绍华等［32］在研究单宁的提取与 纯化中用大孔吸附树脂洗脱法对五倍子单宁进行了 分离纯化，结果表明，该法可使单宁含量达到 90%以 上，收率达 70%，达到了较好的分离提纯的目的，适 应于食品、医药等行业对单宁酸的要求。帅益武 等［33］通过溶剂萃取、Ca2 +离子沉淀、明胶沉淀等不同 分离纯化方法对五倍子鞣质最终得率和纯度进行了 比较研究，结果表明以丙酮为提取剂，乙酸乙酯萃取 法和明胶沉淀法得到的鞣质纯度较高，分别为 89.15%和 73.95%，得率也较高。同时 Ca2 +离子沉淀 法中若采用 NaOH 等强碱溶液，生成的沉淀接触到 空气后有个变色的过程，严重影响了单宁的定量测 定，其原因可能是局部 pH 过高使单宁氧化，因此用 该法进行纯化，在提高溶液 pH 时所用的碱性化合物 最好是弱碱，如 NaHCO3。 5 五倍子单宁的发酵水解 单宁酶又称单宁酯酰水解酶，它可以水解没食 子酸单宁中的酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡 萄糖［34］。该酶可由霉菌，如黑曲霉、米曲霉在单宁的 存在下诱导产生，广泛地应用于饮料、酿酒、医药、制 革、化妆品等领域。在酶制剂工业发达的国家，例如 日本、美国，单宁酶的基础理论和应用研究工作开展 的比较早，并已在茶饮业取得了可喜的经济效 益［35－37］。美国食品与药物管理局(FDA) 已确定单宁 酶为安全产品，在日本单宁酶也通过批准应用于食 品工业［38－39］。然而，目前生产单宁酶的效率还不高， 且市场价格昂贵，严重阻碍了单宁酶的应用，因此五 倍子单宁的发酵水解，对于单宁酶生产的研究具有 重要的意义。 参考文献 ［1］M Santappa，R V Sundara.Vegetable tannins－A review［J］.J Scient Ind Res，1982，27(4) :705－718. ［2］G Gross，N G Lewis，M G Paice.Plant Cell Wall Polymers－ Biogenesis and Biodegradation ［C］ . ACS Symposium Series 399.Washington D C:American Chemical Society，1989，108. ［3］G Gross，R W Hemingway，P E Laks. Plant Polyphenols， Synthesis Properties，Significance ［C］ . New York:Plenum Press，1992. ［4］张东明 .酚类化学［M］.北京:化学工业出版社，2009:10. ［5］J Gust，J Suwalski.Relationship between Radical Scavenging Effects and Anticorrosive Properties of Polyphenols［J］.Corrosion， 1995，51(1) :37－44. ［6］M Faver，D Landolt. The influence of Gallic Acid on The Reduction of Rust on Painted Steel Surfaces［J］.Corrosion Scl， 1993，34(9) :1481－1494. ［7］石碧，何先祺，张敦信，等 .植物鞣质与胶原的反应机理研 究［J］.中国皮革，1993，22(8) :26－31. ［8］Zhao Baolu，Li Xiaojie，He Rungen，et al.Scavenging Effect of Extracts of Green Tea and Natural Antioxidants on Active Oxygen Radicals［J］.Cell Blophysics，1989，14:165－175. ［9］Oh H，Hoff J PH.Dependence of Complex Formation between Condensed Tannins and Protein［J］.J Food Scl，1987，52(5) : 1267－1269. ［10］T Asquith，L Butler.Interactions of Condensed Tannins with Selected Proteins［J］.Phytochensitry，1986，25(7) :1591－1593. ［11］ M Kenichl，K Nobuharu，K Ryozo，et al. Relationship between the Structures and the Antitumor Activities of Tannins ［J］.Chem Pharm Bull，1987，53(2) :814－822. ［12］王少虎，樊明文 .五倍子对致龋菌抑制作用的实验研究 ［J］.口腔医学研究，2004，20(3) :246－248. ［13］刘昭慧，刘天佳，李继遥，等 .五倍子对牙釉质脱矿的影 响［J］.四川大学学报:医学版，2003，34(3) :507－509. ［14］张安生，张海欧，祝磊，等 .不同浓度五倍子水提取物抑 462 制釉质脱矿效果的研究［J］.牙体牙髓周病学杂志，2009，19 (1) :28－31. ［15］王静，唐荣银，王志良 .五倍子水提物对人牙周膜细胞保 护作用的实验研究［J］.重要医学刊，2005，23(11) :2062 －2065. ［16］李仲兴，王秀华，张明明，等 .五倍子乙醇提取物对 140 株肠球菌体外抗菌活性观察［J］.中国中医药信息杂志，2004， 11(3) :201－203. ［17］姜蕾，郑戍明 .五倍子对 3 种致病菌的体外抑菌和急性 毒性实验［J］.水利渔业，2005，25(6) :89－109. ［18］彭建平，张杰，罗鹏程，等 .五倍子鞣酸的体外杀精和抑 菌作用研究［J］.中国药房，2007，18(30) :2337－2338. ［19］陈坚，邵长凤，张颖，等 .低剂量复方壬苯醇醚－9 栓阴道 避孕制剂体外杀精子作用的研究［J］.天津药学，1999，11 (2) :30. ［20］谢道刚，陈瑾壁，刘瑞芳 .五倍子提取物抑制突变作用的 初步研究［J］.华西药学杂志，1997，12(3) :151－152. ［21］于敏，杨春荣，陈帅 .五倍子中多酚类物质对 DPPH自由 基清除作用的电子自旋共振研究［J］.时珍国医国药，2007，18 (12) :3058－3059. ［22］孔琪 .五倍子鞣质的提取及抑制亚硝化反应的初步研究 ［J］.