耳蜗外电刺激诱发听力正常幼猫听性脑干反应

耳蜗外电刺激诱发听力正常幼猫听性脑干反应 耳蜗外电刺激诱发听力正常幼猫听性脑干 反应 听力学及言语疾病杂志2008年第16卷第6期499 ?实验.开究? 耳蜗外电刺激诱发听力正常幼猫听性脑干反应 王伟伟张道行张岩昆田吴 【摘要】目的探讨幼猫蜗外电诱发听性脑干反应 (electricallyaudiotorybrainstemresponses,EABR)检测的 可行性, 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf 猫蜗外EABR的波形特点.方法选取健康幼猫13只,氯胺酮(50mg/kg)肌注麻醉后,首先行ABR 测试,选取听力正常耳行蜗外EABR检测.结果13只健康幼猫中,23耳听力正常,对其中21耳行EABR检测, 皆可记录到EABR波形,可以记录到?,?,?,V波,其中波?和波?最清晰,波I因被刺激伪迹所掩盖一般记录 不到.其EABR波形与ABR相似,振幅随刺激强度的减小而减小,潜伏期随刺激强度的减小而延长.刺激电流强 度为1mA时,EABR波?,?,?的潜伏期分别为1.6O士0.09,2.38?0.10,2.93?0.13ms,较ABR相应的波潜伏 期明显缩短.与ABR相比,EABR的?一?,?一?,?一?波间期分别平均缩短约0.24,0.19,0.41ms,差异均 有统计学意义(P<O.05).结论通过一系列减少伪迹干扰的方法,可稳定地记录到听力正常幼猫蜗外EABR波 形,其波形与ABR相似,但各波潜伏期及波间期均较ABR缩短. 【关键词】电诱发听性脑干反应;听性脑干反应;蜗外电刺激;幼猫 【中图分类号】R764.05【文献标识码】A【文章编号】 1006—7299(2008)06—0499—04 TheApplicationoftheEABRtoNormalHearingKittenswithPromontoryStimulation WangWeiwei,ZhangDaoxing,ZhangYankun,eta1. (DepartmentofOtoIaryngoIogy,AffiliatedBeijingFriendshipHospitalofTheOaptia MedicalUniversity,Beijing,100050,China) [Abstract]ObjectiveToinvestigatethefeasibilityofrecordingtheEABRwithpromontory stimulationin normalcats.andtOanalyzethefeaturesoftheEABR.MethodsThirteenhealthykittenswer eselectedforthestud— y.Thesedatedanimalsreceivedclick—evokedauditorybrainstemresponsetesting.Theea rswithnormalhearing wereusedtOrecordEABR.ResultsAmong23normalhearingearsin13healthykittens,21e arsweretestedwith promontoryEABRstimulation.Wave?,IlI,?andVwererecordedinEABRtest;however,Wave1wasnotre— cordedbecauseofexcessiveartifacts.WaveIIIand?hadthebestmorphologyandweresimilartOABR.Asstimu— latingintensitywasdecreasing,theamplitudeofEABRdecreasedandthelatencywasprolo nged.Ascomparedwith theresultsofABR,theinterpeaklatenciesofal1themajorwaveswerestatisticallyreduced. ConclusionPromonto— ryEABRwastestedinnormalhearingkittensandEABRwasrecordedsteadilyusingmetho dsofreducingartifacts. [Keywords]Electricallyauditorybrainstemresponses(EABR);Auditorybrainstemresp onses(ABR): Promontorystimulation;Kitten 电诱发听性脑干反应(electricallyauditory brainstemresponses,EABR)是电刺激听神经末梢 螺旋神经节,诱发出听神经和脑干产生一系列的电 位活动,通过容积导体扩布,应用数学平均技术和叠 加原理在头皮记录到一系列的电位变化].EABR 是一种客观的神经电生理检测方法,不受耳蜗残留 毛细胞多少的限制,作为一项新的临床应用科学,在 耳科学,听力学和神经科学中占有重要的位置,具有 广泛的临床应用前景. 