人参皂甙Rb1对马桑内酯癫痫的作用及
第34卷第5期2011年
JournalofLuzhouMedicalCollegeVol.34No.52011泸州医学院学报539
论著
人参皂甙Rb1对马桑内酯癫痫的作用
及海马蛋白组表达的影响*
赵春玲,张春来,徐倩,杨烨1,张春燕1
(泸州医学院:生理教研室;1生物化学教研室,四川泸州
摘646000)要目的:观察人参皂甙Rb1(GRb1)对马桑内酯(CL)所致大鼠癫痫及海马神经元损伤的作用,运用双向电泳(2-DE)技术获得可能与CL癫痫发作及GRb1神经保护作用有关的蛋白质成分,探讨海马组织蛋白质在癫痫发生发展过程中的作用和地位及GRb1对其的影响。方法:雄性成年SD大鼠随机均分为对照组、CL组和GRb1+CL组(n=10)。GRb1+CL组在实验前3d,大鼠每日灌胃GRb1(1.5mg/ml,30mg/kg),另2组灌胃等量生理盐水;实验日CL组和GRb1+CL组腹腔注射CL(1mg/ml,4mg/kg),对照组腹腔注射等量生理盐水。观察各组大鼠的行为学变化3h。各组半数动物麻醉后灌注固定,HE染色观察海马组织学改变。半数动物,断头处死剥离海马组织并提取蛋白,双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster2DPlatinumv5.0软件差异表达蛋白质组
分析
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,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:①癫痫发作的行为表现:对照组大鼠未见痫性发作;CL组痫性发作程度较高(Ⅲ~Ⅴ级);与CL组相比,GRb1+CL组大鼠的痫性发作程度明显减低,潜伏期变长,持续时间变短(P<0.01)。②海马组织学(HE染色)改变:对照组大鼠海马组织结构正常;CL组大鼠可见海马神经元变性坏死,尤以CA3区和齿状回最明显;GRb1+CL组大鼠海马神经元结构无明显改变。③获得大鼠海马组织蛋白质组双向电泳图谱;差异表达蛋白质组分析显示GRb1+CL组与对照组差异蛋白斑点84个,GRb1+CL组与CL组差异蛋白斑点120个。④鉴定出6个蛋白质分别是:脑肌酸激酶(braincreatinekinase)、吞蛋白A1(endophilin-A1)、UPF0628蛋白C10orf96同源物(UPF0628proteinC10orf96homolog)、细胞色素P-450(cytochromeP-450)、磷导素样蛋白(phosducin-likeprotein)及桥整合蛋白3(bridginginte-grator3)。其中前3个蛋白质在GRb1+CL组表达低于CL组,后3个蛋白质在GRb1+CL组表达低于对照组。结论:GRb1可减轻CL所致大鼠癫痫的发作程度及海马神经元损伤。CL组、GRb1+CL组和对照组的表达蛋白质组相比存在明显差异。鉴定出的差异表达的蛋白质braincreatinekinase、endophilin-A1、UPF0628proteinC10orf96homolog可能与CL所致癫痫发作有关;cytochromeP-450、phosducin-likeprotein及bridgingintegrator3可能与GRb1的神经保护作用有关。
关键词马桑内酯;癫痫;人参皂甙Rb1;双向电泳;蛋白质组
中图分类号R338;Q593文献标识码A文章编号1000-2669(2011)5-0539-07
EFFECTSOFGINSENOSIDERb1ONRATEPILEPSYINDUCEDBY
CORIARIALACTONEANDPROTEOMECHANGES
INHIPPOCAMPUS
ZhaoChunling,etal
DepartmentofPhysiology,LuzhouMedicalCollege
AbstractObjective:ToobservetheeffectsofginsenosideRb1(GRb1)onratepilepsyseizuresandthechan-gesofproteinexpressioninhippocampusinducedbyCoriariaLactone(CL),andtoexplorethemolecularmechani-smindevelopmentofCLinducedepilepsy.Methods:ThirtyadultmaleSDratswererandomlydividedinto3groups:controlgroup,CLepilepticgroupandGRb1+CLgroup.TheGRb1+CLgroupwasadministeredorallywithGRb1(1.5mg/ml,30mg/kg)onceadayfor3days.TheotherswereadministeredorallywithsamevolumeofNS.Onthefourthday,theratsinCLandGRb1+CLgroupwereadministeredbyintraperitonealinjectionwithCL*四川省教育厅资助项目(2006C010)
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