应用科技，2005，32(9) :62－64. ［23］ DT Robles，E Moore，M Draznin，et al. Keloids: pathophysiology and management［J］.Dermatol Online J，2007，13 (3) :9. ［24］陈洪，农晓琳 .皮肤病理性瘢痕的基础理论研究与进展 ［J］.中国组织工程研究与临床康复，2008，42(48) :8358 －8361. ［25］任丽虹，肖志波，杨大平，等 .五倍子对裸鼠瘢痕疙瘩动 物模型的作用［J］.中国美容医学，2009，18(6) :806－808. ［26］毕良武，吴在嵩，陈笳鸿，等 .单宁在抗艾滋病研究中的 应用［J］.林产化工通讯，1998，32(2) :11. ［27］姜萍，黄娟，李春福 .超临界 CO2 萃取单宁酸的研究 ［J］.林产化工通讯，2005，39(6) :17－19. ［28］王静，周昕，王姝，等 .由五倍子制取鞣花酸［J］.青岛化 工学院学报，2002，23(3) :8－11. ［29］姜宁，刘晓鹏，等 .超声辅助提取五倍子中单宁酸的研究 ［J］.安徽农业科技，2007，35(27) :8675－8679. ［30］朱自强，姚善强 .超临界流体萃取开发中的若干问题 ［J］.石油化工，1986，15(8) :512－518 . ［31］徐浩，张宗和，仲崇茂，等 .物理吸附法提纯五倍子单宁 的研究［J］.林产化学与工业，2008，28(6) :79－82. ［32］黄绍华，严慧和，孙健 .单宁的提取与纯化［J］.南昌大学 学报，2000，24(3) :279－281. ［33］帅益武，尤玉茹，袁海娜 .五倍子中鞣质的提取、分离纯 化研究［J］.食品科技，2007(6) :125－128. ［34］Kenji Aoki，Ryu Shlnke，Hiroshi Nishira. Purification and some properties of yeast tannase［J］. Agri Biol Chem，1976，40 (1) :79－85. ［35］P k Lekha，B K Lonsane. Comparative titres，locateon and properties of tannin acyl hydrolase produced by Aspergillus Niger PKL 104 in solid － state，liquid surface and submerged fermentations［J］.Process Biochemistry，1994(29) :497. ［36］ Crist bal No Aguilar，Christopher Augur. Induction and repression pattems of fungal tannase in solid－state and submerged cultures［J］.Process Biochemistry，2001，36(6) :565－570. ［37］Cruz Hemandez，M Augur.Evaluation of culture conditions for tannase production by Aspergillus niger GHI［J］. Food Technology and Biotechnology，2006，44(4) :1330－9862. ［38］李秧针，邱树毅，保玉心，等 .单宁酶发酵生产的研究进 展［J］.中国酿造，2008(11) :1－6. ［39］A Sabu，A Pandey，M Jaafar Daud，et al. Tamarind seed powder and palm kernel cake:two novel agro residues for the production of tannase under solid state fermentation by Aspergillus niger ATCC 16620［J］. Bioresource Technology，2005 (96) : 檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾 1223－1228. ( 上接第457 页) ［21］邓宇，郑先哲 .蕨菜微波真空干燥特性和品质实验研究 ［J］.农业工程学报，2008(5) :253－257. ［22］车刚，万霖，李成华 .蕨菜真空冷冻干燥工艺参数的优化 实验［J］.农业机械学报，2008，39(2) :98－102. ［23］朱正良，樊建，高雪松 .微波干燥等对蕨菜干制的研究 ［J］.云南农业大学学报，2002，17(3) :264－268. ［24］刘波，李凤林，程木志 .蕨菜全粉饮料生产工艺的优化 ［J］.安徽农业科学，2009，37(2) :823－824. ［25］苏艳兰，刘功德 .方便蕨菜的生产工艺［J］.广西热带农 业，2002(1) :26－27. ［26］陈乃富 .蕨菜茶的加工工艺研究［J］.饮料研究，2006，32 (3) :125－128. ［27］文美，王文平 .蕨菜系列休闲食品的开发［J］.中国调味 品，2002(12) :7－11. ［28］陈根洪，周志，汪兴平 .软包装即食蕨菜的加工工艺研究 ［J］.湖北农业科学，2004(1) :90－92. ［29］高云，王霞 .山野菜、食用菌复合软包装罐头加工工艺 ［J］.食品研究与开发，2002，23(1) :37－39. ［30］张学义，金建丽，于爽 .刺嫩芽、蕨菜加工过程中叶绿素 含量变化［J］.林业科技，2008，33(6) :62－64. ［31］张学义，张晶，安文和 .蕨菜加工过程中多酚氧化酶活性 研究［J］.牡丹江师范学院学报:自然科学版，2008(4) :17－18. ［32］安文和，张晶，张学义 .蕨菜盐渍过程中不同时间维生素 C的变化［J］.中国林副特产，2009(6) :37－38. ［33］R K Dawra，N P Kurade，O P Sharma.Carcinogenicity of the fern Pteridium aquilinum collected from enzooticbovine haematuria－free hilly area in India［J］.Current Science，2002，83 (8) :1005－1009. ［34］赵艳，李昂 .pH和钙离子促进采摘后蕨菜中类黄酮积累 的初步研究［J］.食品与发酵工业，2006，32(9) :52－55.