1首都医科大学附属北京友谊医院耳鼻咽喉科(北京100050) 作者简介:王伟伟,男,山东人,住院医师,主要从事听力学方面的 研究. 在动物实验研究中,目前国内外的研究多集中 于耳蜗内电刺激诱发EABR来了解听功能状 态L2],对蜗外电刺激诱发EABR的研究较少.本 研究对听力正常幼猫进行蜗外电刺激来记录电诱发 听性脑干反应(EABR),探讨可稳定引出EABR的 条件并总结EABR波形的特点,报告如下. 1材料与方法 1.1实验仪器及设备 IHS诱发电位仪(USA),IHS诱发电位仪配套 电刺激器,与诱发电位可以进行同步触发连接,其作 用主要是用来产生电荷平衡双向脉冲电流(charge — balancedbiphasiccurrentpulses),LecaMS2型 号耳科手术显微镜以及球状电极.实验在电磁屏蔽 500JournalofAudiologyandSpeechPathology2008. Vol16.No.6 室内进行. 1.2实验动物 选用健康幼猫13只(购于北京友谊医院实验动 物室),月龄2,3个月,体重500,1100g,发育正 常,雌雄不限,均经耳镜检查鼓膜正常. 1.3动物麻醉 给猫肌注氯胺酮(50mg/kg)麻醉,以后每次问 隔大约9O分钟肌注氯胺酮(20mg/kg)维持麻醉. 1.4幼猫的听性脑干反应(ABR)检测 所有动物实验前均行双耳ABR0n,0试以了解听 功能.记录电极位于额顶正中皮下,参考电极位于 对侧乳突皮下,地极位于鼻尖,极间电阻<3kn. 采用IHS诱发电位仪,刺激声为短声(click),时程 为O.1ms,刺激重复速率21.1次/秒,滤波带宽100 , 3000Hz,叠加512次,扫描周期10ms.短声首 先以10dB递减,接近阈值时以5dB递减,以能分 辨出ABR波?的刺激强度确定阈值[5]. 1.5听力正常幼猫的蜗外EABR检测 ABR测试完毕后,选取听力正常的幼猫,术野 脱毛备皮,l利多卡因加O.1肾上腺素混液2mI 行耳后切口处浸润麻醉,作耳后切口,用电钻磨开猫 的乳突和鼓室,暴露猫耳蜗的圆窗龛,注意勿损伤圆 窗膜.然后行蜗外EABR检测.记录电极位于额 顶正中皮下,参考电极位于对侧乳突皮下,地极位于 鼻尖,极间电阻要求<3kQ.使用IHS诱发电位仪 来记录EABR,刺激电极置于圆窗龛,刺激参考电极 置于乳突周围肌肉内,采用波宽为200ps/phase的 电荷平衡双向脉冲电流进行刺激,刺激频率15Hz, 刺激速率为20次/秒,增益为10,15万,滤波带宽 3O,3000Hz,叠加128次,扫描周期10ms,电刺激 与诱发电位记录同步触发,接近阈值时电流强度以 5OA递减.阂值判辨j:EABR的波?的幅值至 少为0.1V时刺激最低的电流值,ABR和EABR 各波的潜伏期均为刺激开始到波峰的时间,幅值为 波峰到基线(幅度为零)的垂直距离. 1.6统计学方法 结果均以?5表示.采用SPSS11.5软件处 理数据.所有资料均进行正态性检验,ABR与 EABR波?的潜伏期和幅值,?一?,?一V波间期 的差异比较采用配对,检验. 2结果 2.1幼猫的ABR检测结果 13只幼猫(26耳)对实验过程均耐受良好,未发 生死亡.其中23耳听力正常,其余3耳因ABR反 应阈高废弃未用.听力正常的23耳可清晰地记录 到ABR波形,大多数为波?最清晰,短声70dB nil[刺激时ABR波?的振幅为2.26?0.62V, 各波潜伏期和波间期见表1. 2.2EABR的检测结果 2.2.1EABR波形的一般特点对听力正常的23 耳中的21耳行蜗外EABR检测,21耳皆记录到 EABR波形.EABR波形为一系列规律变化的颅顶 正波,可以记录到?,?,?,V4个波,波工因被刺 激伪迹所掩盖一般记录不到,其中波?和波?最清 晰,2例波?和波?形成复合波,13耳引出波V,引 出阳性率为62,且波V振幅一般较小.与短声刺 激的ABR相比较,EABR波形与ABR相似,其波 潜伏期随刺激强度的减小而延长,波幅随刺激强度 的减小而减小,但这种变化规律没有ABR变化明 显. 2.2.2EABR阈值和各波潜伏期及波间期(表1, 图1)EABR阈值为575?115A.EABR各波潜 伏期均短于ABR所对应的各波,平均缩短约0.8 时EABR波?的振幅 ITIS.电流刺激强度为1mA 为1.54?O.56肛V. 表170dBnHL短声刺激时ABR和1mA电流刺激时EABR各波潜伏期和波间期 lms,?) 注:*与ABR相应波潜伏期和波问期比较,P<O.05 与ABR相比,EABR的?一?,?一?,?一 ?波间期平均分别缩短约0.24,0.19,0.41i”lqS,差 异均有统计学意义(P<0.05). 3讨论 EABR的技术原理以听性脑干反应(auditory brainstemresponses,ABR)为基础.ABR是声刺 激诱发的脑干生物电反应,是由1,1Oms潜伏期内 出现的一系列反应波组成,它反映听神经和脑干的 神经电活动,是一项用来了解听觉传导通路功能状 态的重要的客观检测方法[5].在声刺激达到极限也 无法引出听性脑干反应波形时,可改换成给予电刺 激.电诱发听性脑干反应(EABR)便是电刺激听神 经末梢螺旋神经节,诱发出听神经和脑于产生一系 列的电位活动,通过容积导体扩布,应用数学平均技 术和叠加原理在头皮记录到一系列的电位变化. EABR是一种客观的神经电生理检测方法,不受耳 听力学及言语疾病杂志2008年第l6卷第6期 罂 蜷 坚 30L(B) 20L(B) ,, —,—, lvV 40L(B)一 0123456789101112 时间(ms) 图1同一只猫耳的ABR和EABR波形 (a为ABR波形,b为EABR波形) 蜗残留毛细胞多少的限制,对于极重度听力损失的 人或者动物,可通过电诱发听性脑干反应判断听觉 传导通路的完整性. 猫的ABR波形基本由I,?,?,?,V5个波 组成,其中波I,?更清晰稳定.猫的ABR起源 学说认为,波工来源于听神经,波?来源于同侧耳蜗 核及上橄榄核下部与其相连部分,波?来源于双侧 上橄榄核群,波?来源于双侧下丘,波V主要来源于 对侧下丘.本实验中,所有猫都清晰的记录到了 ,V4个波,部分猫ABR波工未记录到. ABR? 刺激短声强度为70dBnHL时,猫ABR波?的潜 伏期为3.76?0.12ms.Hardie等[对4只听力正 ,在92dBSPL时,波?的潜伏 常的猫行ABR检测 期为3.6O?0.04ms,与本实验相当. EABR的记录原理与ABR相近,但由于电刺 激对诱发电位产生较大的伪迹干扰,消除伪迹成为 EABR检测的难点和关键所在,记录到良好的诱发 电位波形是EABR发挥其应用价值的重要因素. 本研究参考张道行等在对人工耳蜗植入者行 EABR检测研究中,总结出的减小伪迹的方法,采 用:?将电刺激与诱发电位记录同步;?实验在电, 磁屏蔽室内进行;?猫处于麻醉状态;?交替极性脉 冲刺激;?适宜的刺激,记录参数;?避免刺激频率 为设备电源交流电频率的整数倍或分数;?对侧记 录等方法,记录到形态较好的EABR波形,进一步 验证了以上减少伪迹方法的可行性和稳定性.本实 验检测的21耳皆记录到EABR波形,可以记录到 ?,?,?,V4个波,以波?最明显,波工因被刺激 伪迹所掩盖一般记录不到,波?有时也被刺激伪迹 掩盖,波V出现率不高,且波V振幅较小.EABR波 形与ABR波形形态相似,在本研究中有一只猫耳 的ABR波V最明显,其对应的EABR亦是波V最 明显,进一步说明了EABR波形与ABR波形的相 似性. EABR的波形特点与ABR相似,具有较好的 重复性,但也有不同.本研究中,听力正常幼猫 EABR各波潜伏期均明显短于ABR所对应的各波 潜伏期.Kileny对耳聋患者术前经鼓岬刺激检测 EABR时,发现EABR的各波潜伏期明显短于正常 人的ABR的各波_7].对于EABR各波潜伏期缩短 的原因, 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 可能是由于电流刺激通过鼓岬作用于 听神经末梢螺旋神经节,省略了声音于外耳,中耳传 导和内耳感受的一些耗时环节l_8]. 国内外学者大都是将电极植入猫耳蜗内进行 EABR相关研究[e,43,Hardie等_2和倪道凤_9进行 蜗内电刺激诱发EABR反应,发现EABR波形与 ABR波形形态相似,EABR波?潜伏期随刺激强度 的减小而延长,但这种变化的动态范围较ABR小, 本研究行蜗外电刺激诱发得到的EABR波形也具 有同样的特点.Hardie的实验l_2中,阈上6dB刺 激诱发的蜗内EABR波?潜伏期为2.56?0.02 Ells,倪道凤等的实验中,刺激强度为1mA时, EABR波?潜伏期约为2.7ms,本实验刺激强度为 ?的潜伏期为2.93?0.13ms,较 1mA时EABR波 蜗内电刺激时EABR的波?的潜伏期长,考虑蜗外 电刺激时电流需通过鼓岬扩布至螺旋神经节而导致 延时,且刺激参数的不同也会对其产生影响. 本实验发现EABR的?一?,?一?,?一? 波间期明显比ABR相对应的波间期短,倪道凤 等也发现EABRIll一?,II—III,II—IV波间期较 ABR缩短.说明电刺激产生的冲动在听觉中枢通 路的传递与声刺激有差别,其机制是影响突触传递 功能还是影响神经纤维的传导速度,有待于进一步 研究. 4参考文献 lGordonKA,PapsinBC,HarrisonRV.Activity--dependent developmentalplasticityoftheauditorybrainsteminchildren whousecochlearimplants[J].EarHear,2003,24:485. 2HardieNA,SheperdRK.Sensorineuralhearinglossduring development:morphologicalandphysiologicalresponseofthe 5O2JournalofAudiologyandSpeechPathology2008. Vol16.No.6 实验研究 耳蜗缺血损伤动物模型的建立 冯彪邱建华 【摘要】目的探讨建立一种耳蜗缺血动物模型的方法.方法将3O只豚鼠随机分为3组:正常组,手术 组,血栓组,每组1O只.血栓组通过手术经颅底暴露小脑前下动脉(anteriorinferiorcerebellarartery,AICA),使用 4O三氯化铁(FeCl)溶液诱导AICA形成血栓;手术组仅完成暴露豚鼠小脑前下 动脉;正常组未作特殊处理.手 术完成后饲养动物1周,实验过程中采用激光多普勒血流量仪监测耳蜗底回血 流量(cochleabloodflow,CoBF),实 验前后及术后1周测试三组豚鼠听性脑干反应(ABR)波?反应阂,血栓组将 AICA组织切片HE染色观察血栓形 态.结果手术组和血栓组动物均存活7,3O天,血栓组在FeC1.诱导后,CoBF值下 降至诱导前约5O,ABR波 ?反应阈均比实验前有明显提高,正常组和手术组实验前后差异无统计学意 义.AICA切片HE染色,可见血栓组 AIcA有明显白色血栓形成,成分为纤维素,血小板及少量红细胞.结论应用FeC1. 能够成功诱导小脑前下动脉 血栓形成,可制备耳蜗缺血损伤模型;动物能够存活1周以上,最长达3O天,是一 种慢性耳蜗缺血损伤模型研究的 新尝试,为临床研究慢性内耳微循环障碍疾病提供较理想的实验动物模型. 【关键词】动物模型,慢性缺血;耳蜗;三氯化铁;动脉血栓;耳蜗血流量 【中图分类号1R764.35【文献标识码】A【文章编号 11006—7299(2008)06—0502—04 AGuineaPigModelofCochlearIschemia FengBiao,QiuJianhua (DepartmentofOtorhinoIaryng0Iogy,XijingHospital,TheFourthMilitary MedicalUniversity,Xi’an,710032,China) [Abstract]ObjectiveToexploreanewmethodforestablishingananimalmodelofcochleari schemia.Meth- odsThirtyguineapigswererandomizedintothreegroups:normalgroup,operationgroup,i schemiagroup.Ante— riorinferiorcerebellarartery(AICA)wasexposedsurgicallyviaaskullbaseapproach.Inisc hemiagroup,asmall pieceoffilterpapercontainingFeC13wasplacedupontheAICAtoinducethrombusformat ion.Inoperationgroup, *国家自然科学基金资助项目(项目编号:39200133) 1西安第四军医大学西京医院全军耳鼻咽喉头颈外科中心(西安710032) 作者简介:冯彪,男,陕西人,硕士研究生,主要研究方向为耳聋的病因研究. 通讯作者:邱建华(Email:qiujh@fmmu.edu.cn) cOChleaandauditorybrainstem[J].HearingResearch,1999, 128:147. 3BeitelRE,SnyderRL,SchreinerCE,eta1.Electricalcochlear stimulationinthedeafcat:comparisonsbetweenpsychophysi— calandcantralauditoryneuronalthresholds[J].JNeurophysi ol,2000,83:2145. 4刘爱国,王正敏,崔永华,等.刺激电极在鼓阶内位置对听神经 兴奋性的影响[J].听力学及言语疾病杂志,2004,12:249. 5LindinM.ZurronM,DiazF.ChangesinP300amplitudedu— ringanactiveStandardauditoryoddballtask[J].BiolPsychol, 2004,66:153. 6张道行,张岩昆,田吴,等.人工耳蜗植入者EABR,NRT与 ESR检测[J].听力学及言语疾病杂志,2005,13:310. 7KilenyPR,ZwolanTA,Zimmerman--PhillipsS,eta1.Electri callyevokedauditorybrainstemresponseinpediatricpatients withcochlearimplants[J].ArchOtolaryngolHeadNeckSur— gery,1994,120:1083. 8SauvagetE,PereonY,Nguyen--The—TichS,eta1.Electricallye— yokedauditorypotentials:comparisonbetweentranstympamc Dromontory_andround,windowstimulations[J].Neurophysiolo— gieClinique/ClinicalNeurophysiology,2002,32:269. 9倪道风,SheperdRK.幼猫鼓阶内慢性电刺激生理学研究[.『]. 中国医学科学院学报,l992,14:402. (2008—02—03收稿) (本文编辑周涛)